非霍奇金淋巴瘤中p53基因mRNA的表达

目的　探索研究非霍奇金淋巴瘤中 p5 3mRNA的表达与突变型p5 3蛋白和临床病理的相关性。 方法　采用原位杂交和ABC法。结果　在 4 8例各型非霍奇金淋巴瘤中 p5 3mRNA有不同程度的表达 ,检出率为5 8.3 % ,突变型 p5 3蛋白染色阳性率 4 1.7% ;在突变型p5 3蛋白阳性组中 p5 3mRNA的检出率为 80 .0 % ,显著高于突变型 p5 3蛋白阴性组 ( 4 2 .8% ) (P <0 .0 5 )。 结论　在非霍奇金淋巴瘤中存在 p5 3基因突变 ,产生了突变型p5 3mRNA ,提示后者的表达增强可能是导致突变型 p5 3蛋白表达增强的主要原因之一。     

大鼠肝纤维化模型中基质金属蛋白酶-2及其抑制物的表达

目的了解基质金属蛋白酶－２（ＭＭＰ－２）及其组织型抑制剂（ＴＩＭＰ－２）在纤维化过程中的变化,分析它们在始动阶段的作用。方法用免疫组化和酶图法,在异种血清诱导的大鼠肝纤维化模型不同阶段,作肝细胞内ＭＭＰ－２、ＴＩＭＰ－２、酶降解底物Ⅳ型胶原（ＣｏｌⅣ）以及结蛋白（Ｄｍ）定位和半定量研究。结果实验鼠于４周末形成细胞间隔,８周末发展为肝纤维化,含细胞－纤维间隔或纤维间隔,１２、１６周仍为纤维间隔。酶图法表明４周末ＭＭＰ－２活性升高２．５倍左右,８周末仍高于对照鼠。免疫组化显示４周末ＭＭＰ－２阳性细胞数最多,连续切片观察ＭＭＰ－２与Ｄｍ阳性细胞（活化的肝星状细胞）几乎重叠。８周末阳性细胞数有所减少,１２周末明显减少。半定量变化趋势与酶图法一致。ＴＩＭＰ－２于８周末表达开始升高,１２周末达最高。２周末ＣｏｌⅣ表达开始上升,４周末达高峰,以后缓慢下降。结论肝纤维化早期ＭＭＰ－２活性增高,继而ＴＩＭＰ－２分泌过多,ＭＭＰ－２活性受抑,ＥＣＭ降解受阻,纤维化进一步发展。     

PAI-2ΔCD突变体的构建及其在大肠杆菌中的表达与纯化

目的构建ＰＡＩ－２ΔＣＤ突变体基因,实现在大肠杆菌中的表达并建立重组人ＰＡＩ－２ΔＣＤ的分离纯化方法。方法用ＰＣＲ扩增ＰＡＩ－２ΔＣＤ基因,经限制性内切酶片段分析及核苷酸序列分析后,突变体基因与原核表达载体ｐＬＹ－４重组并转化蛋白酶缺陷型菌株ＪＦ１１２５。经温度诱导表达,表达产物用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法和纤溶抑制活性测定等方法鉴定。工程菌发酵后,经高压匀浆破菌,用离子交换、疏水性色谱和分子筛进行分离。结果经温度诱导表达,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ证实在相应相对分子质量处出现表达条带,约占全菌总蛋白的１５％。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实表达产物具有ＰＡＩ－２免疫原性,溶圈抑制法及翻转板法证实表达产物具有纤溶抑制活性。５Ｌ发酵菌液可得湿菌约１００ｇ,经多步纯化后,每升发酵菌液可得纯度达９７％的ＰＡＩ－２ΔＣＤ约３６ｍｇ,比活性为２８６４０ＡＩＵ／ｍｇ。结论成功构建了ＰＡＩ－２ΔＣＤ突变体,实现了在大肠杆菌中的表达,并成功地分离纯化了重组人ＰＡＩ－２ΔＣＤ蛋白。     

三氧化二砷诱导K562细胞凋亡的初步研究

目的：探讨三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３） 治疗慢性粒细胞性白血病（ＣＭＬ） 的机制。方法：以ＣＭＬ细胞系Ｋ５６２ 为模型,通过细胞增殖、活力检测、形态学观察、肿瘤集落形成的琼脂糖凝胶电泳等检验。结果：经≥２．５μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 处理的Ｋ５６２ 细胞可出现增殖受抑和凋亡的形态学改变及ＤＮＡ片段化。结论：Ａｓ２Ｏ３ 能有效地诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡。     

