乙型肝炎患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体及血浆皮质醇变化的初步研究

应用放射配体结合测定法、放射免疫测定法测定１１０例乙型病毒性肝炎（乙肝）患者外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）与血浆皮质醇（Ｆ）的变化。其中急性重症肝炎２０例、慢性重症肝炎２０例，慢性迁延性肝炎２０例，慢性活动性肝炎５０例以及对照组４０例。结果表明：各类乙肝患者ＧＲ水平明显低于对照组，而血浆Ｆ高于对照组。同时测定２０例慢性活动性肝炎稳定期ＧＲ、Ｆ的变化，发现随病情的改善ＧＲ水平也升高，而血浆Ｆ无明显改变。     

海胆黄多糖SEP纯化工艺的研究

为了规模化制备具有抗肿瘤活性的海胆黄多糖(SEP),简化纯化步骤和提高多糖收率,在原有分离纯化方法的基础上,结合超滤技术,对SEP的纯化工艺进行了优化。采用木瓜蛋白酶-Sevag联用法,以超滤法替代减压浓缩和透析去除杂质,优化酶法提取条件和超滤参数。研究结果表明:用0.6%的木瓜蛋白酶在pH 6.5、60℃酶解5 h,可去除18.3%的蛋白质,3次Sevag法后,蛋白质去除率达71.7%,多糖回收率80.1%。采用截留相对分子质量100 k的膜超滤浓缩,压力0.05 MPa,原液质量浓度1.2 mg/mL,浓缩3倍时的多糖截留率为84.0%。各步骤多糖累计回收率为67.3%,该纯化工艺可获得高产率高纯度的SEP,为规模化制备SEP奠定了基础。     

9V型肺炎链球菌荚膜多糖降解研究

肺炎链球菌荚膜多糖分子质量较大,在制备结合疫苗的过程会有诸多不便,如溶液黏度大、结合过程易过度交联形成凝胶、不易于过滤以及纯化,而荚膜多糖分子片段化是降低其分子质量的有效途径。文章选取了酸水解和超声降解两种方法分别处理9V型肺炎链球菌荚膜多糖。利用不同相对分子质量的葡聚糖在HPLC上的保留时间绘制标准曲线,计算处理后多糖相对分子质量,并通过核磁共振检测结构稳定性,免疫双扩散检测抗原性。实验结果表明,在适宜的条件下,酸水解和超声降解均能有效降低肺炎链球菌荚膜多糖分子质量,减少重复单元,保留重复单元内部结构,保留时间从5.7 min延长到8.25 min,相对分子质量约为580 k。但是酸水解方法破坏了多糖的抗原完整性,而超声降解可以良好保持。     

黄芩素抑制流感病毒A／FM1／1／47（H1N1）的一个新机理：干扰病毒中后期mRNA的合成

目的：阐明黄芩素在细胞培养中对流感病毒A／FM1／1／47（H1N1）的抑制机理。方法：通过结晶紫染色实验测定黄芩素对流感病毒的抑制作用,采用不同加药方式进一步研究黄芩素对病毒复制周期不同阶段的影响。通过RT-PCR方法比较黄芩素给药组和病毒模型组流感病毒M1基因mRNA的水平,确定黄芩素对病毒mRNA合成的抑制作用。结果：不同浓度的黄芩素在体外能够明显抑制流感病毒A／FM1／1／47（HIN1）和A／Beijing／32／92（H3N2）的感染,并呈剂量依赖。病毒感染后再加入药物黄芩素（治疗法）的抑制作用明显好于病毒感染前（预防法）和病毒感染同时（同时法）加入的抑制效应。在病毒感染6h、9h时,黄芩素给药组的病毒M1基因mRNA水平明显降低。结论：黄芩素体外可通过干扰流感病毒A／FM1／1／47（HIN1）中后期mRNA的合成抑制病毒的复制。     

白僵菌转化的一个新蒽醌苷类化合物

目的：研究白僵菌对大黄酸葡萄糖甲基化的转化作用。方法：在白僵菌培养液中加入大黄酸底物，利用生长细胞对其进行生物转化。发酵液离心后用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取部位通过各种色谱方法分离得到一个新化合物。运用氢谱碳谱以及二维核磁共振光谱鉴定结构。结果：转化产物为大黄酸糖基化衍生物，结构鉴定为7-O-（4’-甲氧基-β—D-葡萄糖）。结论：芦荟大黄素（1）是一个新化合物。     

