原发性支气管肺癌合并慢性阻塞性肺疾病患者的临床研究

目的探讨原发性支气管肺癌合并慢性阻塞性肺疾病（COPD）的临床特征、肺功能特点和治疗方法,以提高两种疾病并存的诊疗效果。方法根据影像学表现和肺功能结果将365例原发性支气管肺癌患者分为COPD组和无COPD组,回顾性分析两组患者的临床特征、肺功能指标、病理分型、疾病无进展时间等,分析COPD组是否规律吸入表面糖皮质激素。结果 COPD组有227例（62.2%）,平均年龄[（66.1±9.3）岁比（54.8±5.6）岁]、男性患者（77.5%比55.8%）、吸烟者（82.4%比62.3%）、既往有呼吸系统疾病史（46.3%比30.4%）均高于无COPD组患者（P〈0.05）。两组患者的疾病分期及家族肿瘤病史均无显著差异。COPD组存在明显气道阻塞,FEV1%pred[（68.6±9.7）%比（75.3±7.5）%]和FEV1/FVC[（65.9±8.5）%比（75.6±9.1）%]均较无COPD组明显下降（P〈0.05）。COPD组以鳞癌为主要病理分型（43.2%）,明显高于无COPD组（31.2%）;小细胞肺癌分型也高于无COPD组（20.7%比15.2%,P〈0.05）。COPD组PS评分[（3.3±0.5）分比（2.8±0.4）分]、疾病无进展时间[（5.9±1.6）d比（7.5±2.1）d]均比无COPD组差（P〈0.05）。COPD组肺癌患者中仅71例在抗肿瘤治疗的同时规范按时吸入表面糖皮质激素,该部分患者的PS评分与疾病无进展时间明显优于未吸入表面糖皮质激素的患者。结论肺癌合并COPD临床上较为常见,应提高其诊治水平。建议在抗肿瘤治疗的同时规范按时吸入表面糖皮质激素,以改善患者的生活质量及预后。     

肺功能检查教学面临的问题及改革实践

肺功能检查对呼吸系统疾病的诊断和治疗有着重要的指导意义,但是其临床应用和教学水平亟待改进.本文分析了我国肺功能检查的现状,对存在的主要问题进行了详细的剖析,如对肺功能检查的临床意义认识的不足、检查中质量控制的忽视、教学课本的欠缺、教学手段和检查方法的落后、检查方法选取的疑惑及学生学习中的畏难情绪等.同时,针对这些问题提出了相应的对策,如积极进行教学改革探索与实践,通过编著出版专业教材、开发网络课件和专题学习网站、提出质量控制标准以及创新教学方法,将理论知识与临床实践紧密结合,对不同阶段（本科教育、研究生教育、医学继续教育）的人员实施针对性的教学.教学改革取得了较好的效果,专题教学网站访问量已经超过50万人次,培训教学已经在全国推广.     

空气净化器处理后牛乳β乳球蛋白的免疫反应性研究

目的 通过检测牛乳β乳球蛋白免疫反应性,分析其空间结构的变化,以探讨过敏原免疫反应性下降的可能机制.方法 分别取牛乳β乳球蛋白置于空气净化器(接受1、12、24 h的作用,实验组)、与实验组相同温度和湿度的环境(12、24 h后取样,对照组)、4 ℃冰箱(正常组)中.用ELISA法检测牛乳β乳球蛋白免疫反应性,采用圆二色谱仪和荧光光谱仪检测空气净化器处理前后的牛乳β乳球蛋白,分析牛乳β乳球蛋白空间结构的变化.结果 实验组(作用24 h)的光密度值接近0.88,相对于正常组的光密度值1.27和对照组的光密度值1.25,降低了约30%.牛乳β-乳球蛋白在空气净化器作用前后,正常组和对照组的圆二色谱光谱曲线没有发生明显的变化,而实验组处理12 h和处理24 h负峰值与正常组相比有明显的升高,并且呈现一定的递增趋势.实验组在280 nm和295 nm处的荧光强度明显强于正常组和对照组,且随着处理时间的增加强度越强.结论 经过空气净化器处理之后的牛乳β乳球蛋白免疫反应性有所降低,圆二色谱光谱实验和荧光光谱实验结果表明其空间结构发生了变化,空间结构变化可能是使其免疫反应性改变的原因.     

