亚洲牛带绦虫钙调神经磷酸酶B基因的原核表达和免疫学分析

【目的】对亚洲牛带绦虫钙调神经磷酸酶B基因（CaN）进行克隆、表达和免疫学初步研究。【方法】将亚洲牛带绦虫成虫钙调神经磷酸酶B基因克隆到原核表达质粒pET-30a（＋）中,在大肠杆菌BL-21／DE3中用诱导表达,表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）进行鉴定,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱进行纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析。【结果】PCR、双酶切及DNA测序结果均表明重组质粒pET-30a（＋）-TaCaN构建成功。SDS—PAGE结果表明目的基因能在大肠杆菌BL．21／DE3中表达,经亲和层析得到了纯化重组蛋白。重组蛋白能被感染了亚洲牛带绦虫的猪和患者的血清识别。[结论]亚洲牛带绦虫成虫钙调神经磷酸酶B基因可在原核表达系统中获得具有免疫学活性的表达。为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。     

同步多频听觉稳态诱发反应在小儿听力诊断中的应用

目的　探讨同步多频听觉稳态诱发反应在小儿听力诊断中的应用。方法　39例受试者,年龄6个月～5岁,平均2.75岁,男21例,女18例。分别进行同步多频听觉稳态诱发反应和小儿行为听力测试。同步多频听觉稳态诱发反应刺激声信号的载波频率为0.5 kHz 、1 kHz 、2 kHz及4kHz。双耳上述各个频率分别以70～100 Hz不同的调制频率进行调幅调制。测试时,双耳八个(每耳四个)声信号经ER-3A插入式耳机同步给出。测试状态为水合氯醛镇静睡眠。小儿行为听力测试中,6～24月龄小儿行视觉强化定向条件反应测听、25月龄～5岁行游戏测听。所有数据以SPSS统计软件分析。结果　①小儿行为听阈通常比同步多频听觉稳态诱发反应阈低,在0.5kHz、1kHz 、2kHz及4kHz二者差异的平均值及标准差分别为:15.2±9.1dB、8.8 ±7.5dB、8.2±7.7dB、10.7±8.8dB。各个频率之间这一差异存在统计学意义(F =10.395;μ 3 ;P=0.000),进一步的两两比较显示0.5 kHz行为听阈与反应阈的差异高于其它频率;②小儿行为听阈与同步多频听觉稳态诱发反应阈在各个频率均呈显著相关(P =0.000)。Pearson相关系数分别为0.799,0.859,0.894,0.850。结论　同步多频听觉稳态诱发反应测试具有频率特异性、客观及与行为听阈相关性好的特点,可以作为无法配合行为听力测试的小     

高糖条件下大鼠下颌骨成骨细胞的活性

背景：临床研究证实,糖尿病是引起牙周病变及牙槽骨丧失的危险因素,而糖尿病所致的高血糖对颌骨改变的影响机制目前仍未完全阐明。 目的：观察高糖对体外培养的下颌骨成骨细胞增殖、分化、矿化的影响。 方法：分离培养大鼠下颌骨成骨细胞,分别在生理糖浓度(5.5 mmol/L;对照组)和高糖条件下(16.5 mmol/L;高糖组)培养,采用MTT法、PNPP法、生化法、放射免疫法及茜素红S钙染法检测各组细胞的增殖能力、碱性磷酸酶活性、钙吸收、骨钙素分泌水平及矿化能力。 结果与结论：高浓度的葡萄糖能显著促进成骨细胞的增殖(P < 0.05),降低成骨细胞骨钙素的分泌(P < 0.01),增加钙结节的数量及面积(P < 0.01)。与对照组比较,高糖组成骨细胞碱性磷酸酶活性在21 d时显著增高(P < 0.01),钙吸收在14~21 d时显著降低,而在21~28 d时显著增高(P < 0.01)。说明高糖能促进体外培养的大鼠下颌骨成骨细胞的增殖,延迟其分化和矿化。     

