转基因内皮细胞的构建及其在复合血管上种植的初步研究

目的:为了解决小口径(直径7mm以下)人造血管术后通畅率低下的问题,利用生物-人工复合血管,结合分子生物学手段,将转入血管内皮生长因子(VEGF165)基因的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)种植于复合血管内腔面,为解决此临床难题提供新的思路和手段。材料方法:构建VEGF165真核表达质粒pCI-neo-VEGF165,获得正确的质粒用于转染HUVEC。从中科院购买HUVEC(代号:ECV-304),用脂质体介导法将pCI-neo-VEGF165转入细胞,经G418筛选后,计数阳性克隆,以比较脂质体和质粒在不同比例情况下转染效率的高低。实验组按质粒和脂质体比例的不同分为4组:1μg/3μl;2μg/6μl;2μg/8μl;3μg/12μl。ELISA检测瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达。再将VEGF165基因瞬时转入HUVEC,利用自己设计的旋转培养装置,将细胞均匀地粘附、种植于复合血管内腔面。复合血管是人工材料(聚酯)和生物材料(成纤维细胞长入,胶原形成)有机结合而成,是将包有聚酯网的硅胶棒埋入绵羊背部皮下组织,3个月后取出,抽去硅胶棒而得到的。结果:脂质体转染效率以2μg/8μl组阳性克隆数最多;ELISA测定瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达量为532·5±43·1pg/ml。使用旋转培养装置的细胞均匀地粘附于复合血管,未使用者细胞积聚于血管腔面下部;转入和未转入VEGF165基因的HUVEC在复合血管内腔面覆盖面积百分比分别为69·9%±3·5%、43·7%±2·5%,有明显改善。结论:转入VEGF后可促进HUVEC在复合血管上生长,旋转培养装置有利于细胞的均匀粘附。     

Upregulation of VEGF and FGF2 in normal rat brain after experimental intraoperative radiation therapy

The expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and fibroblast growth factor (FGF)2 in the irradiated brain was examined to test how a single high dose radiation, similar to that used for intraoperative radiation therapy given to the normal cerebrum, can affect the vascular endothelium. After a burr hole trephination in the rat skull, the cerebral hemisphere was exposed to a single 10 Gy dose of gamma rays, and the radiation effect was assessed at 1, 2, 4, 6, and 8 weeks after irradiation. Histological changes, such as reactive gliosis, inflammation, vascular proliferation and necrosis, were correlated with the duration after irradiation. Significant VEGF and FGF2 expression in the 2- and 8-week were detected by enzyme-linked immunosorbent assay quantification in the radiation group. Immunohistochemical study for VEGF was done and the number of positive cells gradually increased over time, compared with the sham operation group. In conclusion, the radiation injuries consisted of radiation necrosis associated with the expression of VEGF and FGF2. These findings indicate that VEGF and FGF2 may play a role in the radiation injuries after intraoperative single high-dose irradiation.     

表皮生长因子在成年猴脊髓的表达

目的探讨EGF(epidermal growth factor)在成年猴脊髓的表达。方法EGF特异性抗体的免疫细胞化学染色技术(SP法)。结果EGF免疫阳性物质主要位于神经元胞浆内，前角前内侧核、前角前核和前角前外侧核的大运动神经元以及背核的大神经元具有强免疫阳性信号，中等强度免疫阳性神经元主要分布于前角后内侧核、前角中央核、前角后外侧核和前角后外侧后核、中间内侧核和中央管周围，弱阳性神经元主要位于后角边缘核、胶状质、后角固有核和后角连合核。此外，在脊髓白质中可见部分EGF阳性胶质细胞和纤维。结论EGF免疫阳性反应产物在猴脊髓有广泛的分布，提示其功能可能涉及多种神经元和非神经细胞，为探讨表皮生长因子在猴脊髓分布规律和功能提供了有价值的形态学资料。     

江苏省6县区≥40岁居民生命质量量表信效度检验与常模建立

目的 评估使用SF-12v2量表评价江苏省6县区≥40岁居民生命质量的信度和效度,获取江苏省≥40岁居民的常模参考数据。方法 采用多阶段分层整群抽样的方法,在江苏6个县区调查完成3 583份SF-12v2问卷。使用Cronbach's α和Spearman-Brown折半信度进行信度分析,使用因子分析、集合度和区分度实验进行效度分析。结果 SF-12v2量表12项条目的Cronbach’s α为0.886,删除任1维度后的Cronbach’s α为0.810~0.841,生理总评分和心理总评分的Cronbach’s α为0.767和0.759;Spearman-Brown折半信度为0.795。因子分析结果显示,采用方差最大正交旋转法共提取2个主成分,累计方差贡献率为61.2%。SF-12v2量表的8个维度中,各维度的集合效度下限均高于区分效度的上限,集合效度实验和区分效度实验的成功率均为100%。结论 SF-12v2量表应用于评价≥40岁居民的生命质量具有良好的信度和效度,各维度评分可作为江苏省≥40岁居民生命质量的常模参考数据。     

