节律基因mClock在肿瘤实验化疗中的作用

目的 研究节律基因mClock在顺铂诱导小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)凋亡中的作用.方法 体外采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐(PMA)诱导LLC细胞近日节律,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测细胞mClock基因的节律性表达.于诱导后不同时间点,顺铂(CDDP)处理细胞,24 h后四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法和流式细胞术检测(FCM)其对细胞的增殖与凋亡的影响.采用脂质体介导方法将mClock基因转染至LLC细胞,顺铂处理细胞,24 h后MTT法和流式细胞术检测其对细胞的增殖与凋亡的影响.结果 PMA作用LLC后,mClock基因呈现节律性表达.PMA诱导LLC节律表达的不同时间点,细胞对顺铂的敏感性不同.mClock过表达使顺铂作用后LLC凋亡率下降,细胞增殖明显.结论 mClock能够抑制顺铂诱导LLC的凋亡.     

微囊化细胞移植的研究进展

微囊技术为组织／细胞移植开辟了新途径,它有产地避免了移植后的免疫排斥反应,并解决了移植物来源稀少的问题。微囊的包裹材料有多种,以海藻酸钠－多聚赖氨酸－海藻酸钠（APA）应用最为广泛,可通过提高其生物相容性,从而减弱免疫排斥反应。微囊具有良好的免疫隔离作用。体现在对免疫活性细胞及部分细胞因子的阻挡作用,使移植物能存活下来并能发挥其功能,目前对微囊化人工细胞的研究取得了很大的进展,特别是基因工程细胞日益成为研究的焦点。微囊技术是一新兴的,尚需进一步改进的技术,它在异体组织／细胞移植等方面必将有广阔的应用前景。     

中药时间药理学

大量研究表明机体的生理功能存在着周期性改变这一时间生物学的特征,由于机体生理功能的这一时间生物学变化规律使得药物对机体的作用表现出时效性,即有的时辰药效作用强,有的时辰药效作用弱;同时,机体对体内药物的转运与代谢过程亦表现出时效性,即不同时辰药物在体内的吸收、代谢、排泄不同。祖国医学在二千多年前就已注意到这种时效性。因此,在《黄帝内经》已提出因时施治,即在不同时辰里给予相应的中药进行治疗。可惜的是限于当时的条件,最早在中国萌发出的时间生物学与时间医药学思想并未在中国发展壮大形成一门学科。随着西方发达国家     

川芎改善微循环作用研究进展

许多活血化瘀药有改善血流动力学、改善血液流变学、抗血栓形成和改善微循环的多种作用。在改善微循环方面,活血化瘀药可改善微血流、改善微血管形态、降低毛细血管的通透性、减少微血管周围的渗出和降低微循环阻力等。川芎具有活血、行血、通瘀作用。川芎嗪(Ligus-pyrazine),四甲基吡嗪(Tetramethylpyrazine,TMP),是川芎的主要生物碱。临床和实验研究表明川芎嗪具有活血化瘀、抗血小板聚集、扩张小动脉、改善微循环等作用。本文以川芎及其主要活性成分改善微循环的文献为重点进行综述。     

Tat蛋白对节律基因表达的影响

【摘要】目的 探讨HIV Tat 蛋白是否可以在细胞内影响主要节律基因Clock,Cry,Bmal1,Per的表达。方法 用lipofectamineTM2000将HIVat表达质粒转入PC12细胞,使Tat在PC12细胞中表达。转染48h后提取mRNA和蛋白,分别通过实时荧光定量PCR技术和Western blot技术检测节律基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果 研究结果显示,与未处理组和空质粒组相比,转染组Cry1的表达水平显著升高（P＜0.05）;Clock的表达水平显著降低（P＜0.05）;Bmal1和Per的表达水平无明显变化（P＞0.05）。 结论 HIV Tat影响了近日节律基因Cry1和Clock的表达,表现为Cry1表达水平升高,Clock表达水平下降,提示TAT蛋白可以影响节律基因的表达并且可能通过对近日节律的影响调节细胞生理功能。     

hPeriod1PAS结构域相互作用蛋白的筛选和研究

目的寻找与近日节律系统核心基因Period1（Per1）相互作用的新蛋白，揭示近日节律相关的可能信号通路。方法采用酵母双杂交方法，以人Per1的PAS结构域为诱饵，扫描人下丘脑cDNA文库，并通过体外转录、免疫共沉淀验证蛋白间相互作用；通过RT—PCR检测RACK1（receptors for activated Ckinase）表达的组织特异性及节律性；运用RNAi技术初步研究RACK1与Per1的信号联系。结果人下丘脑区域RACK1蛋白与Per1存在相互作用；RACK1在多器官组织保守表达，但其表达未呈现明显节律性；上调及下调Per1表达，RACK1的RNA水平无显著变化。结论细胞内接头分子RACK1是一种新的Per1作用蛋白，可能介导、调控Per1的功能。     

节律基因mPeriod2过表达对体外Lewis肺癌细胞γ射线敏感性的影响

目的评价mPeriod2(mPer2)基因转染后过表达对小鼠Lew is肺癌细胞(LLCs)60Coγ-射线放射敏感性的影响。方法采用脂质体介导方法将mPer2基因转染至LLC细胞,以空白组及空载体质粒pcD-NA3.1为对照,采用RT-PCR及流式细胞术检测mPer2基因在LLC细胞中的表达,给予60Coγ-射线4Gy单次照射后,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡,采用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化、细胞集落形成实验检测细胞增殖及存活情况。结果60Coγ-射线照射后,与转染空载体质粒组及空白组比较,转染mPer2基因细胞表现为G2/M期阻滞,凋亡率下降(contro l:8.10±0.03;pcDNA3.1-vector:11.20±0.07;pcDNA3.1-mPer2:4.40±0.02;P<0.05),细胞克隆形成增加(contro l:14%;pcDNA3.1-vec-tor:11%;pcDNA3.1-mPer2:32%;P<0.01)及PCNA阳性表达增加(contro l: ,pcDNA3.1-vector: ,pcDNA3.1-mPer2: ,P<0.05)。结论节律基因mPer2过表达使60Coγ-射线照射的小鼠Lew is肺癌细胞凋亡下降,细胞增殖明显,降低了该细胞对放射损伤的敏感性。     

太极通天液对脑缺血性损伤的改善作用

太极通天液有改善脑缺血性损伤的作用。实验结果是用药组的脑梗塞区域的重显著性较对照组轻；用药组的脑脊液和血清中的髓鞘碱性蛋白含量比对照组明显低；用药组的凝血时间远远大于对照组。结果说明太极通天液具有明显改善脑缺血性损伤的功效。     

肝癌裸鼠移植瘤端粒酶活性表达的近日节律

目的：探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的近日节律。方法：在时辰同步化裸鼠中构建肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤，继续在程控光照条件下饲养，于光照后3、9、15、21h取样，用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量，细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果：肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随近日节律变化，且伴随端粒酶活性的同步节律变化，呈近日节律特征。结论：肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰，为制定肿瘤时辰化疗方案提供了有价值的参考。     

体内蛋白转导的研究进展

简要综述了几种能够携带药物跨越血脑屏障和细胞生物膜屏障的蛋白结构域的研究进展。