腺苷酸A2A受体对小鼠小肠急性缺血再灌注损伤中肠屏障功能的影响

目的 探讨腺苷酸A2A受体(A2AR)在小鼠小肠急性缺血再灌注(I/R)刺激所致肠黏膜屏障损伤机制中的作用.方法 6～8周龄雄性C57BL/6小鼠12只,分为假手术组和I/R组;A2AR基因敲除雄性C57BL/6(A2AR-/-)小鼠12只,分为A2AR-/-+假手术组和A2AR-/-+I/R组(n=6).采用夹闭肠系膜上动脉30 min,再灌注6h建立小鼠肠I/R模型.HE染色观察小肠黏膜的形态学变化;免疫荧光及蛋白质印迹检测肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1蛋白变化,尤斯灌流仪检测肠上皮通透性变化.结果 HE染色显示假手术组和A2AR-/-+假手术组小肠黏膜完整、无水肿,两组无明显差异;而I/R组和A2AR-/-+I/R组小肠黏膜明显水肿、绒毛断裂、部分脱落,且A2AR-/-+I/R组损伤程度明显重于L/R组.小肠黏膜上皮通透性检测发现,假手术组和A2AR-/-+假手术组没有显著性差异;与假手术组相比,I/R组和A2AR-/-+ I/R组小肠黏膜跨上皮电阻(trans-epithelium electrical resistant,TER)值均显著下降(P＜0.01),且A2AR-/-+I/R组相比I/R组TER值下降更为明显(P＜0.05).免疫荧光及蛋白定量分析显示假手术组与A2AR-/-+假手术组肠上皮高表达ZO-1,而在I/R组和A2AR-/-+I/R组中ZO-1表达明显减少,同时A2AR-/-+I/R组中ZO-1的表达显著低于I/R组(P＜0.05).结论小肠I/R刺激可诱导肠上皮细胞紧密连接蛋白ZO-1表达与分布异常,造成肠黏膜屏障损伤;而A2AR可通过调控肠上皮细胞ZO-1表达加强肠黏膜屏障功能,在肠I/R损伤中发挥潜在的保护作用.     

全腹腔镜与内镜联合腹腔镜治疗胆总管结石并胆囊良性疾病的对比研究

[摘 要] 目的 对比分析全腹腔镜与内镜联合腹腔镜治疗胆总管结石合并胆囊良性疾病的临床疗效,探讨最佳微创治疗方案。方法 回顾性分析四川绵阳四〇四医院2014年5月至2017年5月收治的122例胆总管结石合并胆囊良性疾病患者的临床资料,根据手术方案分为腹腔镜胆囊切除+胆总管探查取石组（LC+LCBDE,n=75）,和十二指肠镜下乳头切开术（EST）+LC组（EST+LC,n=47）。其中LC+LCBDE组又分为经胆囊管胆总管探查组（LTCBDE,n=30）、胆道一期缝合组（n=21）、T管引流组（n=24）。对比分析各组围手术期结果。结果 LC+LCBDE组与EST+LC组比较,手术时间、术后禁食时间及术后并发症发生率无统计学差异（P＞0.05）;LC+LCBDE组术中失血量更多[（22.36±5.89）mL vs （18.74±6.58）mL]、术后住院时间更长[ （7.90±2.91）d vs （5.40±2.51）d]、但总费用更少[ （19 467.72±1 916.39）元 vs （24 882.89±2 477.21）元],差异均有统计学意义（P＜0.05）。LC+LCBDE组内比较,LTCBDE组、胆道一期缝合组手术时间和术中失血量与T管引流组比较无统计学差异（P＞0.05）;LTCBDE组、胆道一期缝合组术后禁食时间[ （28.44±10.69）h、 （32.67±12.61）h vs （33.94±11.75）h]、腹腔引流时间[（2.02±0.64）d、 （2.19±0.71）d vs （3.68±0.94）d]、术后住院时间[（5.10±1.04）d、 （6.61±1.16）d vs （9.81±1.26）d]短于T管引流组（P＜0.05）,住院费用[（18 743.57±1 952.64）元、 （21 035.94±2 268.68）元 vs （19 242.90±1 549.71）元]少于T管引流组（P＜0.05）;术后并发症发生率（0、19% vs 25.0%）也均低于T管引流组,且LTCBDE组与T管引流组比较有统计学差异（P＜0.05）。结论 （1）相对于内镜联合腹腔镜,全腹腔镜避免了分次手术,适应证更宽,术后并发症更轻且住院费用更少,值得推荐;（2）全腹腔镜中,LTCBDE及胆道一期缝合均能达到一次性封闭胆管的目的,能让患者获得更大的治疗收益,临床上应根据胆囊管或胆总管的具体情况优先选择。     