病毒性心肌炎差异表达蛋白MYL4的筛选鉴定及表达研究

目的:调查心肌肌球蛋白轻链4(myosin light polypeptide 4,MYL4)在病毒性心肌炎损伤中的作用?方法:随机将Balb/c小鼠分为实验组(n = 30)和对照组(n = 10),实验组用于建立柯萨奇病毒B3病毒性心肌炎小鼠模型,分别在病毒感染后第3?7?14天留取心脏及血清标本?利用差异蛋白质组学的方法鉴定了部分的病毒性心肌炎差异表达蛋白,并对其中一个分子MYL4在病毒性心肌炎发病中的作用进行研究?结果:质谱鉴定6个差异表达分子分别为:MYL4?热休克蛋白B1?异柠檬酸脱氢酶a亚单位?电压依赖的阴离子通道蛋白?蛋白酶体a亚单位1型和巨噬细胞封端蛋白?Western blot及ELISA验证发现MYL4在病毒性心肌炎小鼠心脏组织及血清中表达明显升高(P < 0.01),且ELISA结果显示MYL4的表达与疾病严重程度呈正相关(r = 0.97,P < 0.00)?结论:MYL4在病毒性心肌炎组织及血清中表达升高,参与了病毒性心肌炎的发生发展?     

JunB在实验性支气管哮喘中的作用

目的探索激活蛋白-1(Activator protein-1,AP-1)家族成员中参与构成哮喘病理生理特征的关键亚单位,为哮喘治疗提供更精确和新颖分子靶点。方法建立大鼠哮喘模型。130只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、哮喘空白组、c-Jun反义寡核苷酸(Antisense oligodeoxynucleotides,AS-ODNs)组、JunB AS-ODNs组、JunD AS-ODNs组、c-FosAS-ODNs组、FosBAS-ODNs组、Fra-1 AS-ODNs组、Fra-2 AS-ODNs组和无义寡核苷酸(Nonsense ODNs,NS-ODNs)组。实施基因沉默后,HE染色计数支气管肺泡灌洗液中嗜酸粒细胞(Eosinophils,EOS)百分比,逆转录-聚合酶链反应检测白介素(Interleukin,IL)-5mRNA表达。结果 JunBAS-ODNs组的EOS百分比[(13.39±3.72)%]显著低于哮喘空白组[(34.33±9.62)%],差异有统计学意义(P<0.001),但仍高于正常对照组[(5.61±1.76)%],差异有统计学意义(P<0.05)。其余ODNs组的EOS百分比与哮喘空白组的差异均无统计学意义(P>0.05)。与哮喘空白组比较,JunB AS-ODNs组的IL-5 mRNA表达被显著抑制[(0.5542±0.0829)vs(0.8224±0.0660),P<0.001],但亦仍高于正常对照组[(0.3237±0.0577),P<0.001]。其余ODNs组IL-5 mRNAs表达与哮喘空白组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在转录因子AP-1家族中,JunB亚单位可能决定哮喘大鼠气道慢性炎症,可能是新颖治疗靶点。     

巨噬细胞移动抑制因子siRNA对肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的:研究巨噬细胞移动抑制因子siRNA对脂多糖刺激的肺泡上皮细胞Toll样受体(TLR)及其下游信号转导通路的影响和作用机制.方法:用LPS刺激A549细胞,脂质体法分别将巨噬细胞移动抑制因子(MIF) siRNA和非特异性siRNA加入A549细胞进行干预.RTPCR法检测MIF和TLR2、TLR4 mRNA的表达,Western Blot法分析TLR下游信号转导通路元件髓样分化因子88 (MyD88)和干扰素调节因子3(IRF3)蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NF-κB核迁移,ELISA法测定细胞培养上清炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6,免疫介质IFN-β分泌水平.结果:MIF siRNA对LPS刺激诱导的MIF和TLR2、TLR4 mRNA高表达有显著的下调作用和部分阻断NF-κB(p65)核迁移.LPS刺激诱导后,MIF siRNA显著降低MyD88蛋白表达和炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平,但MIF siRNA对IRF3蛋白表达和免疫介质IFN-β分泌水平无影响.结论:MIF siRNA能抑制A549细胞的炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6过度分泌,其机制可能是MIF siRNA降低了LPS刺激A549细胞诱导的MIF和TLR2、TLR4高表达,及阻断TLR下游信号转导通路元件MyD88和NF-κB核迁移.     

