双酚A对大鼠背根神经节神经元钙离子通道电流影响

目的探讨双酚A对大鼠背根神经节(DRG)神经元钙离子通道影响。方法 SD大鼠,周龄4～6周,采用酶消化法急性分离大鼠背根神经节神经元,分别采用全细胞膜片钳技术和激光共聚焦技术记录钙电流和KCl激发钙瞬变的变化。结果双酚A(0.1、1、10、100μmol/L)呈浓度依赖性抑制大鼠背根神经节神经元钙电流,对钙通道的半数最大抑制浓度(IC50)为11.41μmol/L;10μmol/L双酚A显著改变Ca2+通道的激活特性,电流激活曲线去极化方向移动(P<0.05),该浓度双酚A同样可以抑制50 mmol/L KCL激发瞬时胞内钙浓度增加。结论双酚A对大鼠背根神经节神经元钙离子通道具有抑制作用。     

围产期双酚A暴露对子代海马组织APP､Tau表达的影响

目的:观察F0代孕鼠围产期不同时期双酚A(bisphenol A,BPA)暴露对子代小鼠海马中淀粉样蛋白前体(amyloid precursor protein,APP)?微管相关蛋白(microtubule-associated protein,Tau)?磷酸化的Tau蛋白(p-Tau)的影响,探讨雌雄小鼠胎儿发育阶段BPA暴露的敏感期?方法:利用C57BL/6J胎鼠原代培养的海马神经元共孵BPA;F0代小鼠围产期皮下注射建立BPA暴露小鼠模型,根据不同暴露期分为4组,即对照组?胎儿期(P6-PND0)?哺乳期(PND0-PND21)?胎儿期和哺乳期联合暴露(P6-PND21),取其成年子代海马组织(8月龄)通过Western blot方法检测APP?Tau及p-Tau的表达量?结果:海马神经元细胞与不同浓度BPA共孵后,APP?Tau及p-Tau的表达均上调,呈剂量依赖性?BPA连续暴露后的子代小鼠中,雌性小鼠PND0-PND21组?P6-PND21组海马组织中APP?Tau及p-Tau表达增加,而雄性小鼠仅P6-PND21组3种蛋白的表达上调?结论:围产期BPA连续暴露可引起子代小鼠海马APP?Tau及p-Tau表达改变,从而可能引起神经损伤,而雌性小鼠相较于雄性小鼠可能对BPA引起的神经损伤更敏感?     

小鼠粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流特性及氰戊菊酯对它的影响

[目的] 建立小鼠粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流膜片箝记录方法,并观察拟除虫菊酯类杀虫剂氰戊菊酯的作用.[方法] 应用膜片箝技术,全细胞方式下记录小鼠粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流,并用各种特异的通道阻断剂和激动剂确定电流特性,与体细胞T型Ca2+通道电流比较;通过胞外给药,观察氰戊菊酯对T型Ca2+通道电流影响.[结果] 当以Cs+、TEA+阻断K+电流,记录到一-60 mV激活,-20～-30 mV达到最大值的内向电流,该电流呈快速激活快速失活.加入Na+通道阻断剂TTX,对记录的内向电流无影响,表明该内向电流不含有Na+电流成分,是由Ca2+通道开放产生.另该电流对L型Ca2+通道激动剂BayK 8644不敏感,但对Cd2+、Nifedipine两种Ca2+通道阻断剂较敏感,提示其为T型Ca2+通道电流.与体细胞典型T型Ca2+通道比较,粗线期精母细胞T型Ca2+通道有自身特点.研究氰戊菊酯对记录的T型Ca2+通道电流的作用显示50 μM*L-1氰戊菊酯在加入后3～5min开始抑制T型Ca2+通道电流,于9～10 min达到最大抑制作用,并有明显的剂量-反应关系.[结论] 小鼠粗线期精母细胞主要存在T型Ca2+通道,而不含有L型Ca2+通道,但与典型T型Ca2+通道电流比较,精母细胞的T型Ca2+通道电流又有许多不同之处,如较特异的T型Ca2+通道阻断剂miberadil只有在较高浓度下,才显示抑制作用.相反,其对二氢吡啶类化合物(DHP)较敏感.氰戊菊酯对粗线期精母细胞T型Ca2+通道电流的抑制作用提示,作为农业生产中一种广泛使用的杀虫剂,应重视它对男性生殖健康的影响.     

吸收性明胶海绵和止血绫在家兔肌肉、血管与脑组织中吸收性观察

对吸收性明胶海绵和止血绫进行了局部埋藏吸收性和刺激毒性观察。22只家兔的颈静脉、背阔肌、硬脑膜部位埋藏药物，术后8wk内分批观察。结果显示明胶海绵吸收速度较慢，对组织有一定的刺激毒性，尤其电镜超微结构病理检查显示对血管的损伤较明显。止血绫吸收速度快于明胶海绵，刺激毒性较小。     

铅对胎鼠脑细胞钙摄取的影响及L型钙通道对抗剂作用

目的：观察铅对体外培养神经细胞静息状态＾４５Ｃａ摄取法去极化后钙内流的影响。方法：培养的胎鼠神经细胞，通过铅和钙通道激民对抗剂处理后，用β－液体闪烁计数器测量神经细胞中放射性＾４５Ｃａ的摄取速度。结果：低浓度铅对神经细胞＾４５Ｃａ摄取有抑制作用，但对神经细胞在静息时＾４５Ｃａ摄取的速度无明显影响，去极化晚加明显，并可分别被Ｌ型钙通道激动剂ＢａｙＫ８６４４所增强，对抗剂尼群地平所阻抑。结论：铅通过电     

