巨噬细胞移动抑制因子siRNA对肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响 |
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引用本文: | 莫红缨,江永南,黎毅敏,赖乐,肖正伦.巨噬细胞移动抑制因子siRNA对肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响[J].中国临床药理学与治疗学,2013,18(4):382-387. |
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作者姓名: | 莫红缨 江永南 黎毅敏 赖乐 肖正伦 |
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作者单位: | 1. 广州医学院第一附属医院,呼吸疾病国家重点实验室,广州 510120,广东 2. 广东食品药品职业学院,广州 510520,广东 |
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基金项目: | 广东省医学科学技术研究基金(项目编号:A2010239) |
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摘 要: | 目的:研究巨噬细胞移动抑制因子siRNA对脂多糖刺激的肺泡上皮细胞Toll样受体(TLR)及其下游信号转导通路的影响和作用机制.方法:用LPS刺激A549细胞,脂质体法分别将巨噬细胞移动抑制因子(MIF) siRNA和非特异性siRNA加入A549细胞进行干预.RTPCR法检测MIF和TLR2、TLR4 mRNA的表达,Western Blot法分析TLR下游信号转导通路元件髓样分化因子88 (MyD88)和干扰素调节因子3(IRF3)蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NF-κB核迁移,ELISA法测定细胞培养上清炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6,免疫介质IFN-β分泌水平.结果:MIF siRNA对LPS刺激诱导的MIF和TLR2、TLR4 mRNA高表达有显著的下调作用和部分阻断NF-κB(p65)核迁移.LPS刺激诱导后,MIF siRNA显著降低MyD88蛋白表达和炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平,但MIF siRNA对IRF3蛋白表达和免疫介质IFN-β分泌水平无影响.结论:MIF siRNA能抑制A549细胞的炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6过度分泌,其机制可能是MIF siRNA降低了LPS刺激A549细胞诱导的MIF和TLR2、TLR4高表达,及阻断TLR下游信号转导通路元件MyD88和NF-κB核迁移.
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关 键 词: | 巨噬细胞移动抑制因子 siRNA Toll样受体 信号通路 脂多糖 |
Effect of MIF siRNA on the expression of Toll-like receptors and down stream signaling components in A549 cells |
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Abstract: | |
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