节律基因mClock在肿瘤实验化疗中的作用

目的 研究节律基因mClock在顺铂诱导小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)凋亡中的作用.方法 体外采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐(PMA)诱导LLC细胞近日节律,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测细胞mClock基因的节律性表达.于诱导后不同时间点,顺铂(CDDP)处理细胞,24 h后四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法和流式细胞术检测(FCM)其对细胞的增殖与凋亡的影响.采用脂质体介导方法将mClock基因转染至LLC细胞,顺铂处理细胞,24 h后MTT法和流式细胞术检测其对细胞的增殖与凋亡的影响.结果 PMA作用LLC后,mClock基因呈现节律性表达.PMA诱导LLC节律表达的不同时间点,细胞对顺铂的敏感性不同.mClock过表达使顺铂作用后LLC凋亡率下降,细胞增殖明显.结论 mClock能够抑制顺铂诱导LLC的凋亡.     

光照对小鼠活动节律及生长的影响

目的探讨光照周期变化对小鼠活动节律及生长的影响。方法利用不同光暗周期（LD5／5、LD10／10、LD12／12、LD14／14、LD16／16）对小鼠施加影响，观察小鼠活动性变化，并检测其生长速度和血浆皮质酮水平。结果备组小鼠活动性周期与光暗循环周期一致，LD5／5、LD16／16组的生长速度快于其余三组，LD5／5、LD16／16血浆皮质酮水平高于LD12／12组。结论小鼠的活动可以很好的适应环境变化，但超过其近日节律可调范围（20-28h）的光暗循环条件可影响其生长，很可能使其处于应激状态。     

MiR30b与小鼠Bach2相互作用的研究

目的研究B细胞末端分化过程中miR30b新的作用靶点。方法经生物信息学分析,利用特异性引物以及定点突变引物从小鼠c DNA中分别扩增大小为530、361和189bp三个目的片段,胶回收并对361和189bp进行拼接,获得野生型、突变型小鼠Bach2 mRNA特异性片段,分别与pmir GLO载体连接,构建野生型、突变型重组荧光素酶报告基因质粒pmir GLO-m Bach2、pmir GLO-m Bach2 mt;与miR30b共转染至HEK293 T细胞,分析其荧光素酶活性。结果重组荧光素酶报告基因质粒经双酶切及测序证实构建正确;共转染后,与pmir GLO+miR30b组相比,pmir GLO-m Bach2+miR30b组的荧光素酶活性明显降低(P0.05),而pmir GLO-m Bach2 mt+miR30b组的荧光素酶活性则无明显改变(P0.05)。结论小鼠Bach2 mRNA是miR30b的靶点。     

节律基因mPER1对小鼠Lewis肺癌细胞迁移的影响

目的通过节律基因mPeriod1（mPer1）过表达,研究mPer1对小鼠Lewis肺癌细胞迁移的影响。方法采用脂质体介导法将mPer1基因转染入Lewis细胞。通过RT-PCR检测mPer1在Lewis细胞中的表达;采用Chemico公司QCM（tm）24-Well Colorimetric Cell Migration Assay检测细胞迁移的变化。结果与pcDNA3.1空质粒相比,pcDNA3.1-mPer1转染组mPer1表达增加,其迁移率与对照组比较明显下降。结论节律基因mPer1过表达能够抑制Lewis肺癌细胞的迁移。     

节律基因mPerl对化疗药物阿霉素敏感性的影响

目的 评价小鼠乳腺癌EMT6细胞中节律基因moPerl过表达对化疗药物阿霉素(ADM)敏感性的影响.方法 将pcDNA3.1( )-mPerl质粒转染至EMT6细胞中(EMT6-mPerl组),以pcDNA3.1( )质粒为对照(EMT6-vect组),通过RT-PCR、Western Blotting检测转染效率;给予ADM处理,MTT法检测细胞生长情况.流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化;RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA的水平.结果 在ADM处理后.与对照组比较,转染mPerl基因细胞表现为:S期比例增加,凋亡率升高(EMT6-vect;(65.65±0.07)%;EMT6-mPerll(72.35±0.57)%],细胞生长抑制率增加[EMT6-vect:(42.18±5.73)%;EMT6-mPerl:(53.28±7.32%)]及p53 mRNA表达量增加(EMT6-vect:0.48±0.08;EMT6-mPerl; 1.18±0.02).结论 节律基因mPerl过表达可以提高该细胞对阿霉素的敏感性.     

肿瘤细胞节律基因对其药物敏感性的影响

目的 通过体外实验诱导节律基因表达,探讨肿瘤细胞节律基因对其药物敏感性的影响.方法 采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐(PMA)诱导体外培养的EMT6乳腺癌细胞节律基因的表达;在不同时间点,以RT-PCR检测节律基因的代表mPer1基因的表达水平.在mPer1基因表达的高峰与低谷分别给予阿霉素(ADM)处理.采用二甲基噻唑二苯基四唑嗅蓝(MTT)法和流式细胞术检测ADM对EMT6细胞增殖的影响.结果 PMA诱导后,EMT6细胞的mPer1基因呈近日节律.在mPer1基因表达高峰时,ADM对肿瘤细胞的抑制率高于其在低谷的抑制率.结论 肿瘤细胞节律基因能够影响其对药物的敏感性.     

节律基因mPer1对化疗药物阿霉素敏感性的影响

目的评价小鼠乳腺癌EMT6细胞中节律基因mPer1过表达对化疗药物阿霉素(ADM)敏感性的影响。方法将pcDNA3.1( )-mPer1质粒转染至EMT6细胞中(EMT6-mPer1组),以pcDNA3.1( )质粒为对照(EMT6-vect组),通过RT-PCR、Western Blotting检测转染效率;给予ADM处理,MTT法检测细胞生长情况,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化;RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA的水平。结果在ADM处理后,与对照组比较,转染mPer1基因细胞表现为:S期比例增加,凋亡率升高〔EMT6-vect:(65.65±0.07)%;EMT6-mPer1:(72.35±0.57)%〕,细胞生长抑制率增加〔EMT6-vect:(42.18±5.73)%;EMT6-mPer1:(53.28±7.32%)〕及p53 mRNA表达量增加(EMT6-vect:0.48±0.08;EMT6-mPer1:1.18±0.02)。结论节律基因mPer1过表达可以提高该细胞对阿霉素的敏感性。     

多模态MRI评估宫颈癌缺氧及缺氧治疗的研究进展

缺氧是宫颈癌的不利因素之一，在评估肿瘤快速生长、转移、放化疗抵抗方面具有重要意义。多种病理机制可导致宫颈癌缺氧。近年来由于MRI具有无创性及可重复测量的优势，在反映缺氧机制、表征缺氧状态及评估缺氧治疗的疗效和预后方面取得了一定进展。就多模态MRI应用于宫颈癌缺氧及缺氧治疗方面的研究进展予以综述。