氟马替尼与伊马替尼治疗初发慢性髓性白血病慢性期患者的有效性及严重血液学不良反应发生率比较

目的比较氟马替尼与伊马替尼治疗初发慢性髓性白血病(CML)慢性期患者的治疗反应、结局以及严重血液学不良反应发生率。方法回顾性收集来自国内76个中心自2006年1月至2022年11月期间确诊、年龄≥18岁、确诊后6个月内接受氟马替尼或伊马替尼作为一线治疗且临床资料相对完整的CML慢性期病例。通过倾向性评分匹配(PSM)减少一线酪氨酸激酶抑制剂(TKI)药物选择偏倚, 比较两种TKI的治疗反应及结局。结果研究最终纳入4 833例接受伊马替尼(4 380例)和氟马替尼(453例)作为一线治疗的成人CML慢性期患者。伊马替尼治疗组中位随访54(IQR:31～85)个月, 7年完全细胞遗传学反应(CCyR)、主要分子学反应(MMR)、分子学反应4(MR4)和分子学反应4.5(MR4.5)累积获得率分别为95.2%、88.4%、78.3%和63.0%。7年无治疗失败生存(FFS)率、无进展生存(PFS)率和总生存(OS)率分别为71.8%、93.0%和96.9%。氟马替尼治疗组中位随访18(IQR:13～25)个月, 2年CCyR、MMR、MR4和MR4.5累积获得率分别为95.4%、86.5%、...     

235例急性髓系白血病患者血浆游离DNAFLT3-ITD的检测及临床意义

本研究检测急性髓系白血病（AML）患者外周血血浆游离DNAFLT3内部串联重复序列（internal tandem duplication,ITD）并探讨其临床意义。提取235例AML患者血浆游离DNA并以PCR扩增看家基因globin作为判定标准,通过PCR方法检测FLT3－ITD,并与骨髓或外周血白血病细胞DNA检测结果进行比较。结果表明：235例AML患者中,190例患者血浆游离DNA扩增出globin基因。188倒初诊、复发或难治患者中,血浆游离DNA发生FL33—1TD突变35例（19％,35／188）,与病人白血病细胞DNA检测结果完全一致。47例临床缓解患者中,有2例血浆游离DNA扩增出globin基因并检出FLT3－ITD突变,而其细胞来源DNA均为阴性。2例患者均早期复发。与FLT3－野生型（wt）相比,FLT3－ITD突变患者白细胞计数、CD7、CD56表达等明显升高,CR率降低。结论：AML患者血浆中可以检测出白血病细胞特异性的血浆游离DNA,与直接检测白血病细胞结果一致。对骨髓缓解期病人残留白血病（MRD）的检测,血浆游离DNA具有更高的敏感性。FLT3－ITD的检测对AML患者的预后及疗效判断有重要意义。     

PTEN siRNA对多发性骨髓瘤细胞周期和侵袭力的影响及其分子机制

目的 探讨PTEN基因对RPMI8226细胞增殖、细胞周期和侵袭力的影响及其分子作用机制.方法 应用PTEN siRNA转染RPMI8226细胞,封闭内源性PTEN mRNA表达.MTT法检测细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡;Transwell小室实验检测细胞侵袭活性;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测mRNA水平变化,Western印迹检测蛋白水平变化.结果 PTEN siRNA能明显抑制RPMI8226细胞PTEN mRNA及蛋白表达.MTT结果显示,转染后4d,与NS-siRNA组相比,PTEN-siRNA组细胞生存率为(141.55±8.34)％(P＜0.01).细胞周期分析显示PTEN-siRNA转染RPMI8226细胞48 h后,与未转染细胞相比,处于G0/G1期细胞比例升高,G2/M期和S期细胞比例降低,凋亡峰显示凋亡的细胞比例减少.PTEN-siRNA转染RPMI8226细胞后24h,未转染组、NS-siRNA转染组和PTEN-siRNA转染组黏附于下室面的细胞数量分别为:49.33±7.63、47.17 ±7.76和79.50±11.89,NS-siRNA和PTEN-siRNA组相比,差异显著(P＜0.01).转染PTEN siRNA后凋亡相关基因Survivin mRNA及蛋白表达水平增加,Caspase-3/-7 mRNA及蛋白活性表达水平减低.FAK mRNA MMP-2,MMP-9 mRNA p-FAK蛋白表达水平升高.结论 转染PTEN siRNA能够促进RPMI8226细胞增殖及侵袭能力,抑制细胞凋亡.     