电针环跳穴对腰椎间盘突出症坐骨神经损伤修复的实验研究

目的:观察电针环跳穴对腰椎间盘突出症(LIDP)家兔坐骨神经(SN)潜伏期和神经传导速度的影响,揭示电针环跳穴对LIDP家兔的损伤修复机制。方法:40只家兔随机分为空白组、模型组、环跳组和非穴组,采用自制的LIDP动物病理模型造模器建立家兔LIDP病理模型,用BL-410电生理系统测定家兔SN潜伏期和神经传导速度(NCV)。结果:各组治疗前后SN潜伏期和神经传导速度比较,环跳组治疗后SN的潜伏期显著低于治疗前(P0.01),而神经传导速度却显著高于治疗前(P0.01)。各组治疗前后SN潜伏期和神经传导速度差值组间比较,环跳组SN潜伏期和神经传导速度差值均显著高于空白组、模型组与非穴组(P0.01)。结论:电针环跳穴可使腰椎间盘突出症家兔SN的潜伏期缩短,神经传导速度有所增快。     

化疗对卵巢功能的损害及其对策的研究进展

<正>化疗是临床上治疗免疫性疾病、血液病和肿瘤的重要手段之一,疗效确切。但由于卵巢暴露于必需的化疗而使卵巢功能遭到不同程度损害,严重影响女性患者生存质量。据报道,64%成年女性患者经历化疗后至少出现一项卵巢功能衰竭的症状[1]。因此,如何评估化疗对卵巢功能的损害并寻求其对策成为近年的研究热点,现将近年相关研究综述如下。     

1-磷酸-神经鞘氨醇干预化疗对荷瘤小鼠卵巢功能和抑瘤效果的影响

摘要：目的探讨凋亡抑制因子−1-磷酸-神经鞘氨醇（S1P）对环磷酰胺（CTX）联合顺铂(DDP)诱导的S180荷瘤小鼠卵巢功能损
害的干预作用及其对肿瘤化疗效果的影响。方法将52只C57BL/6雌性小鼠随机选取10只作为空白对照组,余皮下接种S180
肿瘤细胞后随机分为3组,即荷瘤对照组、单纯化疗组、S1P+化疗组,每组14只。用药期间动态观察动情周期及肿瘤体积变化,
于用药前、用药第11天左右的动情间期分批处死小鼠,分别称取体质量、卵巢质量及肿瘤质量;采用酶联免疫吸附（ELISA）法动
态检测用药前后各组小鼠血清的卵泡刺激素( FSH)、黄体生成素( LH) 及雌二醇（E2）水平的变化;卵巢组织连续病理切片,计算
原始卵泡、生长卵泡数量的变化。每组剩余小鼠与成年雄性小鼠合笼,观察生育情况。结果（1）血清基础性激素水平：给药前,
各组血清FSH、LH 、E2水平无显著性差异(P>0.05);用药第11天左右,单纯化疗组血清FSH水平明显高于其余3组、E2水平明显
低于其余3组,其差异均有显著性意义（P<0.01）,但血清LH水平各组间无显著性差异(P>0.05);S1P+化疗组血清FSH、LH 、E2
水平与两对照组均无显著性差异(P>0.05);（2）卵泡数量及卵巢质量：用药第11天左右,单纯化疗组原始卵泡数和卵巢质量明显
低于其余3组（P<0.01）,其生长卵泡数亦明显低于空白对照组、荷瘤对照组（P<0.01）,但与S1P+化疗组的差别无显著性意义(P>
0.05)。S1P+化疗组原始卵泡数、生长卵泡数及卵巢质量与空白对照组、荷瘤对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);（3）肿瘤
质量和抑瘤率：给药第11天左右,与荷瘤对照组比较,单纯化疗组、S1P+化疗组的皮下肿瘤体积增长速度均受到明显抑制,两组
的肿瘤质量与荷瘤对照组相比均有显著性差异（P<0.01）,且两组的抑瘤率均高于60%。结论S1P可以在不影响肿瘤化疗效果
的同时,预防化疗对小鼠卵巢功能的损害。
     

锚定钉在颈椎后路单开门手术中临床应用效果分析

目的：研讨锚定钉（规格为直径2mm,长度为10mm）,在后路单开门脊髓型颈椎病手术中的具体效果。方法：应用用颈椎后路单开门手术治疗脊髓型颈椎病的病例总数25例,他们都接受颈椎后路单开门椎管扩大术的治疗,开门的节段数均为C3～C7,全是应用直径2mm,长度10mm的锚定钉进行固定。结果：手术时间65～105min平均75 min.术中出血总量为100～400mL,平均200mL,无并发症。2例患者术接受了相应的对症处理2个月后疼痛症状消失。术后随访0.5～2.5 a,平均1.9a,末次随访时JOA评分10～16分,平均13.8±1.4分,与术前比较差异有统计学意义（P〈0.01）,平均改善率为（68.1±7.5）%,优良率为88%。X线片检查显示颈椎曲度基本正常或有不同程度恢复,椎体中矢状径与椎管中矢状径比值平均为1比1.2,锚钉无松动、没有出现颈椎不稳及再关门。结论：在颈椎单开门椎管扩大术治疗脊髓型颈椎病时应用直径2mm,长度10mm的锚定钉固定开窗椎板方法简单可靠,手术时间短,对颈部肌肉,椎体周围小关节及软组织的破坏小,出血少,临床效果满意。     

