巨噬细胞移动抑制因子siRNA对肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响

目的:研究巨噬细胞移动抑制因子siRNA对脂多糖刺激的肺泡上皮细胞Toll样受体(TLR)及其下游信号转导通路的影响和作用机制.方法:用LPS刺激A549细胞,脂质体法分别将巨噬细胞移动抑制因子(MIF) siRNA和非特异性siRNA加入A549细胞进行干预.RTPCR法检测MIF和TLR2、TLR4 mRNA的表达,Western Blot法分析TLR下游信号转导通路元件髓样分化因子88 (MyD88)和干扰素调节因子3(IRF3)蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NF-κB核迁移,ELISA法测定细胞培养上清炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6,免疫介质IFN-β分泌水平.结果:MIF siRNA对LPS刺激诱导的MIF和TLR2、TLR4 mRNA高表达有显著的下调作用和部分阻断NF-κB(p65)核迁移.LPS刺激诱导后,MIF siRNA显著降低MyD88蛋白表达和炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平,但MIF siRNA对IRF3蛋白表达和免疫介质IFN-β分泌水平无影响.结论:MIF siRNA能抑制A549细胞的炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6过度分泌,其机制可能是MIF siRNA降低了LPS刺激A549细胞诱导的MIF和TLR2、TLR4高表达,及阻断TLR下游信号转导通路元件MyD88和NF-κB核迁移.     

银杏酮酯口服自微乳化给药系统的制备

研究制备银杏酮酯口服自微乳化给药系统。采用平衡溶解度方法筛选乳化剂与助乳化剂; 采用伪三元相图法制备微乳; 采用正交法优化处方组成; 并考察自微乳化制剂的乳化效率、溶出度、稳定性与药动学研究等。结果表明, 由肉豆蔻酸异丙酯IPM、聚氧乙烯蓖麻油Cremophor EL、丙二醇与银杏酮酯组成的自微乳化给药系统遇水可自发形成粒径为20～50 nm的稳定微乳。自微乳化给药系统的乳化效率与溶出快, 且制剂稳定性高, 能提高生物利用度。制备的银杏酮酯口服自微乳化给药系统稳定有效。     

高效液相色谱法测定复方氨酚烷胺片中人工牛黄的胆红素含量

目的建立HPLC法测定复方氨酚烷胺片中人工牛黄的含量。方法色谱柱:C18柱(4.6mm×260mm),流动相:甲醇-氯仿-0.1%磷酸(88∶6∶6),流速:1.0mL.min-1,检测波长449nm,柱温30℃,进样量20μL。结果在6.61μg.mL-1~52.88μg.mL-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。回归方程Y=9.907X-16.43,r=0.9976。平均回收率为99.6%(n=9)。结论本法简便快速,定量准确,可用于复方氨酚烷胺片中人工牛黄的含量测定。     

维通注射剂主要成分的优化配比研究

目的 寻找维通注射剂两种主要成分的最佳配比进行组方,为开发出高效、低毒的防治术后粘连药物提供实验依据.方法 利用权重配方法进行分组,采用噻唑蓝(MTT)比色法寻找最佳配比.结果 主要成分D和Q按9:2配伍,可显著抑制成纤维细胞生长,两药有协同或相加作用.结论 两药最佳配伍比例为9∶2.     

丹参对粘连腹膜成纤维细胞增殖的影响

目的:研究丹参对粘连腹膜成纤维细胞增殖、迁移、坏死及胶原合成的影响,为术后粘连的中药治疗提供理论依据。方法:应用MTT法检测丹参对粘连成纤维细胞增殖的影响;羟脯氨酸碱水解法测定对胶原合成的影响;测定培养上清乳酸脱氢酶活性,反映对细胞坏死的影响;细胞划痕实验观察对细胞迁移的影响。结果:MTT比色法显示丹参对成纤维细胞的增殖有不同程度的抑制,在4~128μg/mL范围内呈剂量依赖性抑制作用;检测羟脯氨酸的含量,丹参剂量在24、48、96μg/mL时与对照组比较无显著性差异;96μg/mL的丹参培养液LDH活性显著增加,而24、48μg/mL的丹参培养液与对照组比较,LDH活性无显著性改变;对照组和48μg/L丹参组的细胞迁移率分别为(19.7+1.6)%和(7.6+1.6)%,丹参可显著抑制细胞迁移。结论:丹参能抑制粘连腹膜成纤维细胞增殖和迁移,降低成纤维细胞活性,但是对胶原合成无影响。     

高效液相色谱法测定胞磷胆碱钠胶囊的含量

目的建立HPLC法测定胞磷胆碱钠胶囊的含量。方法选用Elite Hypersil ODS C18柱（4．6mm×260mm,5μm）,流动相为磷酸盐缓冲液[0．1mol·L^-1的磷酸二氢钾溶液和四丁铵溶液（取0．1mol·L^-1四丁基氢氧化铵溶液用磷酸调节pH值至4．5）等量混合]-甲醇（95：5））,流速1．0mL·min^-1。检测波长276nm．柱温35℃,进样量：10μL。结果在2μL-18μL进样量范围内与峰面积呈良好的线性关系。回归方程A=3．104×10^7C-983．9,r=0．9999,平均回收率为99．7％（n=9）。结论 本法可用于测定胞磷胆碱钠胶囊的含量。     

体外扩散池法评价银杏酮酯磷脂复合物体外透过性能研究

目的 用体外扩散池法评价银杏酮酯制备成磷脂复合物后经大鼠肠透过性能的变化.方法 选取大鼠不同区段肠包括十二指肠、空肠、回肠和结肠,用体外扩散池法选出银杏酮酯透过性能的最佳区段肠后,再对银杏酮酯原料、银杏酮酯磷脂复合物和杏灵颗粒在最佳区段肠中进行透过性能的比较,用高效液相色谱法测定银杏酮酯中的黄酮醇苷在接收池中的累积透过量,表观渗透系数（Papp）作为指标评价银杏酮酯制备成磷脂复合物后的肠透过性能的变化.结果 银杏酮酯在十二指肠中的透过性最好,其次是空肠,由于一般药物在十二指肠停留的时间较短,所以选择空肠作为最佳区段肠,对银杏酮酯原料和银杏酮酯磷脂复合物的透过性能进行比较,结果银杏酮酯磷脂复合物的表观渗透系数高于银杏酮酯原料和杏灵颗粒.结论 用体外扩散池法对其初步评价,银杏酮酯原料制备成磷脂复合物后,体外肠透过性能比银杏酮酯原料和杏灵颗粒有显著提高,为提高体内生物利用度提供了有利依据.