12项肿瘤标志物检测乳腺癌的临床意义

[目的]了解12项肿瘤标志物指标在乳腺癌中的表达.[方法]采用蛋白芯片法检测术前乳腺癌75例及正常对照组160例12项肿瘤标志物.[结果]12项指标中乳腺癌组较正常对照组高,且具有统计学意义的指标有:CA125、CA153、CEA、CA199、Ferritin;但敏感性及特异性均不高.[结论]单项指标诊断乳腺癌的准确性均不高,价值有限,CA125、CA153、CEA、CA199是联合诊断乳腺癌可选指标.     

妇科门诊21种人乳头状瘤病毒感染状况分析

目的：分析绍兴市区妇科门诊女性生殖道21种人乳头状瘤病毒（HPV）感染状况及其分布规律。方法：以2005年1月-2006年6月绍兴市区妇科门诊至少有1年以上性生活史的女性1359例为研究对象．采集其阴道宫颈分泌物标本，用凯普医用核酸分子杂交系统（简称HyrbriMax）进行21种HPV（6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304）基因型的分型检测，分析常见感染亚型和分布规律。结果：研究人群HPV总阳性率为54．75％，常见的10种高危型为HPV16、52、58、68、18、31、33、66、CP8304、53：常见的3种低危型为HPV11、6、42。最常见高危型HPV16阳性率随年龄增加递增．最常见低危型HPV11的阳性率随年龄增加递减。多重感染的比例为44．35％，以二重感染最多见。结论：本地区妇科门诊HPV感染率和多重感染比例均较高，常见感染亚型既符合亚洲人群的分布规律，又有一定的区域性，值得重视。     

原发性耳及咽喉结核误诊原因分析

近年来 ,结核病发病率呈上升趋势 ,这种上升趋势亦反映在耳鼻咽喉科领域〔1〕,同时该病的临床特征也较过去有很大差别 ,尤其是原发于耳鼻咽喉结核更容易误诊 ,延误治疗。 1994～ 2 0 0 1年我科收治误诊的耳、咽喉部原发性结核患者 10例 ,现对其误诊原因进行分析 ,为提高此类患者的早期诊断率提供参考。1　临床资料本组患者 10例 ,男 7例 ,女 3例 ;年龄 2 5～ 6 5岁 ,平均 4 5 .5岁。病程 1～ 6个月。全部病例否认结核病史及结核接触史。X线胸片均无异常。 9例由外院治疗无效转来我院。 1例在我院误诊。喉结核 5例 ,均有声嘶 ,其中 3例有咽…     

Jmjd3基因慢病毒干扰载体的构建及其去H3K27三甲基化作用研究

目的 构建针对小鼠Jmjd3基因的RNAi慢病毒载体,感染小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stem cells,mBM-MSCs)后观察其对Jmjd3基因表达的影响及对组蛋白H3K27me3的去甲基化作用.方法 根据Jmjd3mRNA序列设计并合成3对shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入PLL3.7慢病毒干扰载体,双酶切和DNA测序鉴定重组克隆,重组质粒与其他3种辅助包装质粒(pRsv-REV,pMDlg-pRRE,pMD2G)共转染293T细胞生产病毒液,病毒液感染mBM-MSCs,荧光定量PCR和Western blot检测目的基因Jmjd3的表达,筛选出最有效的干扰序列.Western blot检测组蛋白H3 K27 me3的表达量,分析Jmjd3的生物学功能.结果 双酶切和测序结果证实Jmjd3基因shRNA序列正确插入慢病毒载体.荧光定量PCR和Western blot结果显示,感染后Jmjd3表达显著下调,与空载体对照组相比,Jmjd3-shRNA1组、Jmjd3-shRNA2组和Jmjd3-shRNA3组分别下调88.9％ (P ＜0.001)、67.9％ (P ＜0.001)和72.4％ (P ＜0.001),Jmjd3-shRNA1组为最佳干扰组.Western blot结果显示干扰Jmjd3之后,H3K27me3的表达较空载体对照组升高.结论 成功构建了针对小鼠Jmjd3基因的慢病毒干扰载体,并能有效抑制mBM-MSCs中Jmjd3基因的表达,Jmjd3具有组蛋白H3K27me3的去甲基化作用.     

