环孢菌素A对慢性再生障碍性贫血患者T-bet、GATA-3、相关信号分子、细胞因子及Th1/Th2的影响

本研究探讨转录因子T-bet、GATA-3及相关信号通路在慢性再生障碍性贫血(CAA)免疫发病中的作用,从Th细胞失衡、转录因子及相关信号通路水平研究环孢菌素(CsA)治疗慢性AA的免疫调节机理。采用实时荧光定量PCR(real-time FQ-PCR)检测慢性AA患者治疗前和CsA治疗6月后外周血单个核细胞(PBMNC)T-bet、GATA-3及STAT4、STAT6mRNA表达;采用流式细胞术、酶联免疫吸附法(ELISA)检测慢性AA患者治疗前和CsA治疗6月后外周血Th1、Th2比例及PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12、IL-4水平,并与正常人进行比较。结果表明:慢性AA患者PBMNC T-bet、STAT4mRNA表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、Th1/Th2比值、PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12表达均明显高于正常组(p0.01),经CsA治疗6月后,患者T-bet、STAT4表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ、IL-12表达均有所下降,但T-bet、STAT4、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ表达仍未达到正常水平,GATA-3、STAT6mRNA表达、Th2比例、IL-4表达在治疗前后与正常人比较均无明显差异(p0.05)。结论:IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化及Th平衡向Th1型偏移在AA免疫异常的发病过程中起到关键的作用;CsA能通过下调IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化及纠正Th1过度极化而减轻AA异常亢进的细胞免疫,解除造血抑制。     

肾移植患者术后服用不同免疫抑制剂血清中IL-2的变化

目的 观察肾移植患者术前及术后服用免疫抑制剂FK506或CsA后血清中IL-2的变化,比较两种免疫抑制剂对移植后患者机体免疫状态的影响.方法 将38例肾移植患者手术后分为两组,17例服用他可莫司(FK506),21例服用环孢菌素A(CsA).用ELISA法测定20例正常对照组和两组患者术前及术后服用免疫抑制剂血清中IL-2值.结果 肾移植患者手术前血清中IL-2值(146.65±92.50 pg/ml)明显高于对照组(9.47±9.31pg/ml)(P<0.05);两组患者手术后服用免疫抑制剂IL-2值均下降,手术前后差异有统计学显著性意义;术后FK506组(135.4±104.88 pg/ml)比CsA组(73.05±54.34 pg/ml)高,差异有统计学意义(P<0.05),且仍高于对照组.结论 通过测定血清中IL-2值可评价机体免疫状态,肾移植患者手术前机体免疫系统已处于激活状态,手术后服用FK506和CsA血清中IL-2值降低,机体免疫得到抑制,但仍高于正常对照组.     

多囊卵巢综合征病因病机及治疗的最新研究进展

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是临床常见的一种生殖内分泌激素异常和代谢紊乱的疾病,临床症状表现多样,病因病机复杂。近年来的研究表明,遗传学、生殖内分泌激素、炎症因子、肠道菌群、微小RNA、信号转导通路和胰岛素抵抗等与PCOS的发生发展密切相关。关于PCOS的治疗方式,西医多针对雄激素升高、排卵异常、月经不调、胰岛素抵抗等进行对症治疗;中医注重调理,通过整体观的思想对不同的辨证分型采用中药调理、针灸和针药结合等方式进行治疗;中西医结合治疗充分发挥了现代医学与传统医学之间的优势,在采用西医对症治疗的同时结合中医治疗方式进行辨证论治,从整体把控,疗效显著。因此,本文对近几年PCOS病因病机的研究,以及对西医、中医和中西医结合治疗PCOS的方法作一综述。     

