细菌内快速构建两种用于肝纤维化基因治疗的重组复制缺陷型腺病毒

目的 :在大肠杆菌内快速构建两种分别含有人肝细胞生长因子 (hepatic growth factor,HGF)和非分泌型人尿激酶型纤溶酶原激活剂 (urokinase- type plasm inogen activator,u PA) c DNA片段的重组复制缺陷型腺病毒。方法 :分别将人 HGF和 u PA c DNA片段与穿梭载体 p Track- CMV连接 ,线性化后与骨架载体 Ad Easy- 1在大肠杆菌 BJ5 183内同源重组获得腺病毒载体 p Ad HGF和 p Adu PA,经 2 93细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒 Ad HGF和 Adu PA;将 Ad HGF和 Adu PA分别体外感染肝细胞株 L0 2 ,以 Northern印迹法和 Western印迹法检测两种病毒在肝细胞中的表达。 结果 :连接、重组后通过酶切和测序法筛选出病毒质粒 p Ad HGF和 p Adu PA;经 2 93细胞包装 ,3d后均观察到绿色荧光蛋白明显表达 ,Cs Cl梯度离心纯化最终分别获得 4× 10 1 0 efu/ m l滴度的重组病毒 Ad HGF和 6× 10 1 0 efu/ ml Adu PA;两种病毒体外感染肝细胞 3d后 ,HGF和u PA表达均明显增加。结论 :细菌内同源重组制备复制缺陷型腺病毒 ,纯化过程简单 ,重组腺病毒在肝细胞中均高效表达 ,为肝细胞移植基因治疗肝纤维化提供了新的手段     

人巨细胞病毒感染与上颌窦鳞癌

人类巨细胞病毒 (Ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ ,ＨＣＭＶ )与人类肿瘤的关系已成为肿瘤病毒学中一个重要的研究领域。大量的分子生物学和流行病学研究结果表明 ,ＨＣＭＶ与生殖道肿瘤及口腔肿瘤关系密切[1,2 ] 。有关人乳头状瘤病毒 (Ｈｕｍａｎｐａｐｉｌｌｏｍ     

应用不接触分离技术防止结直肠癌手术中癌细胞门静脉播散的临床研究

我们应用突变等位基因特异性扩增法 (ＭＡＳＡ) [1] ,对不接触分离技术和传统手术门静脉血中癌细胞的播散情况进行前瞻性对照研究 ,以期从基因水平评估不接触分离技术对结直肠癌手术中癌细胞门静脉播散的影响及其应用价值。一、对象与方法1.临床资料 :全组结直肠癌共 46例 ,皆经病理证实。传统手术组 :男 12例、女 10例 ,年龄 34 0～ 6 8 0岁 ,平均年龄为 (4 5 6± 9 7)岁 ;其中直肠癌 10例 ,乙状结肠癌 5例 ,盲肠癌 4例 ,升结肠、横结肠、降结肠癌各 1例。不接触分离技术组 :男 13例、女 11例 ,年龄 32 0～74 0岁 ,中位年龄为 (4 7 3± …     

骨髓间充质干细胞的分离培养及生物学特性研究

目的：通过体外细胞的培养方法将骨髓间充质干细胞由骨髓血中分离出来并加以纯化，进一步在体外培养条件下研究其增殖及生长特征，从而为探讨后续利用组织工程学方法修复肌肉骨骼系统组织缺损的可能性提供实验基础。方法：从骨髓血中提取间充质干细胞，体外培养扩增，再以相差显微镜、电镜观察并绘制生长曲线。结果：（1）通过离体培养，可以使体内环境下低丰度的骨髓间充质干细胞实现数目扩增。（2）体外培养条件下骨髓间充质干细胞具有成纤维细胞的生长特性。（3）体外单层培养条件下贴壁生长的骨髓间充质干细胞会出现“返祖现象”。（4）骨髓间充质干细胞内细胞器与其生物活性变化相一致。结论：骨髓间充质干细胞体外培养成功为今后利用自体间充质干细胞通过组织工程学方法修复肌肉骨骼系统的组织缺损提供功能细胞奠定了基础。     

脊髓运动诱发电位在脊髓肿瘤手术中的监测应用

目的探讨脊髓运动诱发电位(SCMEP)在脊髓肿瘤手术中监测的应用价值.方法采用硬膜外电极在椎管内直接刺激脊髓记录脊髓运动诱发电位(SCMEP)监测脊髓肿瘤手术,并对17例肿瘤患者的手术监测的记录结果进行回顾性分析.结果SCMEP由于病变部位及性质、刺激电极与记录电极间的距离不同,波幅及潜伏期的差异较大,电极安放后与手术结束时的结果个体对照,相差不显著(P=0.083;P=0.387).7例术中波幅降低超过预警值20%,5例经短暂休息或改变手术方向后,波幅恢复正常.结论SCMEP的波幅变化是提示脊髓损伤的可靠性灵敏指标,对辅助医生进行手术安全操作,缩短手术时间,提高手术质量,减少术后神经功能障碍起到重要作用.     

