心理因素对脊髓损伤患者神经干细胞移植疗效的影响

 目的 探讨脊髓损伤患者心理因素对神经干细胞(neural stem cells, NSCs)移植疗效的影响.方法 随机选择60例脊髓损伤患者,根据自评焦虑量表(SAS)评分系统分为高评分组和低评分组,采用相同的NSCs移植方案,术后给予相同的治疗及护理措施,术后3个月评价患者各方面改善情况,并比较两组之间的差别.结果 SAS低评分组改善情况明显好于高评分组,两者间差异具有统计学意义.结论 心理因素对脊髓损伤患者NSCs移植疗效有一定影响.     

骨髓源性神经干细胞周围神经移植的实验

背景由于周围神经只是神经元细胞的轴突,有关神经干细胞的研究几乎都集中在神经元细胞上,因此,关于周围神经修复的研究可以借鉴神经干细胞研究的某些经验.目的观察自体骨髓源性神经干细胞于周围神经损伤区移植后周围神经修复情况,以及所移植神经干细胞能否在周围神经损伤区以分化神经元的形式存活并迁移到脊髓.设计观察对比实验.单位南方医科大学珠江医院神经医学研究所.材料清洁级新西兰大白兔8只,体质量1.5～2.5 kg,雌雄不拘.方法实验于2004-04/10在南方医科大学珠江医院神经医学研究所完成.①取新西兰大白兔骨髓基质细胞体外培养及诱导分化为神经干细胞.②采用以溴脱氧尿嘧啶核苷标记细胞和免疫细胞化学SABC法检测观察培养细胞.③制备兔坐骨神经损伤模型,随机选择一侧坐骨神经损伤区为移植侧,注入生理盐水、胶原基质蛋白及细胞包埋液至0.01 mL(含干细胞1×1010L-1);另外一侧为对照侧,注入胶原基质蛋白悬液0.01 mL.移植后3个月灌注固定,行自体周围神经损伤区移植;移植区、脊髓区、对侧损伤区和正常神经区取材观察.主要观察指标神经干细胞移植区、脊髓区、对侧损伤未移植区神经纤维形态及神经元细胞.结果移植区生长的神经纤维密度及连续性明显比对侧未移植区高,光镜下可见较多的许旺细胞;放大至400倍视野下,还可见有髓神经纤维的郎飞氏结;神经纤维间隙也可见有黏液基质,并有少数成纤维细胞;移植区、脊髓区和对侧未移植坐骨神经损伤区均未见有神经元样细胞存在.结论自体骨髓源性神经干细胞周围神经缺损区移植有利于神经纤维的修复,不能在周围神经移植区、脊髓区和对侧缺损对照区以神经元的形式存活.     

表麻型气管导管对老年高血压患者全麻拔管心血管反应的影响

【目的】探讨经表麻型气管导管气管黏膜表面麻醉对老年高血压患者拔管时心血管反应的影响。【方法】将180例老年高血压择期手术患者分为6组，每组30例。A、A’组：使用表麻型气管导管，拔管前注入2％利多卡因2ml；B、B’组：普通气管导管套囊外涂抹2％利多卡因凝胶；C、C’组：为对照组，无任何表面麻醉；其中，A、B、C组手术时间小于2h，A’、B’、C’组手术时间大于2h。观察指标：记录血压、心率的基础值、手术结束即刻、拔管时、拔管后1、3、5min的变化，并计算RPP（HRxSBP）。【结果】手术时间〈2h时，两种表麻方式在拔管即刻和拔管后不同时点与对照组比较有很好的减少循环波动的保护作用，差异有统计学意义（P〈0．01）；手术时间〉2h时，经表麻型气管导管内表面麻醉，在拔管即刻和拔管后不同时点与利多卡因凝胶组比较有很好的减少循环波动的保护作用，差异有统计学意义（P〈0．01）。【结论】经表麻型气管导管行气管内表面麻醉，是防止老年高血压患者拔管期心血管反应的最好方法。     

