γ-谷氨酰移换酶同工酶对肝癌早期诊断价值的实验研究

本文以2-FAA喂饲Wistar大鼠制作肝癌模型．对膜结合γ-谷氨酰移换酶(GGT)及其同工酶在癌变过程中的早期改变进行了研究；经组织学及酶组织化学定位证实，在诱癌过程中肝细胞过度表达GGT并分泌入血．正常对照组鼠肝组织及血清GGT活性分别为0．34±0．23U／g蛋白和6．0±4．8U／L；诱癌后鼠肝组织GGT增加3～25倍，而鼠血清GGT增加3～6倍，实验组肝及血清GGT均明显高于对照组(P<0．01)。实验鼠2周时，异常增加的GGT便以多种分子形式在血或肝组织中同步出现，与胎肝GGT的形式相同。其结果提示．鼠肝癌发生过程中所表达的GGT具有癌胚性质，对异常区带的分析有助于肝癌的早期诊断。     

sICAM-1和GPC-3 mRNA对肝癌诊断与转移监测的临床价值

目的:定量分析肝病患者血可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)浓度和外周血单核细胞磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)mRNA,探讨对肝癌(HCC)诊断与预后的价值.方法:收集住院肝病患者外周血,分离单核细胞,制备总RNA,经逆转录合成GPC-3cDNA,以荧光定量PCR扩增;并以酶联免疫吸附法(ELISA)定量分析血ICAM-1水平.结果:肝病发展过程中血ICAM-1表达呈梯度增加,HCC患者血ICAM-1表达显著高于肝硬化(t=3.184,P=0.002)和慢性肝炎患者(t=3.962,P<0.001),与伴门脉癌栓(t=2.941,P=0.005)及肝外转移(t=3.282,P=0.002)明显相关,与患者年龄、性别、HBsAg阳性与否、AFP浓度及肿瘤大小间未见明显相关.GPC-3mRNA阳性仅见肝癌患者(70.9%);肝硬化、慢性肝炎患者及正常对照组中未检出(2=26.773,P<0.001).GPC-3mRNA阳性表达与HBsAg阳性(2=14.601,P<0.001)、肝癌TNM分期(2=17.732,P<0.001)、伴门脉癌栓及肝外转移(2=22.271,P<0.001)显著相关,与瘤体直径、数目、AFP浓度及分化程度未见明显相关;两者可互补诊断,提高诊断肝癌阳性率.结论:sICAM-1和GPC-3mRNA检测是肝癌诊断和转移监测的良好标志物,且对AFP阴性肝癌具有互补诊断价值.     

肝癌γ—谷氨酰移换酶的研究进展

自从Orlowski 等应用淀粉胶电泳发现原发性肝癌患者血清中存在着肝癌特异性γ-谷氨酰移换酶(GGT,EC2.3.2.2)及Fiala 等首先提出GGT 作为肝癌的重要标志物后,引起了临床研究的极大兴趣.多位学者业已证明:在肝细胞癌的酶学诊断中,以糖蛋白GGT 肝癌特异区带(I',Ⅱ和Ⅱ')的出现最有临     

微柱层析检测高分子碱性磷酸酶

本文采用自制小柱Sephacryl S-300凝胶过滤法把血清碱性磷酸酶分为高分子和低分子两个部份,并建立了定量高分子碱性磷酸酶的检测方法。对高分子碱性磷酸酶分离的最适条件、电泳及层析特性、分子量、米氏常数等方面进行了研究。该法检测临床标本发现高分子碱性磷酸酶主要存在于阻塞性黄疸的血清中,该项试验对部份肝病的诊断与鉴别诊断具有较大临床价值。     

Bax基因在紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡过程中作用的研究

目的:观察bax基因在紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡过程中的表达。方法:将不同浓度的紫杉醇作用于HL-60细胞,用RT-PCR法检测药物孵育前后bax基因的表达水平。结果:在紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡过程中bax基因的表达水平上升,并显示剂量效应。结论:bax基因参与紫杉醇诱导HL-60细胞凋亡的基因调控。     

血浆转化生长因子-β1对原发性肝细胞癌诊断的临床价值研究

目的 :探讨血浆转化生长因子 - β1(TGF- β1)对原发性肝细胞癌 (PHC)的诊断价值。方法 :用酶链免疫吸附试验法 (EL ISA)测定 PHC38例、其他各种肝病和消化道非肝肿瘤 6 4例及正常对照者 2 0例的血浆 TGF- β1水平 ,并以放射免疫法检测了 38例 PHC患者血清甲胎蛋白 (AFP)浓度。结果 :PHC组血浆 TGF-β1水平显著高于正常对照及其他各肝病组 (P<0 .0 5 )。血浆 TGF- β1的界限值定为 1.2 μg· L- 1时 ,其诊断 PHC的灵敏性和特异性分别为 89.5 %和 94 .0 % ;与血清 AFP浓度、肿块大小均无相关性 ,与 AFP联合检测可提高 PHC诊断阳性率 ,达 97.4 %。结论 :血浆 TGF- β1表达水平有助于 PHC诊断 ,与 AFP联合检测具有互补诊断价值     

