妊高征患者血清NO/NOS和D-二聚体检测的临床意义

妊娠高血压综合征（妊高征）是妊娠生产期常见的高危妊娠征,是产妇和围产儿发病及死亡的重要因素。笔者对32例妊高征患者进行了血清NO／NOS和D-二聚体检测,以探讨其在临床上的诊断价值,现将结果报告如下。     

醒脑静干预SLE小鼠继发狼疮脑病的实验研究

目的 观察醒脑静对系统性红斑狼疮(SLE)小鼠继发狼疮脑病进程的干预,初步探讨其干预机制.方法 SLE模型小鼠醒脑静腹注给药,4个月后行MRI扫描、学习记忆行为测定及脑组织病理分析;RT-PCR、免疫组化分析脑组织血管细胞黏附分子-1 (VCAM-1)表达情况.结果 醒脑静改善了模型小鼠脑部出血、炎症、水肿等症状,增强了小鼠的记忆能力;调低了脑组织中VCAM-1蛋白表达水平.结论 醒脑静有效干预了SLE模型小鼠继发狼疮脑病进程,调控VCAM-1表达可能是其干预机制之一.     

核酸免提取HBV-DNA检测方法性能评价

目的评价核酸免提取HBV-DNA实时荧光定量PCR方法检测性能。方法以高、中、低3个浓度的血清各重复测定10次,作精密度评价;以定值标准血清重复3次测量,以偏差作准确性评价;以强阳性血清10倍倍比稀释,所得样本各重复3次测定,以示值与测定平均值作相关性分析,作线性评价;以定值标准样本,25次重复检测,以22次能检测出阳性值(非阴性值)为标准,作最低检测限评价;将免提取法和煮沸法所得结果作比对,以评价两种方法的相关性。结果高、中、低3个浓度的血清精密度均5%;定值标准血清的测量值与认定值的对数值偏差不超过±0.5;HBV-DNA在3.71E1 IU/ML-3.71E8IU/ML范围内线性关系Y=0.987X+0.071,R=0.99;免提取核酸法与煮沸法比对,Y=0.979X+0.134,R=0.99。结论 HBVDNA荧光定量PCR免提取核酸方法检测系统性能符合YY/T1182-2010《核酸扩增检测用试剂(盒)》的要求,实验操作简便,检测灵敏度高、准确性好,对临床应用有较好的性能保证。     

EU-8000全自动尿液分析流水线性能验证

目的对EU-8000全自动尿液分析流水线(简称EU-8000)性能进行验证,以提高尿液分析结果的准确性。方法对EU-8000干化学组成部分UA-5800,按江苏省临床检验中心要求检测10个尿液干化学质评项目的携带污染率、精密度、准确性、阴性和阳性符合率;对EU-8000的尿液有形成分组成部分EH-2080B,评价其测定的红细胞(RBC)、白细胞(WBC)的携带污染率、重复性、识别率、稳定性、决定系数(R~2)、检出限及RBC的可报告范围。结果 UA-5800的携带污染率、精密度、准确性、阴阳性符合率均符合要求;EH-2080B检测RBC、WBC的携带污染率均为0;高、中、低水平RBC变异系数(CV)分别为9.54%、11.08%、14.72%,高、中、低水平WBC的CV分别为10.10%、11.79%、17.96%;仪器测定的RBC、WBC、管型与镜检法的符合率分别为95.7%、95.2%、98.0%,Kappa值分别为0.823、0.843、0.716。仪器稳定性试验结果CV为11.78%;线性检测RBC、WBC的R~2分别为0.999 1、0.998 3,仪器对RBC、WBC的检出限为5个/微升,RBC的可报告范围为每微升0～16 000个。结论 EU-8000操作简单,自动化程度高,具有较高的临床应用价值。     

ABI Quantistudio Dx实时定量PCR仪HBV-DNA检测的性能验证

 目的 验证ABI Quantistudio Dx实时荧光定量 PCR 仪 HBV-DNA 检测系统的性能。方法 参考 GB/T 22576-2008和CNAS-CL36相关文件,ABI Quantistudio Dx实时荧光定量 PCR 仪检测患者标本、质控品及卫生部临检中心室间参考物质。从以下几个方面进行性能验证:精密度、正确度、线性范围、检出限等。结果 ABI Quantistudio Dx 实时荧光定量 PCR仪 HBV-DNA 检测系统的批内精密度(批内 CV)分别为 2.09%(低浓度)、1.3%(高浓度);批间精密度(批间 CV)分别为3.92%(低浓度)、2.88%(高浓度);准确度评估以参加能力验证/室间质评的项目来判断,项目 PT 成绩为 100%,通过;系统最低检出限为50 U/ml;线性范围验证结果显示,线性回归方程为Y=1.0001X,R²=0.9976。线性范围为 1.00×10²~1.00×10⁸ U/ml。结论 ABI Quantistudio Dx 实时荧光定量 PCR 系统检测 HBV-DNA性能良好,满足临床检测需要。     