从科技期刊出版源头推进开放科学运动——TOP Factor的产生及影响

【目的】 研究以开放透明为导向的新一代期刊评价体系TOP Factor的来源及应用,为我国科技期刊界参与并推动开放科学运动提供参考。【方法】 利用网络调研法、文献调研法及数据分析法,探究TOP Factor的产生背景及340余种期刊的得分情况。【结果】 TOP Factor的产生主要归因于学术界已认识到影响因子评价体系存在漏洞,需要建立一套可以客观反映期刊发表内容质量,提高研究透明度和再现性的严谨、透明的期刊评价体系。TOP Factor共有10项指标,每项指标分为0~3分4个等级,目前已进行评估的期刊中心理学领域的期刊得分较高。【结论】 开放透明已成为今后学术出版的大趋势,TOP Factor是从出版源头推进开放科学,随着其在促进数据开放共享、提高学术成果可重复性方面的优势逐渐突显,使用TOP Factor的期刊和出版商将会越来越多。我国科技期刊应重视这一趋势并积极制定与开放科学相关的期刊政策,努力打造开放透明的学术生态。     

血清血管内皮生长因子测定在鼻咽癌检测中的意义

目的：探讨血清血管内皮生长因子能否作为鼻咽癌的肿瘤标志物,并作为鼻咽癌诊断与分期检测的指标。方法：对88例鼻咽癌患者和60例鼻咽颈部良性病变及73例正常人进行血清血管内皮生长因子的定量测定。结果：鼻咽癌患者与鼻咽颈部良性病变、正常人比较和鼻咽癌临床各期比较血清血管内皮生长因子含量有显著性的差异。结论：血清血管内皮生长因子含量测定可作为鼻咽癌的发现诊断和临床分期简便可靠的检测指标。     

血管内皮生长因子在妊高征胎盘中的表达研究

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)在妊高征(PIH)胎盘中的表达情况.方法用免疫组织化学法,检测30例正常晚孕胎盘(对照组)和34例妊高征胎盘(妊高征组)中的VEGF表达水平,并作计算机图像分析,测定各组标本的阳性染色光度值.结果VEGF在正常晚孕胎盘和妊高征胎盘中均有表达,其分布基本一致,主要在滋养细胞、血管内皮及绒毛间质.计算机图像分析结果示,对照组VEGF阳性染色光度为0.23780±0.00434,妊高征组VEGF阳性染色光度为0.20688±0.01530,其中轻度0.22603±0.00828,中度0.20364±0.00365,重度0.19151±0.00441,妊高征组中VEGF表达明显低于对照组P＜0.01.且随妊高征病情的加重,VEGFF表达水平呈下降趋势.结论妊高征胎盘中VEGF表达水平降低可能与胎盘血管生成减少及胎盘滋养细胞侵入异常有关,在妊高征的发病中起重要作用.     

人白细胞介素18（hIL—18）的cDNA基因克隆及序列测定

目的：克隆人白细胞介素18（IL－18）全长cDNA基因,进一步探讨人白细胞介素18的功效。方法：采用RT－PCR的方法从人肝组织中扩增出人白细胞介素18（IL－18）基因,并克隆到真核表达的绿色荧光蛋白报告载体pEGFP-NI中,结果：经PCR及DNA序列测定得以证实其序列与文献报导一致,结论：该实验成功地克隆了IL－18cDNA,并将其重组构建了含有IL－18cDNA的真核表达载体pEGFP-N1-IL18。     

血清胆红素与冠脉病变程度及血脂的相关性分析

目的分析血清胆红素与冠脉病变程度及血脂的关系。方法对冠状动脉造影术确诊的冠心病者和非冠心病者进行病例-对照研究。结果冠心病组血清胆红素水平低于非冠心病组,差异有显著性(P＜0.05)。多元逐步回归分析血清直接胆红素进入回归方程,提示血清直接胆红素与冠脉病变程度呈独立负相关,其相关强度与甘油三脂(TG)和空腹血糖(FBS)相似。血清胆红素与血脂直线相关分析提示血清胆红素与甘油三脂、总胆固醇(TCHO)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)呈显著负相关。结论血清直接胆红素水平与冠脉病变程度呈独立负相关,低血清胆红素是冠状动脉粥样硬化的危险因素,血清胆红素与甘油三脂、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇呈负相关。