香烟烟雾暴露对大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达的影响

目的 探讨香烟烟雾暴露对大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达的影响.方法 20只雌性SD大鼠,按随机数字表分为对照组和模型组,每组10只.模型组大鼠被动吸入香烟烟雾,每天2次,每次45 min;对照组大鼠不接触香烟烟雾.100d后处死动物,光镜下观察肺组织的病理形态学改变,免疫组化法检测肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Wnt3a和β-catenin蛋白表达,并测定2组大鼠支气管平滑肌厚度.结果 模型组大鼠肺组织呈现慢性炎性反应和肺气肿样改变,小气道壁及平滑肌层增厚明显.α-SMA主要表达于气道和血管的平滑肌层.模型组支气管平滑肌厚度高于对照组[ (3.06±0.62) μm比(1.86±0.43) μm,P＜0.05].Wnt3a和β-catenin主要表达于支气管上皮细胞和肺泡上皮细胞.模型组与对照组支气管上皮细胞Wnt3a蛋白表达分别为74.54±4.14、89.24±3.02;肺泡上皮细胞Wnt3a蛋白表达分别为91.97±2.50、110.46±3.85,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).模型组与对照组支气管上皮细胞胞质β-catenin蛋白表达分别为86.97±4.87、103.18±3.77;支气管上皮细胞胞核β-catenin蛋白表达分别为95.75±3.91、116.12±5.76;肺泡上皮细胞胞质β-catenin蛋白表达分别为106.24±4.57、128.81±3.96;肺泡上皮细胞胞核β-catenin蛋白表达分别为125.44±4.89、152.90±4.10,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 香烟烟雾可诱导大鼠肺组织Wnt3a和β-catenin蛋白表达上调.     

九项呼吸道联检试剂对多种呼吸道感染病原体检测的临床意义

目的 为临床提供一种快速诊断呼吸道感染病原体的方法.方法 对1318例呼吸道感染患者的血清标本应用九项呼吸道联检试剂(间接免疫荧光法)同时检测九项主要病原体的IgM抗体,包括嗜肺军团菌(LP)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IFA)、乙型流感病毒(IFB)和副流感病毒1、2和3型(PIVS).结果 非典型病原体感染率为33.3％(439/1318),其中以肺炎支原体最为多见,其次为呼吸道合胞病毒,流感病毒B、A次之;混合感染率达15.7％(207/1318);感染人群以儿童多见.结论 九项呼吸道联检试剂(间接免疫荧光法)检测快速、操作简便、准确性高,检测范围广、利于早期发现,费用不高,适合各大医院推广应用.     

人骨髓间充质干细胞对非特异性间质性肺炎患者成纤维细胞的影响

目的研究骨髓间充质干细胞（BMMSC）对非特异性间质性肺炎（NSIP）患者异常肺成纤维细胞的影响,探讨BMMSC在间质性肺纤维化的治疗机制。方法体外原代培养人BMMSC、NSIP患者的肺成纤维细胞,以及正常的肺成纤维细胞。BMMSC和正常肺成纤维细胞分别与NSIP肺成纤维细胞以Transwell孔共培养,24 h后留取上清,采用ELISA法检测上清中转化生长因子β1（TGF-β1）和干扰素诱导蛋白10（IP-10）等细胞因子水平,液相芯片技术检测上清中IL-6、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）等炎性因子水平。Transwell孔共培养48 h后提取肺成纤维细胞蛋白,Western blot检测肺成纤维细胞分泌的α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达水平。结果 NSIP肺成纤维细胞与正常肺成纤维细胞相比,能够高分泌炎性因子IL-6、IL-8和趋化因子MCP-1,高表达α-SMA。BMMSC与NSIP肺成纤维细胞以Transwell孔共培养24 h后,TGF-β1及IP-10高表达,显著下调NSIP肺成纤维细胞高水平分泌的IL-6、IL-8和MCP-1炎性因子水平,并明显下调NSIP肺成纤维细胞α-SMA的高表达。结论间充质干细胞能够下调NSIP肺成纤维细胞高水平分泌的多种炎性细胞因子,抑制NSIP肺成纤维细胞α-SMA的高表达。