宫颈上皮内瘤变组织中HPV感染基因型的比较研究

目的比较三级别宫颈上皮内瘤变(CIN)组织标本中人乳头瘤病毒(HPV)感染的基因型分布情况及其临床意义。方法采用聚合酶链式反应和基因芯片检测技术对20例宫颈正常组织、185例宫颈CIN1级、98例宫颈CIN2级和118例宫颈CIN3级患者宫颈组织标本进行23种HPV基因分型检测,并对受检者进行相关资料分析。结果 20例宫颈正常组织检出HPV感染者2例,总的HPV感染率为10.00%(2/20);185例宫颈CINⅠ组织检出HPV感染者83例,总的HPV感染率为44.87%(83/185);98例宫颈CINⅡ组织检出HPV感染者83例,总的HPV感染率为84.69%(83/98);118例宫颈CIN Ⅲ组织检出HPV感染者108例,总的HPV感染率为91.53%(108/118)。结论聚合酶链式反应结合基因芯片技术可应用于宫颈上皮内瘤变组织标本的HPV基因分型检测,对我国女性宫颈病变HPV感染基因型分布的研究及宫颈癌瘤的防治及其疫苗的研发具有十分重要的意义。     

血复生浸膏结合辨证类方对慢性再生障碍性贫血患者外周血miRNA、淋巴细胞亚群及细胞因子影响的临床观察

  目的：观察血复生浸膏结合辨证类方治疗慢性再生障碍性贫血的临床疗效及其对外周血microRNA、淋巴细胞亚群、细胞因子的影响。  方法：将60例慢性再生障碍性贫血患者随机分为治疗组与对照组,每组30例;另设正常对照组20例。对照组予常规基础治疗,治疗组在对照组治疗措施基础上加用血复生浸膏结合辨证类方。两组疗程均为6个月、随访6个月,观察临床疗效,比较外周血象指标、microRNA(miRNA-155-5p、miRNA-1260b)表达、淋巴细胞亚群(总T细胞、B细胞、NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc)水平及血浆相关细胞因子水平的变化情况。  结果：①治疗组、对照组临床总有效率分别为83.33%、53.33%;组间临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。②组间治疗后比较,Hb、WBC、Ret水平差异有统计学意义,治疗组明显高于对照组(P<0.05)。③组间治疗后比较,miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平差异有统计学意义,治疗组下调幅度明显强于对照组(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平均明显上调(P<0.05);两组治疗后与正常组比较, miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平虽有所下降,但均未达到正常水平(P<0.05)。④组间治疗后比较,NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc水平差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,NK细胞、Th细胞比例及Th/Tc水平均明显不足(P<0.05),Tc细胞比例明显过高(P<0.05)。两组治疗后与正常组比较,治疗组Th/Tc水平差异有统计学意义,尚未达到正常水平(P<0.05),而NK细胞、Th细胞及Tc细胞比例与正常水平已无显著差异(P>0.05);对照组NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc水平差异有统计学意义,均未达到正常水平(P<0.05)。⑤组间治疗后比较,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α、TGF-β1的水平差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α、TGF-β1的水平差异有统计学意义,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α水平明显过高(P<0.05),TGF-β1水平明显过低(P<0.05)。两组治疗后与正常组比较,IFN-γ、TNF-α、TGF-β1的水平差异均有统计学意义,尚未达到正常水平(P<0.05),而治疗组IL-12p70无显著差异,已恢复至正常水平(P>0.05)。  结论：在西医常规治疗基础上,血复生浸膏联合辨证类方治疗再障的疗效较为满意,其调控再障免疫异常的机制可能是通过改善淋巴细胞亚群失衡、抑制造血负调控因子、下调miRNA-155-5p、miRNA-1260b的表达而实现。     