甲基化转移酶Suv39h1基因慢病毒表达载体构建及鉴定

目的构建小鼠H3K9甲基转移酶Suv39h1基因慢病表达毒载体。方法设计并合成带有Kpnl和Xmal酶切位点的引物,以携带Suv39h1 cDNA的PCMV-SPORT6载体为模板扩增目的基因,将其与Lenti-eGFP-Neo载体双酶切,T4连接酶连接,构建成PLenti-eGFP-Suv39h1重组载体,转化感受态细胞DH5α,PCR筛选阳性克隆质粒,酶切与测序鉴定正确后,将慢病毒四质粒系统共转染293T细胞,包装及效价测定。以感染复数(MOI值)为10和30的慢病毒颗粒感染293T细胞,RT-PCR检测Suv39h1 mRNA表达。结果 PCR、酶切及测序结果均显示目的片段插入正确,四质粒共转染293T细胞后,镜下可见95%的细胞表达绿色荧光;效价测定为2.11×108TU/ml;RT-PCR检测显示,MOI值为30的Suv39h1表达量是MOI值为10的3倍,两者均可在293T细胞中均匀稳定表达。结论成功构建Suv39h1基因慢病毒表达载体,为后续Suv39h1基因功能研究奠定了基础。     

Mus81和GEN1基因在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究肺癌组织中Mus81及GEN1的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot检测30例肺癌组织及其相应癌旁组织中Mus81及GEN1 mRNA和蛋白的表达情况,分析其临床意义。结果30例肺癌组织中Mus81mRNA和蛋白表达水平低于相应癌旁组织,差异具有统计学意义（t=-3．529,P〈0．05;t=-4．273,P〈0．05）;30例肺癌组织中GEN1 mRNA和蛋白表达水平同癌旁相比无统计学差异（t=-2．006,P〉0．05;t=0．957,P〉0．05）。30例肺癌组织中Mus81表达水平和GEN1表达水平无明显相关性（P〉0．05）。结论肺癌组织中Mus81表达低于癌旁组织,提示Mus81表达下调可能和肺癌的发生相关;GEN1在肺癌组织中的表达水平同癌旁相比无统计学差异,提示GEN1在肿瘤的发生、发展过程中可能不起主要作用;肺癌组织中Mus81的表达水平和GEN1的表达水平无明显相关性。     

多肿瘤标志物指标诊断肺癌的临床应用价值探讨

目的了解12项肿瘤标志物指标与肺癌的相关性,从而为多指标联合诊断提供依据。方法采用蛋白芯片法检测12项肿瘤标志物;术前肺癌组共97例,正常对照组共160例。结果 12项指标中肺癌组较正常对照组高且具统计学意义(P<0.05)的指标有:CEA、CA125、Ferritin、CA242、CA199、CA153、HCG,与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)的指标有:NSE、AFP、f-PSA、PSA、HGH。结论单项指标诊断肺癌的准确性均不高,价值有限,CEA、CA125、Ferritin、CA242、CA199、CA153、HCG均为肺癌相关指标,是联合诊断的可选指标。NSE指标仅对小细胞肺癌有诊断价值。     

妇科门诊患者HPV6111618分型检测及结果分析

人乳头状瘤病毒（humanpapillomavirus，HPV）是一种嗜人体皮肤和粘膜组织细胞的病毒，可广泛感染人类皮肤及生殖道、呼吸道上皮组织，与人类的多种良恶性肿瘤密切相关。在发现的HPV型中，约有30种可以感染生殖道。根据其致病性差异，可分为低危型HPV（如6、11、42、43、44型）和高危型HPV（如16、18、31、33、39、45、51、52、58、59、68型）。低危型HPV主要导致尖锐湿疣，而高危型HPV还与宫颈癌密切相关。为了解本地区女性HPV感染情况，作者对1014例本院就诊患者作HPV6／11、HPV16／18型的荧光定量聚合酶链反应（PCR）基因分型检测，旨在积累本地区女性HPV6／11、HPV16／18型感染的分子流行病学资料，为预防提供对策。