DNMT1和DNMT3b基因干扰对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察DNA甲基转移酶1(DNMT1)和DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)基因干扰对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用LipofectamineTM 2000转染DNMT1和DNMT3b小分子干扰RNA (siRNA)至胰腺癌BxPC-3细胞.实验共分5组:DNMT1干扰组(转染DNMT1-siRNA)、DNMT3b干扰组(转染DNMT3b-siRNA)、双重干扰组(转染DNMT1+ DNMT3b-siRNA)、阴性对照组(转染negative-siRNA)和空白对照组(转染脂质体).转染48 h后,应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法和Western blot法分别检测细胞中DNMT1、DNMT3b mRNA和蛋白的表达水平;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞体外增殖活力;流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 与空白对照组和阴性对照组比较,各干扰组的DNMT1和(或)DNMT3b mRNA及蛋白表达量均显著降低(P＜0.01).DNMTI干扰组和双重干扰组的细胞生长抑制率分别为30.9％和28.3％,均显著高于DNMT3b干扰组的14.5％ (P＜0.01),而DNMT1干扰组和双重干扰组之间差异无统计学意义(P＞0.05).空白对照组、阴性对照组、DNMT1干扰组、DNMT3b干扰组和双重干扰组的细胞凋亡率分别为3.74％、5.07％、44.46％、24.20％和39.24％,各干扰组的细胞凋亡率均比对照组显著增加(P＜0.01),DNMT1干扰组与双重干扰组的细胞凋亡率均显著高于DNMT3b干扰组(P＜0.01),而DNMT1干扰组与双重干扰组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DNMT1和(或)DNMT3b基因表达下调后,能抑制胰腺癌BxPC-3细胞生长,并能诱导细胞凋亡.DNMT1单干扰的抑癌作用优于DNMT3b单干扰,DNMT1和DNMT3b双重干扰无明显的协同效应.     

PBL-CP联合教学法在临床医学八年制胃肠外科见习中的运用初探

PBL教学法作为一种成熟的教学模式,现已普遍运用于临床医学八年制的临床教学中。CP教学法是以临床路径为平台的教学模式。作者在带教本校临床医学八年制胃肠外科见习课程时,尝试将CP教学模式融入到PBL教学法中,取得了良好的效果。本文主要围绕本次PBL-CP联合教学的带教方法及带教后心得体会作一阐述。     

腹主动脉旁淋巴结阳性胰头癌的临床病理特征与外科治疗结局

目的探讨腹主动脉旁淋巴结阳性胰头癌的临床病理特征与外科治疗结局。方法回顾性分析上海第二医科大学附属瑞金医院2001年1月至2004年6月间施行胰十二指肠切除并扩大淋巴结清扫术的60例胰头癌病人的临床资料。结果60例病人中,手术相关并发症发生率为31.7%,病死率为3.3%。43例(71.7%)淋巴结转移阳性,其中13例(21.6%)腹主动脉旁淋巴结阳性。腹主动脉旁淋巴结阳性发生与肿瘤大小、病理分级无相关性(P>0.05),与第13组和14组淋巴结阳性密切相关(P<0.05)。13例腹主动脉旁淋巴结阳性病人的1、2、3年生存率分别为31%、23%和0,平均生存期和中位生存期分别为15、11个月;47例腹主动脉旁淋巴结阴性病人的1、2、3年生存率分别为63%、37%和23%,平均生存期和中位生存期分别为22、20个月(P=0.02)。结论胰头癌有较高的腹主动脉旁淋巴结阳性发生率。胰十二指肠切除合并扩大淋巴结清扫可以安全实施,但该手术未能提高腹主动脉旁淋巴结阳性胰头癌病人的长期生存率。     

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目的探讨中晚期胆囊癌累及肝脏的病理特点以及不同类型肝切除术的选择与安全实施的策略。方法回顾性分析1992年1月至2003年6月间43例的中晚期胆囊癌临床资料,总结分析手术中所涉及的肝切除术类型,并对癌肿累及肝脏与原发癌的不同临床病理因素的关系作统计分析。结果施行胆囊床肝脏楔形切除24例,S4a S5肝段切除10例,S4 S5 S6肝段切除4例,右半肝切除5例。肝脏直接浸润的发生率为46.5%(20/43),主要累及S4a、S5或S6肝段。肝转移的发生率为20.9%(9/43),肝转移发生在S4及S5肝段可能性为56.3%(9/16)。中晚期胆囊癌肝脏受累与否与原发癌的部位、浸润深度、病理分级程度密切相关(P<0.05)。结论肝切除术是中晚期胆囊癌外科治疗中的一个重要组成部分,应根据肝脏受累的高危因素及受累肝段的分布特点,合理选择不同类型的肝切除术。     