宫颈上皮内瘤变组织中HPV感染基因型的比较研究

目的比较三级别宫颈上皮内瘤变(CIN)组织标本中人乳头瘤病毒(HPV)感染的基因型分布情况及其临床意义。方法采用聚合酶链式反应和基因芯片检测技术对20例宫颈正常组织、185例宫颈CIN1级、98例宫颈CIN2级和118例宫颈CIN3级患者宫颈组织标本进行23种HPV基因分型检测,并对受检者进行相关资料分析。结果 20例宫颈正常组织检出HPV感染者2例,总的HPV感染率为10.00%(2/20);185例宫颈CINⅠ组织检出HPV感染者83例,总的HPV感染率为44.87%(83/185);98例宫颈CINⅡ组织检出HPV感染者83例,总的HPV感染率为84.69%(83/98);118例宫颈CIN Ⅲ组织检出HPV感染者108例,总的HPV感染率为91.53%(108/118)。结论聚合酶链式反应结合基因芯片技术可应用于宫颈上皮内瘤变组织标本的HPV基因分型检测,对我国女性宫颈病变HPV感染基因型分布的研究及宫颈癌瘤的防治及其疫苗的研发具有十分重要的意义。     

miR-145在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨miR-145在胃癌中的表达及其临床意义。方法选取2011年2月至2012年6月江苏省中医院就诊的67例胃癌患者,采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)技术检测胃癌患者miR-145的表达情况,取肿瘤边缘外5cm处的非癌胃黏膜作为对照,比较miR-145在正常组织及胃癌组织中的表达差异及与胃癌临床病理参数的相关性。结果 54例(80.60%)胃癌患者胃癌组织miR-145表达明显低于正常组织,miR-145的表达在不同性别、年龄及TNM分期患者间的差异无统计学意义(P>0.05),但在不同组织学分级及淋巴结转移情况患者间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-145在胃癌中呈低表达,可能与胃癌的发生、发展密切相关,可成为胃癌诊断及预后判断的指标。     

血复生浸膏结合辨证类方对慢性再生障碍性贫血患者外周血miRNA、淋巴细胞亚群及细胞因子影响的临床观察

  目的：观察血复生浸膏结合辨证类方治疗慢性再生障碍性贫血的临床疗效及其对外周血microRNA、淋巴细胞亚群、细胞因子的影响。  方法：将60例慢性再生障碍性贫血患者随机分为治疗组与对照组,每组30例;另设正常对照组20例。对照组予常规基础治疗,治疗组在对照组治疗措施基础上加用血复生浸膏结合辨证类方。两组疗程均为6个月、随访6个月,观察临床疗效,比较外周血象指标、microRNA(miRNA-155-5p、miRNA-1260b)表达、淋巴细胞亚群(总T细胞、B细胞、NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc)水平及血浆相关细胞因子水平的变化情况。  结果：①治疗组、对照组临床总有效率分别为83.33%、53.33%;组间临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P<0.05)。②组间治疗后比较,Hb、WBC、Ret水平差异有统计学意义,治疗组明显高于对照组(P<0.05)。③组间治疗后比较,miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平差异有统计学意义,治疗组下调幅度明显强于对照组(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平均明显上调(P<0.05);两组治疗后与正常组比较, miRNA-155-5p、miRNA-1260b表达水平虽有所下降,但均未达到正常水平(P<0.05)。④组间治疗后比较,NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc水平差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,NK细胞、Th细胞比例及Th/Tc水平均明显不足(P<0.05),Tc细胞比例明显过高(P<0.05)。两组治疗后与正常组比较,治疗组Th/Tc水平差异有统计学意义,尚未达到正常水平(P<0.05),而NK细胞、Th细胞及Tc细胞比例与正常水平已无显著差异(P>0.05);对照组NK细胞、Th细胞、Tc细胞比例及Th/Tc水平差异有统计学意义,均未达到正常水平(P<0.05)。⑤组间治疗后比较,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α、TGF-β1的水平差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前与正常组比较,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α、TGF-β1的水平差异有统计学意义,IFN-γ、IL-12p70、TNF-α水平明显过高(P<0.05),TGF-β1水平明显过低(P<0.05)。两组治疗后与正常组比较,IFN-γ、TNF-α、TGF-β1的水平差异均有统计学意义,尚未达到正常水平(P<0.05),而治疗组IL-12p70无显著差异,已恢复至正常水平(P>0.05)。  结论：在西医常规治疗基础上,血复生浸膏联合辨证类方治疗再障的疗效较为满意,其调控再障免疫异常的机制可能是通过改善淋巴细胞亚群失衡、抑制造血负调控因子、下调miRNA-155-5p、miRNA-1260b的表达而实现。     

