肝细胞核因子-κB异常激活与肝细胞癌变

核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）是具有和某些基因上启动子区固定核苷酸序列结合而启动该基因转录的蛋白质。NF-κB是具有多向性调节作用的核转录因子，可调控多种基因（免疫、炎症反应、病毒和原癌基因）的转录表达。激活的NF-κB参与癌症的启动、发生及发展过程，在炎症性相关的肝癌（HCC）发生发展中呈高表达，在肝细胞炎症与癌变间起桥梁作用，其中包括肝脏免疫炎症反应相关基因、肝炎病毒相关基因和原癌基因的转录表达。在肝癌组织中异常激活，可抑制细胞凋亡，促进肝细胞存活，与肝癌的发生发展密切相关。     

γ谷氨酰移换酶肝癌特异性区带定量检测的临床意义

γ谷氨酰移换酶肝癌特异性区带定量检测的临床意义黄中伟，姚登福，孟宪镛，葛政举，肖明兵，黄介飞，陈澎周为弥补甲胎蛋白（ＡＦＰ）假阴性、假阳性之不足，我们对７谷氨酰移换酶同工酶ＩＩ（ＧＧＴＩＩ）进行了近１０年的系列研究，但均为定性研究［ＡｍＪＧａｓｔｒｏ...     

多种分子形式芳香基酰胺酶的分离及其临床应用

对肝病患者血清芳香基酰胺酶（ＡＡＤ）的不同分子形式进行了分离和定量研究，发现在正常人、急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者中可分出ＡＡＤ３种组分，肝癌患者除出现这３种组分外，还可见亚组分出现。ＡＡＤ谱型正常人以ＡＡＤ－１为主；急性肝炎、慢性肝炎和肝硬化患者ＡＡＤ－１减少，ＡＡＤ－２和ＡＡＤ－３增加；肝癌患者则ＡＡＤ－１明显减少，ＡＡＤ－３显著升高。显示ＡＡＤ谱型分析有助于肝病的诊断或鉴别诊断。     

蛋白质组学及蛋白质芯片在肿瘤研究中的应用前景

肿瘤是由环境和遗传因素相互作用的多基因、多蛋白质参与的疾病，研究主要集中在肿瘤相关基因的克隆和功能分析、信号传导通路以及细胞周期调控等三大领域。蛋白质是生命活动的执行者和体现者，研究不同时期、不同条件下细胞内蛋白质的变化，具有重要价值。蛋白质组学（proteomics）和蛋白质芯片技术，可全面、动态、定量地分析比较正常与癌变标本中蛋白质种类和数量的改变，不仅有助于肿瘤发病机制的阐明，还能筛选和鉴定蛋白质特异性标记和特异性抗原，在肿瘤的早期诊断、治疗和新药研制方面，具有广阔的应用前景。     

紫杉醇诱导HL—60细胞凋亡的研究

目的：观察抗微管药紫杉醇对急性白血病细胞株HL－60是否具有凋亡诱导作用,并进一步研究bcl－2基因在此过程中的作用。方法：（1）以紫杉醇处理HL－60细胞,观察细胞生长抑制作用的时间效应和剂量效应,在光镜和电镜下观察细胞形态变化;（2）用流式细胞仪检测药物孵育前后细胞凋亡率（AP）的变化;（3）用RT－PCR法检测药物孵育前后bcl-2基因的表达水平。结果：（1）在一定剂量和时间范围内紫杉醇能抑制HL－60细胞生长;（2）紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡,并显示剂量效应：（3）在紫杉醇诱导HL－609细胞凋亡过程中,bcl－2基因表达水平下调。结论：紫杉醇能诱导HL－60细胞凋亡;bcl-2基因参与了紫杉醇诱导HL－60细胞凋亡的调控。     

