消化道肿瘤患者化疗前后血胰岛素样生长因子-1、胰岛素样生长因子结合蛋白-3水平测定

目的:检测消化道肿瘤患者化疗前后血胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3),并探讨2者与肿瘤化疗疗效的关系.方法:应用ELISA方法检测27例化疗有效的消化道肿瘤患者及20例化疗无效肿瘤患者化疗前后血IGF-1、IGFBP-3水平,并选择42例正常人作为对照.结果:化疗有效组及无效组化疗前血IGF-1、IGFBP-3水平与对照组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05);2组2个指标化疗后水平与化疗前比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).有效组与无效组化疗后2个指标比较,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论:血IGF-1、IGFBP-3水平与消化道肿瘤化疗疗效有关,可作为预测化疗疗效的指标之一.     

三氧化二砷上调Maspin表达的初步研究

目的对三氧化二砷(As2O3)作用人食管癌细胞株Ec109前后Maspin蛋白的表达进行比较研究。方法采用免疫组化的方法检测As2O3处理Ec109前后Maspin蛋白的表达。结果未经As2O3处理的Ec109细胞Maspin蛋白表达水平较低(9.74%),经As2O3作用后Ec109细胞Maspin蛋白表达水平增加(23.16%),两者有显著性差异(P<0.05)。结论As2O3抗肿瘤作用可能与上调maspin表达有关。     

TS mRNA 水平对食管癌化疗的预测价值

 目的 探讨化疗前食管癌组织中胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)转录水平及其对顺铂/5-氟脲嘧啶(DDP/5-Fu)疗效的预测价值. 方法 20例食管癌患者均接受2个周期DDP/5-Fu化疗.DDP 15～20 mg/m2/d,iv d1-5;5-Fu 375～500 mg/m2/d,ivgtt 8 h,d1-5,休息4周后,进行第二个周期化疗.以β-肌动蛋白(β-actin)作内参照,应用半定量RT-PCR技术检测化疗前食管癌癌组织中TS mRNA水平,以TS/Β-actin比值表示.实验数据经SPSS 10.0统计软件处理,化疗有效和无效组间TS mRNA水平间差异分析采用Wilcoxon秩和检验;双侧检验,α取0.05作为显著性检验的标准. 结果 20例食管癌患者中,11例化疗有效者的TS/β-actin mRNA水平中位值为3.90×10-1,而9例化疗无效者的TS/β-actin mRNA水平中位值为9.10×10-1,两组差异具有统计学意义(P<0.05). 结论 化疗前食管癌组织中TS mRNA水平对应用DDP/5-Fu治疗食管癌的疗效具有一定预测价值.     

羟基喜树碱冻干粉剂(喜素)联合化疗胃肠道肿瘤的临床研究

目的　观察含羟基喜树碱冻干粉剂 (喜素 )方案与含羟基喜树碱水剂方案治疗胃肠道肿瘤的疗效及不良反应。方法　以含喜素方案 (喜素 顺铂 甲酰四氢叶酸钙 5 氟脲嘧啶 )作为治疗胃肠道肿瘤的化疗方案与同期含羟基喜树碱水剂方案 (羟基喜树碱 顺铂 甲酰四氢叶酸钙 5 氟脲嘧啶 )比较 ,每 3周为 1个周期 ,至少完成 2个周期 ,观察各组治疗方案治疗效果及不良反应。结果　各组的治疗效果无显著性差异 (P >0 0 5 )。含羟基喜树碱水剂方案组血液系统不良反应大 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　喜素可作为羟基喜树碱水剂的替代剂型用于胃肠道肿瘤的联合化疗中。     

PI3K/Akt抑制剂LY294002对大肠癌细胞化疗增敏作用的探讨

目的 探讨PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002与化疗药物联合使用对大肠癌细胞(HCT-8)化疗效果的影响.方法 将LY294002联合化疗药物作用于大肠癌细胞系HCT-8,MTT法检测单独使用5-Fu、奥沙利铂及联合PI3K抑制剂LY294002,对体外培养的大肠癌细胞系HCT-8增殖的抑制作用,流式细胞术检测HCT-8的凋亡率.结果 联合LY294002作用后,5-Fu、奥沙利铂对大肠癌细胞系HCT-8增殖的抑制作用明显增强(P<0.05),且能提高其凋亡率(P<0.05).结论 LY294002能有效提高化疗药物5-Fu、奥沙利铂体外对HCT-8细胞抑制作用的敏感性,抑制PI3K介导的信号转导通路,可明显提高大肠癌的化疗效果.     