骨髓源性神经干细胞自体移植对癫(癎)大鼠海马的修复作用

目的 探讨骨髓源性神经干细胞自体移植对癫(癎)大鼠海马的修复作用.方法 雄性SD大鼠随机分为正常对照组、移植组和非移植组.无菌条件下分离大鼠骨髓基质细胞,在特定条件下培养、诱导其分化为神经干细胞;对移植组和非移植组大鼠建立颞叶癫(癎)模型,将诱导分化的神经干细胞自体移植至移植组大鼠右侧海马内,观察移植后1周、2周、4周、8周和16周模型鼠海马的形态学变化.结果 移植组与非移植组海马CA3区锥体细胞数各时间点显著少于正常对照组(均P＜0.01);与非移植组比较,移植组海马CA3区锥体细胞数于移植后第2～16周明显增多(均P＜0.01);移植组各时间段之间差异有统计学意义(均P＜0.01).与正常对照组相比,移植组和非移植组海马损伤侧的Timm染色评分显著增高(均P＜0.01);但移植组移植2周后各时间点评分显著低于非移植组(均P＜0.01);非移植组随制模时间延长评分持续升高.MRI检查显示在神经干细胞移植后1周和2周时低信号改变区比较局限,此后低信号影随着时间的推移逐渐增大.结论 骨髓源性神经干细胞自体移植至癫(癎)大鼠后能够在海马中生存并迁移,具有减轻海马CA3区锥体细胞缺失、抑制海人酸引起的苔状纤维发芽的修复作用.     

兔脊髓损伤不同时期的神经干细胞移植治疗的效果

目的：研究新西兰大白兔脊髓损伤后不同时期神经干细胞(neuralstem cells，NSCS)移植治疗的不同效果，探讨脊髓损伤移植治疗的最佳时机。方法：体外培养、诱导新西兰大白兔骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells，BMSCs)为NSC并行5-溴-2-脱氧尿苷(bromodeoxy uridine／5-bromo-2-deoxy uridine，BrdU)标记。手术造成兔脊髓全横断模型。在术后即时，7，14，21，28d分别行NSC局部移植，同时设立脊髓全横断空白对照组，正常对照组。于移植后3个月观察动物脊髓损伤局部病理变化。结果：术后即时移植组局部仅有少量Brdu标记阳性细胞存活，通过脊髓损伤区的神经纤维数目少；7，14d移植组局部有大量Brdu标记阳性细胞存活，通过脊髓损伤区的神经纤维数目多。神经纤维排列较整齐；21，28d移植组局部有大量Brdu标记阳性细胞存活，但通过脊髓损伤区的神经纤维数目少，且再生的神经纤维排列紊乱；空白对照组未发现Brdu标记阳性细胞，在脊髓损伤区域未发现再生通过的神经纤维。结论：实验证明了脊髓损伤后7～14d为NSC最佳移植时期，同时提示NSC移植对动物脊髓损伤后的组织修复具有促进作用。     

CT引导下脊髓内穿刺骨髓间充质细胞移植治疗脊髓损伤后遗症60例临床疗效分析

目的探讨应用CT引导下脊髓穿刺骨髓间充质细胞移植治疗脊髓损伤后遗症的临床疗效。方法对60例脊髓损伤后遗症患者行CT引导下脊髓穿刺骨髓间充质细胞移植,并进行术前和术后半年ASIA损伤分级评分。结果患者感觉功能、运动功能、日常生活能力明显改善。结论CT引导下脊髓穿刺骨髓间充质细胞移植可以显著改善脊髓损伤后遗症患者的症状和体征,提高患者生活质量。     

兔脊髓损伤不同时期的神经干细胞移植治疗的效果

目的:研究新西兰大白兔脊髓损伤后不同时期神经干细胞(neuralstemcells,NSCS)移植治疗的不同效果,探讨脊髓损伤移植治疗的最佳时机。方法:体外培养、诱导新西兰大白兔骨髓基质细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)为NSC并行5-溴-2-脱氧尿苷(bromodeoxyuridine/5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)标记。手术造成兔脊髓全横断模型,在术后即时,7,14,21,28d分别行NSC局部移植,同时设立脊髓全横断空白对照组,正常对照组。于移植后3个月观察动物脊髓损伤局部病理变化。结果:术后即时移植组局部仅有少量Brdu标记阳性细胞存活,通过脊髓损伤区的神经纤维数目少;7,14d移植组局部有大量Brdu标记阳性细胞存活,通过脊髓损伤区的神经纤维数目多,神经纤维排列较整齐;21,28d移植组局部有大量Brdu标记阳性细胞存活,但通过脊髓损伤区的神经纤维数目少,且再生的神经纤维排列紊乱;空白对照组未发现Brdu标记阳性细胞,在脊髓损伤区域未发现再生通过的神经纤维。结论:实验证明了脊髓损伤后7～14d为NSC最佳移植时期,同时提示NSC移植对动物脊髓损伤后的组织修复具有促进作用。     