尿素酶比活性定量分析对HP感染的诊断价值

目的 :建立幽门螺杆菌 (HP)尿素酶比活性定量分析法 ,探讨该法对慢性胃病 HP感染的诊断价值。方法 :将患者胃粘膜处理后分别检测 HP尿素酶活性 ,将定量分析法与定性方法 (粘膜涂片革蓝氏染色 ,1min尿素酶试验 ,PCR法和组织学切片 HE染色法 )进行比较。结果 :HP尿素酶比活性平均值在慢性浅表性胃炎 (CSG)慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃溃疡 (GU)、十二指肠球部溃疡 (DU)、胃癌 (GC)组分别为 2 80 .2、389.5、342 .7、832 .0、347.5 (u/ dl) ,患者各组的比活性均明显高于正常对照组 (9.1u/ dl,P<0 .0 0 1)。该法定量检测 HP:(1)敏感性为 94.0 % ,接近于 PCR法和尿素酶法 ,而高于涂片法和组织学法。(2 )特异法为 91.1% ,与尿素酶法、涂片法和组织学法相近 ,略高于 PCR法。结论 :本研究资料提示胃粘膜 HP尿素酶比活性定量分析有助 HP感染的诊断更适用于科研及治疗后的动态观察     

放射诱导胃癌细胞的凋亡及其相关基因的研究

目的观察放射诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的作用，并进一步研究bcl-2基因及家族、bax基因、p53基因在此过程中的作用。方法用不同剂量的9 MeV β线照射SGC-7901细胞，观察细胞在受照后的不同时间生长情况。电子透射电镜下观察细胞形态变化。琼脂糖凝胶电泳检测DNA条带变化。流式细胞仪检测受照前后细胞周期及凋亡率的变化。免疫细胞化学法检测受照前后bcl-2、bax、p53基因的表达水平。结果单次剂量照射后，SGC-7901细胞凋亡率与时间、剂量有相关性。在放射诱导SGC-7901细胞凋亡的过程中，bcl-2基因表达水平下降，bax基因表达水平升高，而p53基因表达水平无变化。结论放射能够诱导胃癌细胞株SGC-7901凋亡，凋亡率在72h达高峰。bcl-2及bax基因参与了放射诱导凋亡的调控。细胞凋亡主要是通过p53基因非依赖途径。     

乙型肝炎病毒前C基因区变异与乙肝病毒复制关系的临床研究

目的探讨乙型肝炎病毒（Hepatitis B Virus,HBV）前C基因区变异与HBV-DNA载量的关系。方法通过DNA扩增、基因序列分析检测21例慢性肝炎、18例肝硬化和15例肝癌血清的HBV前C区和基本核心启动子（Basic Core Promoter,BCP）基因序列,荧光定量聚合酶链反应技术定量检测血清中的HBV-DNA。结果野生株与前C区终止变异、BCP双变异以及联合变异组HBV-DNA载量测定差异无显著性（P〉0.05）;BCP双变异HBV-DNA载量HBeAg（-）组显著高于HBeAg（＋）组（P〉0.05）。结论前C区终止变异和BCP双变异对HBV DNA复制无明显影响。HBeAg（-）的慢性肝病患者BCP变异后HBV DNA复制明显活跃。     

下调GPC-3转录经Wnt/β-catenin通路对肝细胞癌生长的抑制作用

目的研究干预磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(glypican-3, GPC-3)活化经Wnt/β-catenin通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的抑制作用。方法将miRNA干扰质粒转染GPC-3高表达的HepG2和Hep3B细胞,以CCK-8法检测细胞增殖,平板法分析克隆形成,以流式细胞术分析细胞周期;以裸鼠移植瘤模型观察成瘤时间、体积、生长曲线;以免疫组化法和免疫印迹法分析GPC-3及Wnt/β-catenin通路关键分子β-catenin、p-GSK3β及Cyclin D1的变化。结果特异性miRNA成功转染HepG2和Hep3B细胞后,体外研究显示HCC细胞增殖受到抑制、克隆形成明显降低和发生G_1期阻滞,差异有显著统计学意义(P0.01),β-catenin及p-GSK3β显著降低(P0.01);体内研究显示,移植瘤成瘤时间延长(t=12.89,P0.01)、瘤体小(t=15.29,P0.01);瘤内GPC-3表达明显下降(t=6.67,P0.01)、相关信号分子β-catenin(t=9.61,P0.01)、p-GSK3β(t=4.81,P0.01)及Cyclin D1(t=5.90,P0.01)表达均显著下调。结论干预GPC-3活化经Wnt/β-catenin通路抑制HCC细胞增殖和生长,提示GPC-3为HCC治疗的潜在靶目标。