幽门螺杆菌调控胃上皮细胞基因表达的机制

目的：在基因转录调节水平上研究幽门螺杆菌生物活性物质调控胃上皮细胞基因表达的机制。方法：人胃上皮癌细胞株SGC-7901采用常规方法培养，幽门螺杆菌菌株NCTC11637采用马血清琼脂培养基培养，收获后用超声粉碎法提取生物活性物质，基因转录采用报告基因方法分析。结果：幽门螺杆菌提取物使SRE反式激活的基因转录增加（P〈0．01），而对CRE反式激活的基因转录没有明显影响（P〉0．01）。结论：幽门螺杆菌生物活性物质通过顺式转录调控元件SRE调控细胞基因表达。     

纳米药物载体在医药领域中的研究进展

纳米本身是个长度单位，1nm等于10^-9m，纳米颗粒的粒径比毛细血管通路还要小12个数量级。当一种物质被不断切割至一定程度，其粒子小至纳米量级即为纳米材料。纳米材料往往会产生一些新的理化特性，正是这些特有的特性，使其在药物和基因输送方面有许多优越性：①许多半衰期短的药物可能需要每天重复给药多次，制备成缓释药物后，将极大延长药物作用时问②能解决口服易水解药物的给药途径问题，大大降低药物与胃蛋白酶等消化酶接触的机会③可进行靶向给药：纳米载体经特殊加工后可达到靶向输送的目的，更加准确地对准组织或器官，减少药物对人体的不良反应④载药纳米粒可以改变膜转运机制，增加药物对生物膜的透过性，有利于药物透皮吸收与细胞内药物发挥⑤可在保证药物作用的前提下，减少给药剂量，减少药物的副作用⑥可消除特殊生物屏障对药物作用的阻碍⑦能携带多种化学药物⑧载体及其生物学降解产物易被消除。     

致癌物诱导恶变细胞中线粒体高变区序列分析

目的检测苯并（a）芘代谢产物反式二羟环氧苯并芘（反式-BPDE）及结晶型硫化镍（NiS）诱发永生化人支气管上皮细胞系（16HBE）恶性转化过程中线粒体DNA控制区序列变化。探讨线粒体DNA控制区在环境致癌物苯并（a）芘及硫化镍致癌作用中是否存在靶分子序列。方法 应用银染PCR-单链构向多态性（SSCP）方法及测序方法分析恶变细胞中线粒体DNA高变区的序列变化。结果 经反式-BPDE和NiS诱导恶变的人支气管上皮细胞系线粒体高变区均未发现异常改变。结论 线粒体基因控制区可能并非是化学致癌物诱发肺癌的靶序列。     

益生菌对急性胰腺炎大鼠肠道微生态及紧密连接的影响

目的 探讨经肠道补充益生菌对急性胰腺炎（AP）大鼠肠上皮细胞紧密连接、屏障功能及微生态的影响.方法 经胰管注射3%牛磺胆酸钠造成大鼠AP后,分别给予肠外营养（PN组）和PN＋益生菌（益生菌组）,持续5天;第6天处死大鼠,取腔静脉血、肺及肝组织和肠系膜淋巴结匀浆作细菌培养测细菌易位率;取末段回肠和结肠,采用免疫组织化学法测定其跨膜结合蛋白表达,电镜观察肠上皮细胞紧密连接超微结构;取盲肠内粪便作厌氧培养及细菌种群DNA指纹图谱分析.结果 益生菌组大鼠肠道内乳杆菌和双歧杆菌数量高于PN组（P＜0.05）,而潜在致病菌产气荚膜梭菌低于PN组（P＜0.05）,DNA指纹图谱也显示益生菌组优势菌群的基因条带和正常大鼠具有较高一致性,与PN组相比则有明显差异;益生菌组小肠和大肠跨膜结合蛋白的表达明显优于PN组（P=0.001,P=0.036）,肠上皮细胞紧密连接、微绒毛较完整;益生菌组大鼠的血、肺、肝、肠系膜淋巴组织的细菌易位率低于PN组（P=0.0413）.结论 益生菌能纠正AP大鼠PN时肠道菌群紊乱,增加肠上皮跨膜结合蛋白表达,维持肠上皮紧密连接,减少细菌易位。     

兔结膜基质诱导人骨髓间质干细胞分化的初步研究

 【目的】观察人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）在保存人羊膜及兔眼表结膜基质上分化的情况。【方法】24只新西兰兔随机分为2组。实验组：培养有人MSCs的羊膜移植组，将人MSCs接种在保存人羊膜上培养4d，用5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）标记后移植到兔眼表结膜缺损区；对照组，单纯羊膜移植组。分别于移植后1，2，3，4，6和8周，摘取各组实验眼行组织学和免疫组织化学检查，组织学检查移植到兔结膜基质的MSCs的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况；免疫组织化学检测移植到结膜基质的带有BrdU标记的细胞角蛋白3／12（CK3／CKl2）和角蛋白13（CK13）的表达。【结果】MSCs接种到羊膜后能在羊膜上生长，与羊膜共培养4d后，MSCs贴附羊膜生长迅速，组织学特征无明显改变。用羊膜负载MSCs移植到兔结膜缺损区，术后免疫组织化学检测结膜上皮层CK13表达阳性，CK3／CK12表达阴性，在重建的结膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞，未见异常增殖细胞。【结论】人羊膜可作为MSCs的载体，采用人羊膜负载MSCs行兔结膜移植，MSCs能在兔结膜上皮层存活并增殖。     