类风湿关节炎患者血清IL-35的水平及其与疾病活动度的关系

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清IL-35表达水平与疾病活动度的相关性。方法选取确诊RA患者118例,分为活动期组62例和缓解期组56例。同时选取90例健康人作为对照,ELISA法检测RA患者及对照者血清IL-35水平,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中IL-35亚基EBI3和P35 mRNA表达水平。分析血清IL-35水平与DAS28评分、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)、关节肿胀数(SJC)和关节压痛数(TJC)等的相关性。结果活动期组RA患者血清中IL-35浓度(38.09±16.90)pg/m L显著低于对照组[(82.25±15.82)pg/m L,P0.01)]和缓解期组[(72.96±11.74)pg/m L,P0.01)];依据DAS28评分将活动期组RA患者分为轻度、中度和重度组,血清IL-35水平(pg/m L)在3组中依次降低(轻度60.95±7.31,中度39.68±9.51,重度28.02±9.16),轻度组与中度或重度组间差异具有统计学意义(P0.05)。活动期组和缓解期组患者血清IL-35水平与SJC、CRP和DAS28评分呈负相关性(P0.05),与ESR、TJC、RF无相关性。PBMC中P35 mRNA在RA活动期组中显著降低,低于健康对照组和缓解期组(0.47±0.18 vs 1.91±1.121.82±0.53,P0.01),但EBI3 mRNA在活动期组(1.62±0.68)、缓解期组(1.48±0.77)及对照组(1.86±1.21)中差异无统计学意义(P0.05)。结论活动期组RA患者血清IL-35水平显著下降,且伴随P35 mRNA水平下降,并与RA疾病活动度密切相关,可作为RA疾病活动度评价的潜在指标。     

环氧化酶-2基因启动子区多态性与结直肠癌的易感性

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)基因启动子区的-1195(G/A,rs689466)及3’非翻译区的8473(T/C,rs5275)2个位点的基因多态性与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)发病风险的相关性.方法:采用病例-对照研究,利用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restrictive fragment length polymorphism,PCR-RFLP)分析方法,对343例CRC患者和340例健康人的COX-2基因的2个位点的多态性进行检测,采用SPSS11.0软件包统计分析各位点的基因型分布和等位基因频率.结果:COX-2-8473位点多态性的各基因型频率在病例组及对照组中分布均无显著差异(P>0.05),但COX-2-1195位点多态性的基因型频率在二组中分布有显著性差异(P<0.001),结果显示CRC患者COX-2-1195AG基因型在病例组的频率较对照组显著增高(校正后OR=2.23;95%CI:1.50-3.32),AA基因型在病例组中的频率亦较对照组高(校正后OR=2.46;95%CI:1.51-4.02),A等位基因携带者在病例组中的频率高于对照组(校正后OR=2.27;95%CI:1.55-3.34).各基因型分布在结肠癌及直肠癌中的分布无显著性差异(P>0.05).COX-2-1195A等位基因与淋巴结转移及TNM分期有显著相关性.结论:COX-2-1195位点AG/AA基因型是CRC的风险因素,且与CRC的淋巴结转移及TNM分期相关.     

化脓性链球菌毒力基因检测及模式分类分析

目的调查60株化脓性链球菌毒力基因存在状况及毒力基因携带模式。方法 60株化脓性链球菌分离自2014年1月至2017年10月南京医科大学附属淮安第一医院与南京中医药大学附属医院急性扁桃体炎患者的病灶部位拭子标本。采用PCR及序列分析的方法分析侵袭性酶毒力基因(hyl A、spe B、endo S)、超抗原毒力基因(sme Z)、免疫逃逸毒力基因(sic)及黏附素毒力基因(prt F1)等6种毒力基因,并基于阳性检出模式进行毒力基因分类。结果侵袭性酶spe B、endo S基因和超抗原sme Z基因检出率均达100%,hyl A检出率为50%,sic检出率为23.3%,prt F1未检出。根据毒力基因检测结果,60株化脓性链球菌可分为4种类型,检出hyl A、spe B、endo S、sme Z等4种毒力基因有29株(48.3%),检出spe B、endo S、sme Z等3种毒力基因17株(28.3%),检出spe B、endo S、sme Z、sic等4种毒力基因13株(21.7%),检出hyl A、spe B、endo S、sme Z、sic等5种毒力基因1株(1.7%)。结论临床分离化脓性链球菌侵袭性酶spe B、endo S基因和超抗原sme Z基因检出率均达100%,推测其可能是化脓性链球菌感染导致感染灶局部炎症和坏死的原因之一。