人骨髓间充质干细胞对间质性肺纤维化抗损伤治疗研究

目的 研究骨髓间充质干细胞在间质性肺纤维化中的抗损伤治疗作用机制.方法 通过体外诱导的自然杀伤T细咆(NKT细胞)模拟间质性肺纤维化炎症损伤特点.以干扰素γ(IFN-γ),CD3,白介素2刺激培养外周血单个核细胞,得到含高比例CD3+ CD56+ NKT细胞,将这种培养的CD3+ CD56+ NKT细胞与人骨髓间充质干...     

人骨髓间充质干细胞对非特异性间质性肺炎患者成纤维细胞的影响

目的研究骨髓间充质干细胞（BMMSC）对非特异性间质性肺炎（NSIP）患者异常肺成纤维细胞的影响,探讨BMMSC在间质性肺纤维化的治疗机制。方法体外原代培养人BMMSC、NSIP患者的肺成纤维细胞,以及正常的肺成纤维细胞。BMMSC和正常肺成纤维细胞分别与NSIP肺成纤维细胞以Transwell孔共培养,24 h后留取上清,采用ELISA法检测上清中转化生长因子β1（TGF-β1）和干扰素诱导蛋白10（IP-10）等细胞因子水平,液相芯片技术检测上清中IL-6、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）等炎性因子水平。Transwell孔共培养48 h后提取肺成纤维细胞蛋白,Western blot检测肺成纤维细胞分泌的α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达水平。结果 NSIP肺成纤维细胞与正常肺成纤维细胞相比,能够高分泌炎性因子IL-6、IL-8和趋化因子MCP-1,高表达α-SMA。BMMSC与NSIP肺成纤维细胞以Transwell孔共培养24 h后,TGF-β1及IP-10高表达,显著下调NSIP肺成纤维细胞高水平分泌的IL-6、IL-8和MCP-1炎性因子水平,并明显下调NSIP肺成纤维细胞α-SMA的高表达。结论间充质干细胞能够下调NSIP肺成纤维细胞高水平分泌的多种炎性细胞因子,抑制NSIP肺成纤维细胞α-SMA的高表达。     

恶性血液病患者外周血CD_4~+ CD_(25)~+ FOXP3~+调节性T细胞的检测

 目的　观察恶性血液病患者在不同疾病状态下外周血CD+4 CD+25 FOXP3+调节性T细胞的水平。方法　用流式细胞术对恶性血液病患者（白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤）初治（76例）、缓解（55例）、复发（22例）、移植后发生急性移植物抗宿主病（aGVHD）时的外周血进行CD+4 CD+25 FOXP3+调节性T细胞检测,同时选用5名健康人作对照。结果　各组CD+4 CD+25 FOXP3+调节性T细胞水平分别为：健康对照组 （4.00±1.14）%,恶性血液病初治时（4.15±0.53）%,恶性血液病完全缓解时（4.72±2.12）%,恶性血液病复发时（14.21±4.13）%,移植后发生Ⅱ度以上aGVHD时（0.75±0.21）%;复发时CD+4 CD+25 FOXP3+调节性T细胞的水平明显升高,同初治及完全缓解时及健康对照组比较差异有统计学意义（P＝0.000）;移植后发生aGVHD时CD+4 CD+25 FOXP3+调节性T细胞的水平下降,同初治及完全缓解时及健康对照比较差异有统计学意义（P＝0.000）;恶性血液病初治时及完全缓解时CD+4 CD+25 FOXP3+调节性T细胞的水平同健康对照组比较差异无统计学意义;恶性血液病初治时CD+4 CD+25 FOXP3+调节性T细胞的水平同完全缓解时比较差异无统计学意义。结论　监测CD+4 CD+25 FOXP3+调节性T细胞水平对预测恶性血液病复发及移植后Ⅱ度以上的aGVHD具有意义。     

结缔组织病相关性间质性肺疾病患者外周血Th1/Th2细胞的表达

目的探讨外周血Th1/Th2及细胞因子在结缔组织病相关性间质性肺疾病的表达及意义。方法收集23例正常对照组及28例病理类型为非特异性间质性肺炎(NSIP)的结缔组织病相关性间质性肺疾病(CTD-ILD)患者的外周血单个核细胞及血浆,分别检测PBMC中Th1/Th2的比例及血浆中Th1/Th2及细胞因子的表达情况。结果与正常对照组相比,CTD-ILD患者组Th1比例明显增加,差别具有统计学意义(P=0.04)。而Th2比例明显降低(P=0.000),伴随着Th1/Th2比例的升高(P=0.001)。CTD-ILD患者TNF-α,IFN-γ细胞因子的浓度较正常对照组的血浆浓度均明显增加(P0.05)。IL-4的浓度较正常对照组的血浆浓度降低(P0.05)。结论在CTD-ILD患者体内的存在Th1/Th2平衡失调,向Th1方向偏移。     