乳腺癌中拓扑异构酶Ⅱ的表达与临床病理因素及C-erbB-2的相关性

目的分析拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在乳腺癌组织中的表达情况,探讨其与临床病理因素以及C-erbB-2表达的相关性。方法回顾性分析145例乳腺癌组织中TopoⅡ表达情况,探讨其与临床病理因素以及C-erbB-2表达的相关性。结果乳腺癌患者TopoⅡ和C-erbB-2的表达呈显著正相关(P=0.002);TopoⅡ蛋白表达与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型、临床分期和淋巴结转移均无关。结论乳腺癌患者TopoⅡ和C-erbB-2的表达存在相关性,联合检测TopoⅡ和C-erbB-2蛋白表达对指导乳腺癌的化疗有重要的理论意义,可作为判断预后的参考指标。     

高糖条件下大鼠下颌骨成骨细胞的活性

背景:临床研究证实,糖尿病是引起牙周病变及牙槽骨丧失的危险因素,而糖尿病所致的高血糖对颌骨改变的影响机制目前仍未完全阐明.目的:观察高糖对体外培养的下颌骨成骨细胞增殖、分化、矿化的影响.方法:分离培养大鼠下颌骨成骨细胞,分别在生理糖浓度(5.5 mmol/L;对照组)和高糖条件下(16.5 mmol/L;高糖组)培养,采用MTT法、PNPP法、生化法、放射免疫法及茜素红S钙染法检测各组细胞的增殖能力、碱性磷酸酶活性、钙吸收、骨钙素分泌水平及矿化能力.结果与结论:高浓度的葡萄糖能显著促进成骨细胞的增殖(P＜0.05),降低成骨细胞骨钙素的分泌(P＜0.01),增加钙结节的数量及面积(P＜0.01).与对照组比较,高糖组成骨细胞碱性磷酸酶活性在21 d时显著增高(P＜0.01),钙吸收在14～21 d时显著降低,而在21～28d时显著增高(P＜0.01).说明高糖能促进体外培养的大鼠下颌骨成骨细胞的增殖,延迟其分化和矿化.     

lncRNA NUP50-AS1 在食管鳞癌组织中的表达及其对Eca109 细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）NUP50-AS1 在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancer, ESCC）组织及细胞株中的表达及其对人食管癌Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法：选取自2015 年1 月至2016 年12 月河北医科大学第四医院生物标本库的49 例ESCC手术患者的癌组织和相应癌旁组织,qRT-PCR检测ESCC癌组织、癌旁组织及5 种食管癌细胞株（TE1、TE13、Eca109、Kyse150 和Kyse170）中NUP50-AS1 表达水平。shRNA 转染NUP50-AS1 后,选用sh2 -NUP50-AS1 进行后续功能实验。采用MTS法、克隆形成实验检测敲减NUP50-AS1 表达对Eca109 细胞增殖的影响,划痕实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞迁移的影响,Transwell 小室实验检测敲减NUP50-AS1 表达对细胞侵袭的影响。结果：NUP50-AS1 在ESCC组织中的相对表达量显著高于癌旁组织(2.003±0.870 vs 1.000±0.000,P<0.05）;NUP50-AS1 在ESCC组织中的表达水平与淋巴结转移及TNM分期相关（均P<0.01）,NUP50-AS1 在5 株食管癌细胞系中相对表达量均明显上调（P<0.05）,其中Eca109 细胞的NUP50-AS1 表达水平最高。转染后,sh2-NUP50-AS1 转染组干扰效率最高,敲低NUP50-AS1 可明显抑制Eca109 细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论：ESCC组织中lncRNA NUP50-AS1 表达明显高于癌旁组织,且与癌症分期和淋巴结转移有关,敲减其表达明显抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力,NUP50-AS1 的高表达可能与ESCC的发生发展密切相关。