血清外泌体miR-451a在弥漫大B细胞淋巴瘤治疗监测中的意义

目的 探索血清外泌体miR-451a在弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma, DLBCL）中的水平及其在治疗监测中的价值。方法 本研究共纳入56例DLBCL患者，56例健康对照者。收集新发DLBCL患者治疗前、化疗2~4疗程及化疗结束后血清样本，并同时收集健康人血液标本， 提取血清中的外泌体RNA，并进行实时荧光定量PCR（quantitative real time polymerase chain reaction, qRT-PCR），用受试者工作特征（receive operator characteristic, ROC）曲线判定miR-451a的诊断效能，用各时点收集的血清样本动态分析血清外泌体miR-451a水平与化疗效果之间的关系。结果 56例DLBCL患者与56例健康对照者相比，DLBCL患者血清外泌体miR-451a水平下降（P<0.000 1），在两组受试者间用miR-451a诊断DLBCL的曲线下面积(AUC)为0.737（95%CI0.645~0.816）。在随访到的43例DLBCL患者中，化疗后获得完全缓解或者部分缓解的患者其血清外泌体miR-451a水平较化疗前有所上升（P<0.05），与配对的健康人水平差异无统计学意义（P>0.05）；化疗后未获得缓解的患者，其血清外泌体miR-451a水平较化疗前无明显变化（P>0.05），且仍然低于配对的健康人水平（P<0.05）；化疗完成后在未缓解者与缓解者之间进行鉴别，血清miR-451a的AUC为0.867（95%CI0.728~0.951）。结论 血清外泌体miR-451a水平动态监测有助于DLBCL化疗过程中的疗效（是否缓解）判断。     

妊娠晚期乙二胺四乙酸依赖性假性血小板减少一例的识别与诊治

目的 提高对乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)依赖性假性血小板减少(EDTA-PTCP)的认识.方法 对1例申请会诊的妊娠晚期EDTA-PTCP的诊治经过进行回顾性分析.结果 本例因妊娠晚期羊膜早破,查血小板5×109/L申请会诊.经问诊与查体,未发现出血病史和体征.后采用肝素抗凝血手工进行血小板计数70×109/L,自动计数仪血小板计数34×109/L,两者差异推测可能与肝素引起了部分血小板聚集有关,诊断为EDTA-PTCP.患者剖宫产术中与术后均无明显出血.结论 临床上应将EDTA-PTCP作为血小板减少的重要鉴别项目之一,以免造成误诊误治.     

Frank-Starling心脏定律的证明方法探讨

本文目的在于探讨Frank-Starling心脏定律的科学证明方法。认为证明某一理论的真实性应该包括理论证明(引用科学概念的定义、公理和定律等去判断它的真实性)和实验证明两个方面。理论证明必须首先完成,然后才是设计合理的实验以证明该理论的真实性。理论证明和科学实验的关系是:二者均能否定错误理论,但任何实验结果都不能否定正确的理论证明。众所周知,生命现象有其独特的生物学规律,但它也服从有关的物理学、化学和数学等表达的一般物质的运动规律,因此,心脏作功遵守低级物质的运动形态规律。Frank-Starling定律对心脏搏动作功规律的表达是:心脏收缩释放的能量(作功)是心肌纤维初长度/心室舒张末期容积的函数。显然,该理论对心脏作功规律的表达没有包含收缩时心肌纤维长度的变化情况(例如,没有表达心室收缩末期容积的变化),如此表达心脏作功的规律,不符合物理学中关于作功的定义:Frank-Starling心脏定律不是一个真实的定律。既然理论证明已经十分清楚地显示了Frank-Starling心脏定律是错误的,那么,否定它,只须阐明为什么根据Frank和Starling的实验结果不能推导得出Frank-Star-ling心脏定律理论的理由而不一定再需要做出否定它的实验证明。     