TH17在结缔组织病相关性间质性肺病中的意义

目的探讨外周血Th17及IL-17在结缔组织病相关性间质性肺疾病的表达及意义。方法收集23例正常对照组及28例病理类型为非特异性间质性肺炎(NSIP)的结缔组织病相关性间质性肺疾病(CTD-ILD)患者的外周血单个核细胞及血浆,分别检测PBMC中Th17的比例及血浆中IL-17的表达情况,并收集入组患者肺功能指标TLC(pre/ref%)及DLco(pre/ref%)数据。结果与正常对照组相比,CTD-ILD患者组Th17比例明显增加,差别具有统计学意义(P0.05),CTD-ILD患者IL-17细胞因子的浓度较正常对照组的血浆浓度明显增加(P0.01)。但CTD-ILD患者外周血Th17及IL-17与患者肺功能指标TLC(pre/ref%)及DLco(pre/ref%)之间均无显著相关性。结论在CTD-ILD患者体内Th17及其细胞因子IL-17明显升高,可能参与疾病的发生。     

急性白血病患者T细胞亚群的变化及其与临床特征和预后的关系

目的:探讨急性白血病患者T细胞亚群的变化及其与临床特征的关系。方法:收集103例急性白血病患者起病、完全缓解、复发等不同阶段的外周血标本,使用流式细胞仪检测T细胞亚群及Treg细胞比例,分析T细胞亚群与疾病状态、预后及治疗效果的关系。结果:骨髓原始细胞大于50%的患者,CD3~+T细胞水平明显低于原始细胞小于50%的患者。白血病细胞CD34~+患者,其Treg比例明显高于CD34~-患者;对比低、中和高危3组患者预后与免疫细胞的关系发现,高危组Treg细胞较低危组明显升高; 18例患者通过连续监测细胞免疫动态发现,Treg细胞前3个疗程化疗过程逐渐升高,到第4疗程逐渐下降,至第6疗程逐渐接近正常值,且与患者临床疗效相关;急性白血病患者总体Treg水平明显高于健康对照者,而且在起病、复发时明显高于完全缓解期;急性髓细胞白血病Treg细胞上调比急性淋巴细胞白血病更加明显;首疗程化疗完全缓解(CR)组Treg细胞比例明显低于非CR组。Treg细胞大于10%的患者,首疗程完全缓解率为68. 9%。Treg细胞小于10%为85. 7%。随访发现高Treg细胞组复发率20%,低Treg细胞组复发率为7. 69%,对比6例复发患者与32例持续CR患者的Treg比例、Treg/CD4比值发现,复发组Treg比例、Treg/CD4比值明显高于完全缓解组及对照组。结论:外周血调节性T细胞水平的动态变化与急性白血病患者的临床特征、复发及预后等密切相关。     

槲皮素对U937细胞系抑制增殖和诱导凋亡作用的研究

目的探讨黄酮类化合物槲皮素(Que)对人类单核细胞白血病U937细胞系的抑制增殖和诱导凋亡的作用.方法应用MTT法检测不同浓度槲皮素对U937细胞的增殖抑制作用;AO/PI荧光染色后倒置荧光显微镜下观察细胞形态学变化;琼脂糖凝胶电泳测定细胞DNA的片段化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布.结果槲皮素能明显抑制U937细胞增殖,并存在剂量-效应关系和时间-效应关系;诱导U937细胞出现凋亡所具有的形态学和生化特征;随着槲皮素浓度升高,凋亡细胞和坏死细胞比例增加;将细胞特异性地阻滞在S期,出现凋亡峰.结论槲皮素能抑制U937细胞增殖,诱导细胞凋亡,并具有细胞周期特异性.     

口服乳酸菌对尘螨致敏小鼠脾细胞的免疫调节作用

目的探讨口服乳酸菌对尘螨致变应性气道炎症小鼠脾细胞免疫调节功能的影响。方法雌性C57BL/6小鼠分为对照组(N组),尘螨组(M组),尘螨+乳酸乳球菌组(L组)和尘螨+植物乳杆菌组(P组)。脾细胞分离培养,检测培养上清IL-4、IL-5、IFN-γ和IL-10水平(ELISA法),脾细胞增殖情况(Brd U法),流式细胞术检测分泌IL-4/IFN-γ的CD3+CD4+细胞比例。结果在基础状态下,L组和P组脾细胞合成释放IL-4、IL-5及IFN-γ水平均明显低于M组,同时IL-10生成显著增加(P<0.05),以L组更明显。螨刺激下,L组脾细胞IL-4、IL-5的释放率要明显低于M组(P<0.05),IL-10的释放率则明显高于其余3组(P<0.05);细胞增殖试验示L组与P组细胞Brd U掺入量明显低于M组(P<0.001),与N组无差异;流式细胞术显示L组和P组,分泌IL-4的CD4+细胞减少的同时(23.1%&23.7%),总CD4+细胞比例反而增高(51.6%&43.9%),以L组为明显。结论口服乳酸菌诱导了小鼠脾细胞CD4+调节性T细胞亚群的增殖,主要通过释放IL-10下调Th1/Th2细胞因子水平,进而抑制了尘螨致变应性气道炎症。