瘢痕疙瘩成纤维细胞p53基因突变的研究

目的　探讨瘢痕疙瘩成纤维细胞中 p5 3基因第 4～ 8外显子的突变规律及其意义。　方法　取瘢痕患者手术切除的瘢痕疙瘩和增生性瘢痕标本各 12例 ,并设患者自身正常皮肤标本及血标本为对照。体外分离、培养上述组织标本的成纤维细胞。采用聚合酶链式反应 单链构象多态性(PCR SSCP)分析方法和基因测序法 ,检测各种组织成纤维细胞中p5 3基因的突变情况。　 结果　 12例瘢痕疙瘩标本中有 9例p5 3基因外显子 4、5、6、7出现点突变和移码突变 ,增生性瘢痕标本、正常皮肤标本及血标本中均未检出突变。　结论　p5 3基因突变是瘢痕疙瘩形成和发展的重要因素之一。     

胸部手术围手术期心律失常的发生原因及处理

心律失常是开胸术后较常见的并发症。1996年12月～2002年6月我科共收治1100例开胸手术患者，其中231例术后发生心律失常，发生率为21％。现探讨其术后发生心律失常的危险因素及处理原则。     

大鼠IgECH2-3-FasL融合蛋白真核表达质粒的构建

在人类哮喘及其他过敏反应性疾病中 ,肥大细胞始终处于重要地位。IgE的Fc段与肥大细胞上高亲和力受体FcεRⅠ相连接触发过敏反应。单独的Fc段能封闭其高亲和力受体 ,阻断过敏反应 ,且将关键结合位点定位于Fc段的CH3[1 3 ] 。国外研究发现 ,肥大细胞表面表达Fas,抗Fas抗体能够诱     

门静脉高压经肾静脉自发性分流的多层CT诊断

目的：探讨肝硬化门静脉高压时经肾静脉自发分流的CT表现与诊断。方法：220例临床确诊为肝硬化门静脉高压的患者行多层螺旋CT检查，扫描参数：准直／有效层厚／重建间隔为5mm／6．5mm／2．0mm(180例)或2．5mm／3．2mm／1．6mm(40例)。双期增强扫描：动脉期延迟26～28s，门脉期延迟55～60s。对图像进行电影显示，对有异常血管的病例分别完成薄层块最大强度投影(TS-MIP)和容积显示(VR)三维血管成像。结果：经肾静脉分流26例(11．8％)，其中脾左肾静脉分流20例，胃左肾静脉分流16例(同时有此2种分流12例)，门脉右肾静脉分流2例。肾门周围静脉增多、增粗7例。结论：自发性门脉-肾静脉分流并不少见，多层螺旋CT增强扫描及血管造影可有效显示分流血管，有助于指导临床诊断和治疗。     

左侧卵巢甲状腺肿化脓性感染并右侧卵巢成熟性畸胎瘤一例报告

11　临床资料　患者 ,女 ,73岁 ,因突发性腹痛 18h于 2 0 0 3年 2月 11日入院。否认怕热、多汗、烦躁、多食、手足震颤等。查体 :体温 38.0℃、脉搏 98次 / m in、呼吸 2 0次 / min、血压10 .3k Pa/ 15 k Pa,无突眼 ,甲状腺未及肿大 ,心肺未见异常 ,中下腹肌卫 ,有明显压痛和反跳痛。血常规 :白细胞 13.0×10 9/ L、中性粒细胞 0 .90 1,腹平片见多个液平面。初步诊断为 :(1)急性弥漫性腹膜炎 ;(2 )急性肠梗阻。当天行剖腹探查术 ,术中见腹腔大量脓性液 ,吸出约 10 0 0 ml,小肠及结肠轻度扩张 ,探查肝、胆、胰、脾未及异常 ,探查盆腔见左侧…