147Pm诱导血红细胞系对60Coγ射线辐射的适应性反应

目的　研究低剂量１４７Ｐｍ 内照射能否改变相继高剂量６０Ｃｏγ射线引起的ＲＢＣ 损伤的适应性效应。方法　应用外周血ＲＢＣ计数、网织红细胞（ＲＣ）计数、正常染红细胞（ＮＣＥ） 微核和嗜多染红细胞（ＰＣＥ） 微核检测,观察低剂量１４７Ｐｍ 内污染诱导小鼠ＲＢＣ系统的适应性反应。结果　剂量为２ ．０Ｇｙ 的６０Ｃｏ γ射线外照射可引起明显的血ＲＢＣ 系统损伤,与正常对照组比较,ＲＢＣ和ＲＣ计数显著降低（ Ｐ＜ ０．０１） ;ＮＣＥ和ＰＣＥ微核细胞率明显增高（Ｐ＜ ０．０１） 。预先用０．３７、３ ．７ 和３７Ｂｑ／ｇ 体重的１４７Ｐｍ 内污染预处理动物,３ 天后再予２．０Ｇｙ 的高剂量６０Ｃｏ γ射线外照射,ＲＢＣ和ＲＣ计数则显著增高,ＮＣＥ和ＰＣＥ微核细胞率显著降低,与单纯高剂量６０Ｃｏ γ射线外照射组比较有非常显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）;并且某些指标与正常对照组比较已无显著性差异（ Ｐ＞ ０．０５） 。结论　预先用低剂量１４７Ｐｍ β射线内照射动物, 可诱导血ＲＢＣ 系统的放射适应性反应,使血ＲＢＣ系统对相继高剂量６０Ｃｏ γ射线外照射引起的损伤效应有了明显的抵抗力。提示外周血ＲＢＣ 系统可作为低剂量辐射细胞生物效应的观察指标之一     

纳络酮用于改善小鼠学习记忆障碍的研究

采用口服氯化铝建立小鼠学习记忆障碍模型,应用跳台法观察了纳络酮对铝(Al)中毒所致小鼠学习记忆障碍的改善作用,用火焰原子吸收分光光度法测定血锌(Zn)、铜(Cu)、锰(Mn)等含量.结果显示,氯化铝可导致小鼠学习记忆障碍,且有降低血Zn、Cu含量的作用(P<0.05);纳络酮治疗有改善Al中毒小鼠学习记忆障碍的作用,同时也增加了血Zn、Cu的含量.     

节段内固定治疗腰椎峡部裂的生物力学研究

在8具成人新鲜腰椎标本上,通过脊柱三维运动实验机,研究了横突棘突钢丝捆绑法、钩螺钉固定法及Buck螺钉固定法对峡部裂腰椎三维稳定性的影响。实验结果表明：三者均能显著地恢复脊柱的稳定性,且三者之间无显著差别。     

p53、c-myc基因蛋白产物及增殖细胞核抗原在肝细胞癌中的同步检测

目的为弄清Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因和细胞增殖活性与肝细胞癌（ＨＣＣ）发生发展的关系。方法应用免疫组化方法检测了３０例肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中Ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因蛋白产物以及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达。结果Ｐ５３,ｃ－ｍｙｃ基因表达率分别为４６．７％和５６７％。ｐ５３在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肝癌组织的表达率有递增趋势;而ｃ－ｎｌｙＣ基因在三级间的表达率却无明显区别。ｐ５３与ｃ－ｍｙｃ基因的同时表达率为２３３％。ＰＣＮＡ阳性细胞的分布在ＨＣＣ中呈四种类型：散在型、边缘型、镶嵌型和弥漫型。ＰＣＮＡ标记指数与ＨＣＣ的分级相关。ｐ５３阳性的ＨＣＣ中ＰＣＮＡＬＩ为５３．８±２４．３,阴性的为３３．１±１５．７（Ｐ＜０．０５）;ｃ－ｍｐｃ基因表达阳性与阴性的ＰＣＮＡＬＩ分别为３８、７±２２．９、４２．８±２１．６（Ｐ＞０．０５）。结论ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ基因均与ＨＣＣ的发生、发展有关,但两者之间无依存关系;伴有ｐ５３基因突变的ＨＣＣ中癌细胞增生活跃,恶性程度高。     

双腔起搏器对缓慢性心律失常并心力衰竭病人血流动力学的影响

目的评估双腔起搏器对缓慢性心律失常并心力衰竭病人血流动力学的影响。方法对20例缓慢性心律失常心衰病人经锁骨下静脉植人DDD型起搏器,对比分析术前及术后1～2周X线胸片、放射性核素门控心室显影和超声心动图检查结果。结果所有患者临床症状及心功能明显改善,术后心胸比例、射血分数（EF）、心排血量（CO）、心脏指数（CI）均明显好转［分别为0．70±0．13vs0．61±0．12、0．29±0．09vs0．38±0．10、2．30±0．81vs3．34±0．75（L／min）、1.31±0．71vs1．98±0．49（L／min·m2）,P＜0.05或P＜0．01］。结论DDD起搏器治疗能显著改善缓慢性心律失常心力衰竭病人的血流动力学,可作为治疗缓慢性心律失常并心力衰竭的有效方法之一。     

Apolipoprotein Serum Amyloid A in Alzheimer's Disease

Alzheimer's disease is characterized by the tissue deposition of beta-amyloid peptide (Abeta) in the brain. Recent studies have shown apoproteins (apo) in amyloid plaques and associated with high-density lipoprotein (HDL) particles in the cerebrospinal fluid (CSF). Western blot analysis revealed that serum amyloid A (apoSAA) protein was present in control and AD patients at low levels compared to apoE and apoA-I, however, AD brains showed a significant increase over control values. Analysis of CSF-HDL from control and AD individuals showed that apoA-I, apoE and apoSAA were on the particle. Immuno-cytochemical analysis showed that SAA was detected in senile plaques in AD tissue, but was predominantly localized to neuritic plaques. ApoE staining of AD brain confirmed that most plaques contained the apoprotein, similar to Abeta immunoreactivity, whereas apoA-I expressed little staining of senile plaques. No significant differences were detected in the level of apoSAA when compared to APOE genotype in AD samples, suggesting that interactions with apoE were non-specific. These data imply that the specific interactions of SAA with Abeta in the neuritic plaques may play a role in AD.