继发性面肌痉挛6例治疗体会

目的:探讨继发性面肌痉挛的病因、临床特点、影像学检查方法及手术治疗.方法:回顾性分析2005年6月至2008年8月我科收治的6例继发性面肌痉挛患者的临床资料.经薄层头颅CT扫描发现5例,1例术中证实.2例桥小脑角脑膜瘤及1例桥小脑角胆脂瘤行肿瘤切除减压,同时行显微血管减压术:1例小脑镰旁脑膜瘤行后正中入路脑膜瘤切除术;1例桥脑胶质瘤行放射治疗;1例椎动脉及基底动脉多发动脉瘤未做治疗.结果:4例手术患者术后面肌痉挛症状消失,随访6个月.症状无复发.1例术后出现化学性脑膜炎,经治疗痊愈.结论:继发性面肌痉挛多由桥小脑角区占位病变引起;大多合并其他后组颅神经或脑功能损害;术前薄层头颅CT扫描可作为基本影像学检查方法;术中切除肿瘤同时行显微血管减压术疗效满意.     

自体神经干细胞在兔损伤脊髓内存活并分化的实验效果

目的：将新西兰大白兔骨髓基质细胞体外培养、诱导、分化为神经干细胞，并且移植到兔脊髓横断性损伤模型中，观察移植的细胞是否能够存活及分化。方法：兔骨髓基质细胞取自成年兔的股骨或髂骨，体外培养、诱导、分化为神经干细胞，将兔制成脊髓全横断模型。伤后2周将神经干细胞手术方法直视下移植到受损脊髓缺损处，伤后12周将兔行甲醛灌注留取神经干细胞移植处作为标本，行病理及免疫组化染色。并设立脊髓损伤空白对照组(移植后不行神经干细胞移植)。结果：移植组与对照组相比，移植组移植部位存在大量5-溴-2-脱氧尿苷(bromodeoxy uridine／5-bromo-2-deoxy ufidine，BrdU)染色阳性的细胞，表明移植的细胞在体内可以存活；同时，移植组脊髓损伤部位存在神经元特异性烯醇化酶抗体(neuron-specific endase，NSE)、胶质原性纤维酸性蛋白抗体(glial fibrillary-acidic protein，GFAP)染色阳性的细胞，表明移植的细胞可以分化为具有神经元或胶质细胞特征的细胞。结论：自体神经干细胞在损伤脊髓内可以存活并能分化为类神经组织细胞。     

兔骨髓基质细胞体外培养、诱导及分化成神经干细胞的实验研究

目的：研究新西兰大白兔骨髓基质细胞体外培养及诱导分化情况。方法：梯度密度离心法分离新西兰大白兔骨髓基质细胞(BMSCs)，于体外用神经干细胞培养基和多种细胞因子进行培养、诱导、分化，细胞免疫化学方法进行鉴定。结果：新西兰大白兔骨髓基质细胞能在体外培养中增殖、分化，具有克隆能力的骨髓基质细胞能表达干细胞特异性抗原神经巢蛋白(Nestin)，这些细胞最终能分化出类神经元样细胞，免疫细胞化学检测可见有神经核蛋白抗体(NeuN)的表达。结论：新西兰大白兔骨髓基质细胞是具多向分化潜能的细胞，具有较强的增殖、自我更新能力。在适宜的条件下，可以分化成能表达神经系细胞特异性抗原的细胞。骨髓基质细胞来源方便、取材较容易，体外培养和扩增的技术条件简便，具有向神经系细胞分化的潜能，可以考虑作为细胞移植治疗的种子细胞