三氧化二砷联合佛波酯抑制急性早幼粒细胞白血病细胞系Kasumi-1增殖的实验研究

目的:研究三氧化二砷(As2_O_3)联合佛波酯(PMA)对急性早幼粒细胞白血病细胞系Kasumi-1增殖的影响。方法:培养急性早幼粒细胞白血病细胞系Kasumi-1并随机分为对照组(不含药物和血清的RPMI1640培养基处理)、As2_O_3组(含有20μmol/L As2_O_3的无血清RPMI1640培养基处理)、PMA组(含有160nmol/L PMA的无血清RPMI1640培养基处理)、As2_O_3+PMA组(含有20μmol/L As2_O_3和160nmol/LPMA的无血清RPMI1640培养基处理)。处理后测定细胞的增殖活力、细胞周期的比例以及相关基因的蛋白表达量。结果:干预后12、24、48h时,As2_O_3组、PMA组、As2_O_3+PMA组的细胞增殖活力均显著低于对照组,As2_O_3+PMA组的细胞增殖活力均显著As2_O_3组、PMA组;干预后48h时,As2_O_3组、PMA组、As2_O_3+PMA组中G1期、S期的比例以及CDK1、CyclinB1的表达量均显著低于对照组,G2期的比例以及Bax、Caspase-3、Caspase-9、p-Chk1、p-Cdc25C9的表达量均显著高于对照组;As2_O_3+PMA组中G1期、S期的比例以及CDK1、CyclinB1的表达量均显著低于As2_O_3组、PMA组,G2期的比例以及Bax、Caspase-3、Caspase-9、p-Chk1、p-Cdc25C的表达量均显著高于As2_O_3组、PMA组。结论:As2_O_3联合PMA能够通过诱导细胞凋亡、阻碍细胞周期的方式抑制急性早幼粒细胞白血病细胞系Kasumi-1的增殖。     

4种丹参酮类化合物对U266细胞增殖的抑制作用及机制

目的 研究丹参酮ⅡA(TAⅡA)、丹参酮Ⅰ(TAⅠ)、隐丹参酮(CTA)及二氢丹参酮Ⅰ(DIA Ⅰ)对U266细胞的增殖抑制作用及其可能的机制.方法 采用CCK法检测4种丹参酮类化合物对U266细胞的增殖抑制率,用Annexin-V-FITC/PI检测细胞的凋亡,用PI法检测细胞周期;收集多发性骨髓瘤患者的骨髓标本,分离培养间充质干细胞(MSCs),用流式细胞仪检测4种丹参酮类化合物对MSCs分泌白介素6(IL-6)的影响.结果 4种丹参酮类化合物对U266细胞的增殖均有抑制作用;DIA Ⅰ较其余3种化合物的作用更强,引起细胞早期凋亡较多,细胞周期被阻滞在S期;DIAⅠ能明显抑制IL-6的分泌,其余3种化合物对IL-6的分泌作用无统计学意义.结论 DIA Ⅰ能明显抑制多发性骨髓细胞株U266的增殖,其抑制作用可能是通过抑制MSCs分泌IL-6而实现的.     

M蛋白阳性患者314例体液免疫特征分析

[目的]分析314例血清蛋白电泳M蛋白阳性患者血尿免疫学特征及其相关性。[方法]对华西医院门诊及住院患者采用琼脂糖凝胶电泳法作血清蛋白电泳检测,检出M蛋白带的患者,再作免疫球蛋白G、A、M、血轻链Kappa(κ)、Lambda(λ)和Kappa/Lambda(κ/λ)比值、尿游离轻链Kappa(κ)、Lambda(λ)检测,用免疫固定电泳鉴定M蛋白类型,采用t检验、配对秩和检验和相关分析比较其血尿蛋白免疫学特征及其相关性。[结果]3156例血清蛋白电泳筛检出M蛋白阳性314例,其中IgG型所占比例最大(66.6%)。血清蛋白电泳后,IgG和IgM型M带主要分布于γ区,较少分布在α2和β区;IgA型M带主要分布在γ区,其次分布在β区,较少分布在α2区。IgG、IgA、IgM型患者对应Ig的血清浓度均显著升高(P﹤0.01),IgG和IgA型患者的非对应Ig血清浓度明显低于正常(P﹤0.01),IgM型患者的IgG浓度明显低于正常(P﹤0.01),而IgA浓度略有降低但并不显著。M蛋白类型对应轻链的血清浓度均显著增高(P﹤0.01),非对应轻链均在正常范围内;各类型患者血清κ/λ值均明显异常。以免疫固定电泳的结果作为参考,观察各指标检测M蛋白的能力,其敏感性依次为血清κ/λ98.1%,血清Ig97.1%,血清轻链96.2%,尿轻链78.1%。[结论]应用免疫固定电泳结合血清蛋白电泳及免疫球蛋白定量等方法可以比较敏感地检测出M蛋白,并对其进行分类、分型,为临床诊断和治疗提供重要依据。     