颈动脉内中膜厚度及斑块分级在预测冠心病中的作用

 【目的】界定颈动脉内中膜厚度及其斑块分级在估测冠心病中的最佳预测值。【方法】用高频超声检测125例患者颈总动脉内中膜厚度、颈动脉分叉处内中膜厚度，以及颈动脉斑块分级，评价它们估测冠心病的作用，并用ROC曲线评价它们的诊断价值。【结果】冠心病组颈总动脉及分叉处内中膜增厚、斑块分级高，与对照组比较差异有统计学意义，P〈0．05；ROC分析显示颈总动脉及分叉处内中膜增厚、斑块分级均可估测冠心病，其曲线下面积分别为0．70、0．75、0．74；将颈总动脉分叉处内中膜增厚≥1．3mm，颈总动脉内中膜增厚≥0．9mm，颈动脉斑块分级≥2定义为阳性，3者联合评价其阳性积分，则ROC曲线下面积为0．82，以3者中任2项阳性为预测值估测冠心病，灵敏度95．3％，特异度84．2％，阳性预测值85．3％，阴性预测值86．4％。【结论】颈动脉超声检查颈总动脉及其分叉处内中膜厚度、颈动脉斑块分级可用于估测冠心病。以3者联合评价诊断价值高。     

大鼠肾小球系膜细胞原代培养与鉴定

目的: 原代培养及鉴定大鼠肾小球系膜细胞(GMC),探索分离、培养GMC的最佳条件.方法: 对大鼠双肾灌洗后,筛网滤过分离肾小球,并用Ⅳ型胶原酶消化处理,然后种植法体外培养大鼠肾小球.同时采用免疫细胞化学和免疫荧光技术,检测亚代GMC的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、细胞角蛋白(Cytokeratin)、Ⅷ因子相关抗原抗体的表达,鉴定GMC,并绘制其生长曲线.结果: 种植4 d后,约80%肾小球贴壁,可见卵圆形上皮细胞生长,18 d左右镜下细胞多呈星状或三角形并伴有不规则的突起,21 d后细胞生长密集, 细胞团簇之间形成网络.免疫细胞化学和免疫荧光证实抗α-SMA及抗Vimentin染色阳性,而抗Cytokeratin、抗Ⅷ因子抗体染色为阴性.GMC亚代倍增时间为4 d. 结论: 结果表明,用改良的培养方法成功率高,培养的细胞为大鼠肾小球系膜细胞.     

转化生长因子-β1体外诱导气道上皮细胞向肌纤维母细胞转分化

目的探讨TGF-β1体外诱导气道上皮细胞表型向肌纤维母细胞转分化的可能性。方法TGF-β1（10μg/L）处理气道上皮细胞株16HBE-14o，显微镜下实时观察形态学变化，免疫染色方法检测E-cadherin，α-SMA和F-actin的表达，RT-PCR方法检测E-cadherin，α-SMA mRNA的表达。结果TGF-β1 10μg／L作用3d，气道上皮细胞株16HBE-14o失去正常的立方形，变得肥大，胞体拉长；上皮细胞特征性标志E-cadherin表达减弱，胞浆中出现肌纤维母细胞表型标志物α-SMA，F-actin聚合形成张力纤维沿着细胞长轴分布。结论本研究提示，气道上皮细胞在TGF-β1的作用下经历了表型改变向肌纤维母细胞转分化，可能作为肺肌纤维母细胞的一个新的来源，从而参与哮喘气道重塑、气道高反应性的发生发展。     

联合抗代谢药物预防兔后发性白内障的研究

目的 探讨联合抗代谢药物在预防兔后发性白内障（PCO）中的作用及其机制.方法 40只新西兰白兔随机分为两组。在兔晶状体超声乳化吸出术后，实验组右眼晶状体囊袋内注入含有02mg／ml丝裂霉素及12．5mg/ml 5-氟尿嘧啶的甲基纤维素，左眼晶状体囊袋内仪注入甲基纤维素设置空白对照组；对照组右眼晶状体囊袋内注入含有0．2mg/ml丝裂霉素的甲基纤维素，左眼晶状体囊袋内注入含有12．5mg/ml 5-氟尿嘧啶的甲基纤维素。部分动物囊袋内植入人工晶体。手术后对动物进行1～12个月临床观察，对不同阶段进行晶状体囊膜组织和人工晶体病理学检查、晶状体囊膜平片检查及人工晶体电镜扫描。结果 空白对照组在手术后2周出现后囊膜混浊，随着术后时间的延长，PCO明显加重；对照组在术后1个月发生不同程度PCO，而实验组观察12个月，未见PCO发生。结论 晶状体囊袋内联合抗肿瘤药物能有效杀伤晶状体上皮细胞（LEC）、晶状体赤道部生发区细胞，较单一抗肿瘤药物更可靠预防PCO的发生。晶状体囊袋内联合抗肿瘤药物可能为解决预防人类PCO提供一条新途径。     

角质细胞生长因子对上皮细胞损伤的防护作用

角质细胞生长因子（KGF）属于成纤维细胞生长因子家族,由成纤维细胞和其他来源的基质细胞合成分泌,可特异性地促进上皮细胞的增殖分化，在多种组织器官中发挥着重要功能,尤其是在上皮细胞损伤的修复中起重要作用。KGF防护作用的机制可能是通过调节促细胞增殖、抗氧化蛋白等相关基因的表达来实现的。