蜂胶抗肿瘤活性成分的研究

采用溶媒萃取法和硅胶柱层析法从蜂胶中获得了两种具有抗肿瘤活性的组分PPLCC和PPLSE,体外抗肿瘤细胞人肝癌细胞(HepG2)和人口腔癌细胞(KB)试验表明,浓度为50μg/ml的PPLCC和PPLSE对HepG2细胞的抑制率分别达87.4%和35.1%,IC50分别为17.5μg/ml和1151.2μg/ml;对KB细胞的抑制率分别为84.9%和59.8%,IC50分别为21.0μg/ml和33.6μg/ml。结果表明,蜂胶可作为抗肿瘤活性物质的天然来源。     

盐单胞菌Halomonas-GY1的分离鉴定与活性产物的研究

目的:从连云港赣榆附近海泥样品中分离嗜盐菌株并鉴定,对产物的活性做初步研究。方法:以Gibbons培养基富集培养并分离纯化菌株,以《伯杰氏系统细菌手册》第1卷(1984)等为主要依据,对分离得到的菌株进行鉴定,琼脂扩散法测定体外抗菌活性,小鼠迟发型变态反应测定免疫活性。结果:分离得到一株盐单胞菌Halomonas-GY1,Halomonas-GY1符合盐单胞菌属特征,但其生理生化特征与几个典型的盐单胞菌属菌种存在差异。体外抗菌试验表明,Halomonas-GY1培养产物对革兰阳性菌以及部分革兰阴性菌有明显的抗菌作用,其多糖提取物对正常小鼠的迟发型变态反应有增强作用,对环磷酰胺所致免疫低下小鼠迟发型变态反应有恢复作用。结论:Halomonas-GY1为盐单胞菌菌株,其培养产物对革兰阳性菌及部分革兰阴性菌有明显的抗菌作用,多糖提取物具有明显的免疫保护作用。     

重组Pichia pastori高密度培养和表达过程的溶氧调控

在重组人血清白蛋白（recombinant human serum albumin，rHSA）Pichia pastori表达系统中，研究了高密度培养时细胞生长、改变碳源和诱导表达时溶氧的变化和调控规律，溶氧与细胞生长和重组蛋白表达密切相关。发酵前期的细胞生长阶段，细胞需氧降低表明碳源甘油的消耗，根据溶氧水平适时流加碳源甘油；改变碳源前，应停止流加甘油碳源，并以溶氧指标判断甘油是否消耗完全；重组蛋白诱导时流加甲醇的速度应缓慢增大，并保持细胞一定的需氧水平。高密度培养时通过流加底物速度、搅拌转速、通气量和富氧培养来关联控制发酵液溶氧水平。     

甘油对毕赤酵母高密度发酵表达重组水蛭素Ⅱ的影响

目的：考察甘油对毕赤酵母生长和重组水蛭素Ⅱ表达的影响。方法：在摇瓶和IOL发酵罐中用含有不同浓度甘油的培养基培养毕赤酵母，测定毕赤酵母的生长和重组水蛭素Ⅱ的表达。结果：发酵培养基中初始甘油浓度为5g／L时，毕赤酵母生长速度明显加快；补料过程中甘油浓度大于70g／L时，毕赤酵母生长受到抑制。与不加甘油相比较，诱导表达期维持培养基中甘油浓度在5g/L以下，重组水蛭素表达可提前4h，诱导30h其活性达13000 ATU／ml，比仅用甲醇诱导时效价提高了7．7％。结论：降低初始培养基中甘油浓度有利于毕赤酵母生长，补料过程中培养基甘油浓度应维持在押制毕赤酵母生长的浓度之下，诱导阶段培养基中少量的甘油有利于水蛭素的表达.     

慢性疲劳综合征与中医体质及社会心理危险因素相关性调查

目的:探讨上海地区慢性疲劳综合征、中医体质及社会心理危险因素三者之间的相关性。方法:采用流行病学病例对照设计,对100例慢性疲劳综合征患者和1000例健康人群进行问卷调查,进行相关统计分析。结果:气虚质、阴虚质、阳虚质、气郁质的人群更容易患慢性疲劳综合征。社会心理危险因素中,教师、人际不满意、白领、性格内向、不喜欢本职业,每天睡4～6h、人际一般为慢性疲劳综合征发病的危险因素。且气虚质的形成与每天睡4～6h、不参加体育运动、女性、饮食不规律、性格内向正相关,余体质与危险因素无统计学意义。结论:病理性中医体质、长期从事身心压力大的职业、不良生活习惯、不良情志刺激易促成CFS。