恶性血液病患者侵袭性真菌感染GM和BG抗原检测的价值

目的 评价半乳甘露聚糖(GM)抗原和(1→3)-β-D葡聚糖(BG)抗原检测对恶性血液病患者侵袭性真菌感染(IFI)的诊断价值以及两种方法在监测抗真菌治疗效果中的作用.方法 51例恶性血液病患者当体温超过38 ℃,持续48 h以上,经广谱抗生素治疗无效,或起初有效但体温下降后再次升高时被纳入本研究.第1周采集患者静脉血2次,以后每周采血1次,至少监测4周.分别采用ELISA法和比色法检测患者血清GM和BG值.GM实验阳性定义为连续两次不同时点检测GM值＞0.5或单次＞0.8,G实验阳性定义为BG值＞80 pg/ml.患者分为确诊、临床诊断、拟诊及非真菌感染四组,21名正常志愿者作为对照.结果 51例患者共收集240份血清标本.其中确诊IFI2例,临床诊断26例,拟诊17例,非真菌感染6例.以确诊及临床诊断为真阳性组,以非真菌感染为真阴性组.GM实验在真阳性组28例中21例阳性,真阴性组6例中1例阳性,敏感性75%,特异性83.3%,阳性预测值95.5%,阴性预测值41.7%;G实验在真阳性组28例中全部阳性,真阴性组6例中4例阳性,敏感性100%,特异性33.3%,阳性预测值87.5%,阴性预测值100%.G实验的敏感性高于GM实验,差异有统计学意义(P=0.015);但特异性差异无统计学意义(P=0.242).GM实验阳性的21例患者中抗真菌治疗有效19例,GM值渐转阴性,2例无效的患者GM值持续阳性,有效组GM平均值两周后明显低于无效组,差异有统计学意义(P＜0.05);G实验阳性的患者中治疗有效者BG值逐渐下降,但未转阴;治疗无效组BG值变化无规律,总体呈上升趋势,但各时间点BG值监测对疗效无明显判断意义.结论 血清GM和BG抗原检测可以为早期诊断IFI提供有力证据,联合检测BG和GM两种抗原,可提高对曲霉菌诊断的特异性,减少假阳性.治疗中监测GM和BG值的动态变化,GM实验用于评价疗效的价值优于G实验.

Abstract：

Objective To evaluate the diagnostic value of serum galactomannan antigen (GM)and (1→3)-β-D-glucan antigen(BG) assay in invasive fungal infections( IFI ) in the patients with hematologic malignancies and the role in monitoring therapeutic response. Methods Fifty one patients with hematological malignancies met the criteria for inclusion: ①body temperature above 38 ℃ for 48 hours, ②failure to respond to broad-spectrum antibiotic treatment, or ③temperature rose again after the responded drop. Blood samples were collected twice at the first week, then once a week in at least four weeks. The double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay( EL1SA )and colorimetric assay were used for detecting GM and BG. The positive GM test is defined as two consecutive tests at different time GM value ＞ 0.5 or ＞ 0. 8 and the positive G test is defined as BG value ＞ 80 pg/ml. The patients were assigned into four groups as proven,probable, possible, and non-fungal infection respectively, and 21 normal volunteers were as controls. Results Two hundred and forty serum samples were collected from 51 patients including 2 of proven IFI, 26 probable IFI, 17 possible IFI and 6 non-fungal infection. The true-positive group including the proven and probable groups, and true negative group was the non-fungal infection group. GM tests were positive in 21 of 28 cases in true positive group, and only one of 6 cases in non-fungal infection. The sensitivity, specificity,positive predictive value and negative predictive value were 75%, 83.3%, 95.5% and 41.7%, respectively. G tests were positive in all 28 cases of the true positive group, and 4 in 6 non-fungal infection cases. The sensitivity, specificity, positive predictive value and negative predictive value were 100%, 33.3%, 87.5% and 100%, respectively. G test is more sensitive than GM test ( P = 0.015 ), but there was no significant difference in specificity of the two tests (P =0.242). In 19 of 21 patients with GM test positive, anti-fungal treatment was effective, and GM value gradually decreased to negative, two invalid patients were persistent with GM test positive. After two weeks treatment, the average GM value was significantly lower in the effective group than in the ineffective group (P ＜ 0.05 ). BG values in the responded patients showed a gradual decline similar to that of GM values, but not to negative. The changes of BG value in ineffective group varied with a trend upward. The changes in BG value had no relation with treatment effectiveness. Conclusions Serum GM and BG antigens detection provides strong evidence for early diagnosis of IFI. Combination of GM and G tests can improve the diagnostic specificity and reduce the false positive GM test seems superior to G test for monitoring GM and BG values during treatment.