耐紫杉醇食管鳞癌细胞株Ec9706/P-1的建立及特征

目的：建立人食管癌紫杉醇耐药细胞系Ec9706/P-1并研究其生物学特征,为食管癌临床治疗提供实验依据.方法：小剂量逐步间歇诱导,建立人食管癌紫杉醇耐药细胞系Ec9706/P-1.用MTT法检测该耐药细胞株的多药耐药性及耐药指数,采用流式细胞术进行细胞周期分析.应用罗丹明（Rh123）排出试验定测P-gp功能.采用免疫组织化学方法检测多药耐药蛋白（MDR1）、多药耐药相关蛋白（MRP1）的表达情况.结果：Ec9706/P-1细胞与Ec9706细胞镜下形态无明显差别,体积稍大;Ec9706/P-1生长缓慢（P＜0.05）,倍增时间延长（P＜0.05）,大部分肿瘤细胞集中在G0＋G1期（P＜0.05）;MTT结果显示Ec9706/P-1对PIX的耐药指数为6.68,具有紫杉醇耐药性;Rh123排出试验显示Ec9706/P-1细胞平均荧光强度显著降低;免疫细胞化学方法检测发现Ec9706/P-1多药耐药蛋白（MDR1）表达明显升高（P＜0.05）,多药耐药相关蛋白（MRP1）表达无统计学意义（P＞0.05）.结论：Ec9706/P-1具有明确的耐药性,但耐药蛋白表达不一致,耐药机制复杂,可用于食管癌临床治疗的基础研究.     

恶性淋巴瘤阴虚综合征患者细胞因子基因表达谱的实验研究

目的观察恶性淋巴瘤阴虚综合征患者炎症细胞因子的基因表达变化规律，论证阴虚综合征的发病学机理是细胞因子网络紊乱的理论研究结论。方法以患者外周血单个核细胞为材料，使用含有495个与炎症有关基因的细胞因子基因芯片，测定恶性淋巴瘤阴虚和非阴虚患者细胞因子的基因表达谱差异。结果恶性淋巴瘤阴虚综合征患者炎性细胞因子IL-1α、IL-1β、TNFβ具有上调趋势，IL-8则明显上调，而抗炎性因子IL-10表达水平比值则有下降趋势。结论本研究结果从恶性淋巴瘤的角度，验证的阴虚综合征本质的理论研究结论，表明恶性淋巴瘤患者出现阴虚综合征时炎性细胞因子IL-1α、IL-1β、TNFβ、IL-8表达增强，同时抗炎性因子IL-10表达减弱，引起细胞因子网络紊乱的结果。     

全反式维甲酸对食管癌细胞系EC109作用的研究

目的 探讨不同浓度全反式维甲酸(ATRA)对食管癌细胞系EC109的生长抑制作用及其机理.方法 不同浓度ATRA作用于细胞EC109,采用MTT法检测细胞生长;通过流式细胞仪检测和DNA梯状电泳证实凋亡存在;用RT-PCR方法检测凋亡诱导过程中p53、bcl-2和bax基因表达变化.结果 ATRA呈剂量及时间依赖性抑制细胞生长;琼脂糖电泳呈现凋亡DNA梯状条带;流式细胞仪分析存在明显的凋亡峰;ATRA处理组bax和p53基因表达上调,但bcl-2基因表达下调.结论 ATRA具有抑制食管癌细胞株EC109生长作用,其机理可能是诱导细胞凋亡,其分子机制可能与bcl-2/bax和p53的表达相关.     

截短的食管癌相关基因ECRG4在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化

目的本实验旨在构建ECRG4的原核表达载体，在大肠杆菌中表达并纯化ECRG4所编码的蛋白，为进一步研究奠定基础。方法将ECRG4基因序列前端编码疏水性跨膜区28个氨基酸的cDNA序列截去，再将截短的cDNA序列克隆到原核表达载体Pet30（＋）上，重组表达载体转化感受态表达菌株BL21（DE3），低浓度IPTG低温诱导融合蛋白的表达。采用Western blot鉴定目的蛋白的表达，使用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化。结果构建了截短的ECRG4．pET30a（＋）基因的原核表达载体，IPTG低温诱导得到大量可溶性蛋白，并且通过亲和层析纯化了重组融合蛋白。结论成功获得了高效表达的、具有一定的生物学活性的ECRG4原核表达产物，并为进一步研究ECRG4的结构和功能打下基础。     

三氧化二砷重新激活PC-3前列腺癌细胞雄激素受体基因的表达

目的探讨三氧化二砷（As2O3）重新激活PC-3前列腺癌细胞雄激素受体（AR）基因的表达。方法用免疫组织化学的方法，对用浓度为2mg／L的As2O3处理前后的PC-3前列腺癌细胞和阳性对照的LNCaP前列腺癌细胞（AR）基因的表达情况进行检测分析。结果As2O3处理过的PC-3前列腺癌细胞AR的阳性表达率明显增高（P〈0．05）。结论As2O3可以重新激活PC-3前列腺癌细胞（AR）基因的表达。