靶向PDCD5-Caspase-3 融合基因过表达 对HepG2 肝癌细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨靶向PDCD5-Caspase-3 融合基因过表达对HepG2 肝癌细胞体外增殖与凋亡的影响。 方法 利用基因重组技术构建PDCD5-Caspase-3 融合基因,克隆到带有EGFP 基因的GV358 慢病毒表达载 体,与辅助质粒共同转染293T 细胞,通过同源重组,获得融合基因重组慢病毒PDCD5-Caspase-3。体外 转染人肝癌HepG-2 细胞72 h 后,Western bolt 检测肝癌HepG-2 细胞中PDCD5 蛋白和Caspase-3 蛋白表 达,CCK-8 法检测PDCD5-Caspase-3 融合基因过表达对HepG-2 肝癌细胞增殖的影响,流式细胞术观察其 对细胞凋亡的影响。结果 PDCD5-Caspase-3 融合基因过表达可增加HepG-2 肝癌细胞中PDCD5 蛋白和 Caspase-3 蛋白合成（P <0.05）;与对照组或空白组相比,转染72 h 后实验组细胞增殖能力下降（P <0.05）; 与对照组或空白组比较,转染72 h 后实验组细胞凋亡率增加（P <0.05）。结论 促凋亡基因PDCD5 和 Caspase-3 联合表达可抑制HepG2 肝癌细胞增殖,并促进其凋亡,可作为肝癌治疗潜在靶点。     

腹腔镜下不同左肝切除方式治疗左肝胆管结石的对比研究

目的 对比腹腔镜左肝蒂阻断解剖性左半肝切除、腹腔镜左肝蒂阻断左肝部分切除、腹腔镜Pringle法阻断左肝部分切除治疗左肝胆管结石的临床疗效,探讨腹腔镜下三种左肝切除方式治疗左肝胆管结石的合理选择。方法 回顾性分析2015 年5 月至2018 年11 月四川绵阳四0 四医院97 例腹腔镜左肝切除术患者的临床资料,其中腹腔镜左肝蒂阻断解剖性左半肝切除术25 例（区域阻断+解剖性切除组）,腹腔镜左肝蒂阻断左肝部分切除术33 例（区域阻断+部分切除组）,腹腔镜Pringle法阻断左肝部分切除术39 例（全肝阻断+部分切除组）,对比分析三组围手术期结果、术后炎症和肝脏生化指标、术后并发症情况。结果 三组术中失血量、输血率、术后进食时间、术后住院时间、术后炎症指标变化、术后并发症发生率均无统计学差异（P＞0.05）;手术时间区域阻断+解剖切除组最长、区域阻断+部分切除组次之、全肝阻断+部分切除组最短[（257.9±66.2）min vs（ 234.6±49.1）min vs（ 216.4±40.2）min],差异有统计学意义（P＜0.05）。三组白细胞计数、C反应蛋白、谷丙转氨酶、总胆红素及白蛋白均出现术后先升高后降低的趋势,至术后第5 天,除白蛋白外各炎症及肝功能指标区域阻断+解剖性切除组均低于区域阻断+部分切除组和全肝阻断+部分切除组,除C反应蛋白外各炎症及肝功能指标全肝阻断+部分切除组均高于区域阻断+解剖性切除组和区域阻断+部分切除组;采用重复测量的方差分析进一步比较,白细胞计数、C反应蛋白、谷丙转氨酶、总胆红素及白蛋白在各时间点的差异均有统计学意义（P＜0.05）,谷丙转氨酶、总胆红素不同手术方式和各时间点存在交互作用（P＜0.05）,提示三组谷丙转氨酶、总胆红素随时间改变的趋势存在统计学差异。结论 （1）结石及病灶累及左内叶尤其IVa段时,选择腹腔镜左肝蒂阻断解剖性左半肝切除疗效更佳;（2）结石及病灶限于IVa段以外的左肝区段时,联合术中超声的腹腔镜左肝部分切除更具优势。     

直肠癌保肛术后低位前切除综合征发生率、恢复情况及影响因素的回顾性分析

目的 探讨直肠癌患者保肛术后低位前切除综合征(low anterior resection syndrome,LARS)的发生率、恢复情况及影响因素.方法 回顾性分析2012年5月至2015年1月第三军医大学新桥医院普通外科确诊为直肠癌并行保肛根治术的患者337例,其中男性208例,女性129例,年龄(61.03±11.32)岁.收集患者临床、病理及随访资料,选择可能对直肠癌保肛术后LARS发生产生影响的临床病理因素进行单因素及多因素Logistic回归分析,并分析术后恢复时间及骨盆径线对LARS的影响.结果 337例直肠癌患者LARS评分均数为14.08(0 ～41),126例(37.4％)有LARS症状,其中重度LARS占总例数的18.7％.多因素Logistic回归分析显示:吻合口位置越低、术前放疗、术后恢复时间越短均是患者术后存在LARS的独立危险因素(OR＞1,P＜0.05).术后不同时间段的直肠癌患者LARS评分比较显示:与术后6个月内比较,术后6～18个月LARS评分呈逐步且显著下降的趋势(P＜0.01).对于手术18个月后的患者研究显示:吻合口距肛缘＜5 cm直肠癌患者LARS发生率显著高于吻合口距肛缘≥5 cm组(P＜0.05);骨盆径线资料对比分析发现,吻合口距肛缘＜5 cm直肠癌患者中,LARS组坐骨棘间径显著小于无LARS组(P＜0.05).结论 LARS是直肠癌特别是低位直肠癌保肛术后的常见并发症,吻合口位置、术前放疗及术后恢复时间均为影响LARS发生发展的重要因素;直肠癌患者术后LARS症状出现显著改善至少需6个月以上;骨盆横径特别是坐骨棘间径大小可预测低位直肠癌术后LARS发生及恢复情况.