炔戊菊脂及其二氯衍生物毒性、诱变性与结构的关系

炔戊菊脂及其二氯衍生物为拟除虫菊酯类杀虫剂,两者化学结构相似。毒性试验两者皆有神经系统症状,如肌颤、抽搐及惊跳反应增强等。炔戊菊脂小鼠吸入4小时LC_(50)>20.00mg/l,经口LD_(50)5280～7940mg/kg,二氯衍生物2小时LC_(50)6.37mg/-l,LD_(50)68.1mg/kg。诱变性检测微核试验两者皆为阴性。Ames 试验炔戊菊脂在高剂量时TA_(100)/-S_g为阳性,而二氯衍生物则为阴性。本文表明炔戊菊脂类的毒性症状、LD_(50)、诱变性皆与化学结构有密切关系,如菊酸中的二甲基被二氯取代后则毒性升高,Ames 试验可能为阴性。     

氯戊菊酯的毒性和诱变性研究

氯戊菊酯(二氯炔戊菊酯)为拟除虫菊酯类中的新型杀虫剂,主要用于卫生害虫,目前有关其毒性资料尚未见公开报道,作者对该产品进行了毒性和诱变性研究.1.毒性实验氯戊菊酯对小鼠经口的 LD_(50),雌雄两性皆为68.1毫克/公斤,95%可信限为58.4     

脱氧鬼臼毒素对美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系

目的 研究脱氧鬼臼毒素(deoxypodophyllotoxin,DOP)对美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位的影响及其与钠通道的关系.方法 分别用终浓度为1、5、25、125μmol/L的DOP作用于荧光染料DiBAC4(3)标记的美洲大蠊背侧不成对中间神经元,在激光共聚焦显微镜上检测神经元膜电位的实时动态变化,并观察钠通道阻断剂河豚毒素(tetrodotoxin,TTX)对DOP膜电位效应的影响.结果 加入DOP后美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位呈去极化改变,5 min后达到最大水平,8 min内趋于稳定.1、5、25、125 μmol/L的DOP作用5 min后,所测得的荧光强度值分别为69.6±3.0、72.1±2.7、77.8±3.6、86.2±3.1,DOP处理组和空白对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.01).1μmol/L TTX与美洲大蠊背侧不成对中间神经元共孵育20 min后再加入25 μmol/L DOP,神经元内荧光强度与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),说明钠通道是DOP的作用靶标,DOP的膜电位效应可被TFX完全抑制.结论 DOP可引起美洲大蠊背侧不成对中间神经元膜电位去极化,且其效应在1～125 μmol/L范围内随浓度增加而增大,钠通道可能参与了这一过程.     

钙通道阻滞剂对大鼠坐骨神经嵌压性损伤早期c-fos表达及神经病理变化的影响

目的探讨钙通道阻滞剂（CCB）对大鼠坐骨神经嵌压性损伤早期c-fos表达及神经病理变化的影响。方法将288只大鼠随机均分为对照组（A组）、生理盐水组（B组）、氟桂利嗪低剂量组（C1组）与高剂量组（C2组）各72只,制作坐骨神经嵌压性损害模型后0、5、15、30 m in,以及1、2、4、24 h时,取其坐骨神经、背根神经节（DRG）,采用RT-PCR、病理学等方法测定各时时间点的c-fos mRNA、第4周时的DRG病理变化。结果损伤30m in时,B组、C1组及C2组c-fos mRNA表达升高,1 h达高峰后开始下降,2 h仍高于A组（P〈0.05）;其中B组〉C1组〉C2组（P〈0.05）。第4周时,除A组无病理改变外,其余三组DRG均有病理改变,其严重程度B组〉C1组〉C2组。结论早期应用CCB可减轻大鼠周围神经嵌压性损害后的病理损害、改善神经功能,其可能与CCB阻断Ca2＋内流过程,使早期神经细胞c-fos表达下调有关。     

甲基苯丙胺对瞬时外向钾电流影响

目的 观察甲基苯丙胺(Meth)对瞬时外向钾电流的影响及原因.方法 将怀孕18 d SD大鼠胎鼠海马神经元分为对照组和Meth处理组,利用全细胞膜片钳方法记录外向瞬时钾电流变化;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)观察Meth引起的细胞损伤作用;利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法观察瞬时外向电流成分中Kv1.4、4.1、4.2和4.3表达,并通过western-blot方法观察Kv4.2蛋白表达.结果 与对照组[(87.4±12.5)pA/pF]比较,Meth能引起瞬时外向钾电流增大[(120.1±19.6)pA/pF] (P ＜0.01),与对照组(1.00±0.18)比较,Meth处理组凋亡率为对照组的(7.11±0.95)倍(P＜0.01),钾通道抑制剂4-氨基吡啶(4-AP)明显抑制神经元凋亡(P＜0.01);Kv4.2可能是外向电流成分中主要贡献者,Meth能上调Kv4.2通道蛋白表达;与Kv4.2上调密切相关的Kchip2/3、Kchip4、CaMK2蛋白表达增高.结论 Meth引起的瞬时钾电流增大可能通过Kv4.2上调来实现,但其机制仍需进一步探讨.