平衡超滤法中应用1,6-二磷酸果糖对炎症因子的影响

目的：观察平衡超滤法及1，6-二磷酸果糖（FDP）对CPB中炎性介质的影响。方法；心瓣膜置换术36例随机分成对照组、平衡超滤（BUF）组及BUF＋FDP组。在CPB开始、CPB30nim、CPB结束和术后2h抽血检测肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素8（IL-8）的浓度。结果：对照组各类炎性介质的浓度随转流时间的延长不断上升（P〈0．01）；BUF组各时点各炎症介质的浓度的增高有抑制作用．与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05～0．01）；BUF＋FDP组个时点炎性介质的浓度变化不明显，CPB结束、术后2h炎性介质的浓度与BUF组比较明显减少（P〈0．05-0．01）。结论：平衡超滤法能降低CPB时体内炎性反应，在等量回输的林格氏液中加入FDP能进一步减少机体炎性反应。     

动脉粥样硬化大鼠血管组织内皮素转换酶1的表达

目的:观察内皮素转换酶1(endothelin-converting enzyme-1,ECE-1)在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)大鼠中的表达情况,探讨AS可能的内皮发生机制.方法:雄性SD大鼠,随机分为正常组和AS组(n=8);AS组大鼠以高脂饮食方法建立AS模型,正常组大鼠正常饮食.免疫组织化学法、RT-PCR分别分析两组动脉组织中ECE-1蛋白及mRNA表达;提取动脉血管膜蛋白,以内皮素前体作为底物与一定量的组织膜蛋白进行酶解反应,放射免疫法测定酶解产物ET-1的含量,观察组织ECE-1的体外活性;放射免疫法比较两组大鼠血浆中ET-1的含量.结果:正常组大鼠的血管内皮细胞和中膜平滑肌细胞(SMC)中有ECE-1微弱表达(8.58±0.92),阳性染色常位于细胞膜和胞质内;AS组大鼠的血管内皮细胞和内膜SMC中ECE-1表达显著增高(19.12±0.37,P＜0.01).AS组大鼠血管组织ECE-1 mRNA表达(2.04±0.18)明显高于正常组(0.83±0.01,P＜0.01);AS组大鼠血管组织ECE-1体外活性高于正常组[(22.47±1.49)vs(18.89±1.55)Pg/ml,P＜0.05];AS组大鼠血浆ET-1值明显高于正常组(79.42 vs 32.25 pg/ml,P＜0.01).结论:大鼠血管组织ECE-1异常表达可能通过提高血浆ET-1含量促进AS的发生发展.     

肝癌组织热休克蛋白 gp96 异常表达及其临床病理学特征

目的分析热休克蛋白（HSP）gp96在人肝细胞性肝癌（HCC）及非癌组织中的表达，并探讨其与肿瘤发生、发展及预后的关系。方法采用免疫组织化学方法分别检测30例HCC癌灶组织及其自身对照的非癌组织HSPgp96的表达，并以生物素标记的HBVDNA探针检测肝癌组织中HBVDNA，分析HSPgp96表达与HBV复制及其临床病理学特征的关系。结果无论是原发性肝癌还是转移性肝癌，HSPgp96均呈较高表达；HSPgp96在肝癌灶及非癌组织表达阳性率分别为73．3％和46．7％（P〈0．05）。HCC的癌灶组织中HSPgp96阳性表达与肿瘤分化程度及肿瘤大小显著相关（P〈0．05），而与肿瘤数目无关（P〉0．05）。HBVDNA阳性肝癌组织中HSPgp96表达显著高于HBVDNA阴性组。结论HSPgp96在HCC中过度表达，且与HCC的分化程度和大小有关，可作为肝癌早期诊断及预后判断的标志。     

TTV与HBV混合感染的研究

目的：探讨输血传播病毒（TTV）与HBV混合感染对HBV复制的影响。方法：应用微板核酸杂交-ELISA法检测175例HBV患者血清中的TTV-DNA，ELISA法进行乙型肝炎相关病毒标志物检测。结果：175例HBV患者中TTV-DNA阳性30例（17．1％），其中无症状携带者、慢性肝炎、活动性肝硬化、原发性肝癌患者中的TTV-DNA检出率分别为3／21（14．3％）、13／76（17．1％）、8／50（16．0％）、6／28（21．4％），各组间差异无统计学意义。在慢性肝炎、活动性肝硬化、原发性肝癌患者中，TTV-DNA阳性组与阴性组各项肝功能指标改变相似。HBV和TTV混合感染组中HBeAg和抗-HBcIgM阳性率低于单纯HBV感染组（P〈0．01和P〈0．05），而血清抗-HBe阳性率则高于单纯HBV感染组（P〈0．01）。结论：TTV的混合感染似乎并不影响HBV所致的肝脏病变程度，对HBV的复制可能有一定的抑制作用。