胰十二指肠切除术328例临床分析

目的总结胰十二指肠切除术(pancreaticoduodenectomy,PD)的手术经验,分析并发症和远期疗效。方法回顾性分析2001年1月—2011年1月间施行的328例PD的临床资料,包括标准PD281例,保留幽门的PD 8例,扩大PD 39例。结果全组手术并发症发生率为34.1%(112/328)。前5位并发症依次为胃排空延迟(16.5%),胰瘘(11.9%),出血(7.0%),腹腔感染(5.2%),肺部感染(4.9%)。再手术率为6.1%(20/328)。病死率为3.0%(10/328)。壶腹周围癌202例中1,3,5年生存率分别为79.1%,51.5%,33.8%,中位生存期为38个月;淋巴结阴性患者(144例)的1,3,5年生存率分别为81.7%,57.6%,40.6%,中位生存期为47个月;淋巴结阳性患者(58例)的1,3,5年生存率分别为72.1%,36.4%,16.8%,中位生存期为24个月;淋巴结阴性患者的长期生存率显著高于淋巴结阳性患者(P=0.003)。胰头癌42例中1,3,5年生存率分别为67.6%,29.1%,9.7%,中位生存期为16个月,其中淋巴结阳性患者(11例)的3年以上...     

合并高血压的Leber遗传性视神经病一家系

先证者（Ⅲ6）男，41岁，因“双眼视力进行性下降4个月”于2006年5月来我院就诊。病前无发热、上呼吸道感染、腹泻、服用驱虫药、接种疫苗等病史。既往史：曾经多次测血压高，未诊断治疗。入院查体：血压130／100mmHg，内科系统检查未见异常。双眼视力下降，约40cm处可数指，视野重度缺损，以中央及上方为著，双眼底视乳头苍白，凹陷性萎缩，边界清楚。     

腺苷酸A2A受体对小鼠小肠急性缺血再灌注损伤中肠屏障功能的影响

目的 探讨腺苷酸A2A受体(A2AR)在小鼠小肠急性缺血再灌注(I/R)刺激所致肠黏膜屏障损伤机制中的作用.方法 6～8周龄雄性C57BL/6小鼠12只,分为假手术组和I/R组;A2AR基因敲除雄性C57BL/6(A2AR-/-)小鼠12只,分为A2AR-/-+假手术组和A2AR-/-+I/R组(n=6).采用夹闭肠系膜上动脉30 min,再灌注6h建立小鼠肠I/R模型.HE染色观察小肠黏膜的形态学变化;免疫荧光及蛋白质印迹检测肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1蛋白变化,尤斯灌流仪检测肠上皮通透性变化.结果 HE染色显示假手术组和A2AR-/-+假手术组小肠黏膜完整、无水肿,两组无明显差异;而I/R组和A2AR-/-+I/R组小肠黏膜明显水肿、绒毛断裂、部分脱落,且A2AR-/-+I/R组损伤程度明显重于L/R组.小肠黏膜上皮通透性检测发现,假手术组和A2AR-/-+假手术组没有显著性差异;与假手术组相比,I/R组和A2AR-/-+ I/R组小肠黏膜跨上皮电阻(trans-epithelium electrical resistant,TER)值均显著下降(P＜0.01),且A2AR-/-+I/R组相比I/R组TER值下降更为明显(P＜0.05).免疫荧光及蛋白定量分析显示假手术组与A2AR-/-+假手术组肠上皮高表达ZO-1,而在I/R组和A2AR-/-+I/R组中ZO-1表达明显减少,同时A2AR-/-+I/R组中ZO-1的表达显著低于I/R组(P＜0.05).结论小肠I/R刺激可诱导肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1表达与分布异常,造成肠黏膜屏障损伤;而A2AR可通过调控肠上皮细胞ZO-1表达加强肠黏膜屏障功能,在肠I/R损伤中发挥潜在的保护作用.     

强制戒毒学员诈病分析

近几年来毒品在我国蔓延 ,1 995年国务院颁布《强制戒毒办法》,各地相继成立了强制戒毒医疗机构。在强制戒毒中 ,有些戒毒者为逃避打击往往伪装疾病 ,本文对 45例诈病现象作简要分析。1　对象与方法对象 :武汉市公安局武昌分局戒毒所 1 999年7月～ 2 0 0 0年 6月 ,共收治强制戒毒者 61 8人 (男性 ) ,年龄 1 7～ 51岁 ,平均 2 7.2 3± 8.93岁。其中诈病 45人、确诊有严重躯体疾病而中断治疗者 2 7人。方法 :以原始病历为材料 ,具有完整的病程记录和必要的辅助检查资料。诈病诊断 :不符合各类躯体或精神疾病的诊断标准 ,无明显相关疾病的临床…