类风湿关节炎患者血清IL-35的水平及其与疾病活动度的关系

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清IL-35表达水平与疾病活动度的相关性。方法选取确诊RA患者118例,分为活动期组62例和缓解期组56例。同时选取90例健康人作为对照,ELISA法检测RA患者及对照者血清IL-35水平,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中IL-35亚基EBI3和P35 mRNA表达水平。分析血清IL-35水平与DAS28评分、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、类风湿因子(RF)、关节肿胀数(SJC)和关节压痛数(TJC)等的相关性。结果活动期组RA患者血清中IL-35浓度(38.09±16.90)pg/m L显著低于对照组[(82.25±15.82)pg/m L,P0.01)]和缓解期组[(72.96±11.74)pg/m L,P0.01)];依据DAS28评分将活动期组RA患者分为轻度、中度和重度组,血清IL-35水平(pg/m L)在3组中依次降低(轻度60.95±7.31,中度39.68±9.51,重度28.02±9.16),轻度组与中度或重度组间差异具有统计学意义(P0.05)。活动期组和缓解期组患者血清IL-35水平与SJC、CRP和DAS28评分呈负相关性(P0.05),与ESR、TJC、RF无相关性。PBMC中P35 mRNA在RA活动期组中显著降低,低于健康对照组和缓解期组(0.47±0.18 vs 1.91±1.121.82±0.53,P0.01),但EBI3 mRNA在活动期组(1.62±0.68)、缓解期组(1.48±0.77)及对照组(1.86±1.21)中差异无统计学意义(P0.05)。结论活动期组RA患者血清IL-35水平显著下降,且伴随P35 mRNA水平下降,并与RA疾病活动度密切相关,可作为RA疾病活动度评价的潜在指标。     

年龄相关性黄斑变性血浆蛋白质组学初步研究

目的 应用比较蛋白质组学技术,从蛋白质水平初步探讨年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)的发病机静.方法 门诊确诊湿性AMD组患者13例(18眼)、干性AMD组患者11例(17眼),6名健康志愿者作为对照组.采集外周血,用双向凝胶电泳结合质谱分析、生物信息学分析方法对各组患者血浆蛋白进行比较蛋白质组学分析.结果 正常对照组、干性AMD组、湿性AMD组中各样品图谱蛋白点平均匹配率分别为91.5％、92.2％、92.9％.发现有219个蛋白质斑点在3组凝胶中差异有统计学意义,获得有效鉴定及临床意义的蛋白质共28种.湿性AMD存在明显的补体激活、细胞生长因子相对高表达、细胞增生作用增强、抗损伤功能降低,而代谢障碍及抗氧化功能降低在干性及湿性AMD均存在.炎症损伤及由此触发的细胞增生在湿性AMD的发病过程中起了重要作用.结论 AMD患者血浆蛋白表达的改变,有助于阐明AMD发病机制,还可能作为AMD的治疗靶点,对早期诊断和治疗有意义.     

生血合剂环孢菌素治疗慢性再障临床对照研究

目的:研究健脾补肾活血中药复方生血合剂治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)的疗效和安全性,并比较CAA不同中医证型患者的疗效差异。方法:纳入62例CAA患者分为治疗组32例和对照组30例,治疗组患者辨证分为脾肾阳虚型(9例)和脾肾阴虚型(23例),脾肾阳虚型患者服用生血合剂1号,脾肾阴虚型患者服用生血合剂2号,对照组服用环孢菌素A(CsA),两组均配合支持治疗,治疗6月后,进行疗效观察和安全性评价。结果:治疗组、对照组在临床疗效、外周血象/骨髓象改善方面比较无明显差异(P>0.05),但治疗组在中医证候改善方面明显优于对照组(P<0.05),且生血合剂发生不良反应也明显少于CsA。脾肾阳虚型患者在临床疗效、血象改善方面优于脾肾阴虚型(P<0.05)。结论:生血合剂治疗CAA疗效与CsA相似,但在中医证候改善方面,生血合剂则明显优于CsA,且生血合剂治疗未见明显不良反应。CAA脾肾阳虚型治疗效果优于脾肾阴虚型,提示CAA"阳虚易治,阴虚难调"。