抗流感病毒性肺炎的有效中药复方筛选及机制研究

目的:将免疫学原理应用于流感病毒性肺炎的制备,从而筛选出有效防治流感病毒性肺炎的中药复方,并进一步探讨该复方的作用机制。方法:淤用浓度为75 mg/ (kg•d)的免疫抑制剂短暂抑制小鼠免疫功能再进行A 型流感病毒滴鼻感染,实验设多组中药复方组,同步设奥司他韦组、模型组以及正常组,灌胃给予相应的临床等效剂量药物7 d 后,处理动物,进行指标检测,筛选出有效中药复方。于建立流感病毒性肺炎模型,实验设麻杏石甘汤的低、中、高剂量组,奥司他韦组、模型组和正常组,灌胃给予相应临床等效剂量药物7 d 后,处理动物,进行指标检测。结果:淤麻杏石甘汤、小柴胡汤、葛根汤,银翘散等中药复方中对小鼠肺炎均有一定的疗效,其中以麻杏石甘汤最为突出,可显著减轻肺部炎症等。于麻杏石甘汤可以改善小鼠的一般状况、肺部炎症和调控细胞因子的表达,上调脾指数,其中麻杏石甘汤中、高剂量组总体治疗效果更为显著。结论:免疫抑制的流感病毒性肺炎小鼠模型在筛选抗流感病毒性肺炎的中药复方中具有较好的实验研究价值,筛选出来的麻杏石甘汤作为有效的抗流感病毒性肺炎的中药复方,其可能的作用机制是通过提高机体的免疫功能,调节细胞因子的表达和分泌,从而减轻肺部炎症,改善小鼠的一般状况。     

反向点杂交法用于80例β地中海贫血的快速产前诊断

为探讨反向点杂交法（ＲＤＢ）在β地中海贫血（β地贫）基因诊断中的优越性，应用该方法对７６个家庭的８０例β地贫高风险胎儿进行产前诊断。在８０例被检胎儿中，完全诊断的有７７例：包括正常个体２２例；β地贫杂合子４９例；双重杂合子４例及纯合子２例。另有３例为不完全诊断，其中２例被排除了重症的可能；余１例有１／２的机会为β地贫双重杂合子。ＲＤＢ法可同时筛查１８种中国人β地贫突变，且操作简便快速，在异质性大的β地贫的基因诊断中有明显的技术优势     

丙泊酚用于人工流产术的效果观察

人工流产术的手术操作，宫颈扩张等机械性刺激易引起迷走神经的兴奋，释放大量乙酰胆碱，表现为心动过缓、心律紊乱、血压下降、面色苍白、大汗淋漓、呕吐、头晕、胸闷等症状，又称“人流综合征”，常使患者难以忍受。为消除受术者精神紧张的因素，故术前解除顾虑十分必要，应给予适当镇静、镇痛剂。     

幽门螺杆菌临床分离株尿素酶基因B的原核表达、纯化及免疫活性

目的:在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌临床分离株尿素酶B(UreB),纯化重组蛋白并分析其免疫活性.方法:将pGEX-4T-1-UreB重组菌BL21复舒,挑单菌落接种于含氨苄的LB培养基中.0.5 mmoL异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组融合蛋白的表达,使用纯化的重组蛋白免疫小鼠.ELISA检测血清抗体效价,并使用感染患者血清进行Western-blotting鉴定重组蛋白反应原性.结果:SDS-PAGE示在约87 kD相应分子量可见融合蛋白表达,产物主要在表达上清以可溶形式存在,纯化蛋白免疫小鼠能诱导产生特异性体液免疫应答,ELISA检测特异性IgG效价为1:51 200.Western blotting示重组蛋白能被幽门螺杆菌感染患者血清识别.结论:UreB在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物具有较好的免疫原性及反应原性.     

高分辨熔解曲线检测苯丙氨酸羟化酶基因突变的临床价值

目的 研究用HRM分析技术检测经典型PKU患者PAH基因突变的临床应用价值。方法采用HRM分析技术对17例经典型PKU患者PAH基因的13个外显子及外显子-内含子交界区域进行检测,并采用DNA测序验证HRM检测结果。同时评价HRM诊断PKU的敏感度和特异度。另外,对其中2个家系的风险胎儿进行产前诊断。结果采用HRM分析技术从17例经典型PKU患者中检出有2个致病突变的患者16例,检出有3个致病突变患者l例。同时检出194V(c.280A＞G)、IVS4nt-1G＞A(c.442-1G＞A)、R158Q(c.473G＞ A)、Q160X(c.478C＞ T)、W187X(c.561G＞ A)、E6nt-96A＞ G(c.611A＞ G)、G239D(c.716G＞ A)、R241C(c.721C＞ T)、R243Q(c.728G＞ A)、G247R (c.739C-＞ C)、G247V(c.740G＞ T)、R261X(c.781C ＞T)、R261Q(c.782G＞ A)、H264R(c.791A ＞G)、F302 fsX39(c.904delT)、E305K(c.913G＞ A)、G312V(c.935G＞ T)、Y356X(c.1068C＞A)、V399V (c.1197A ＞T)、R408Q(c.1223G＞ A)、T418P(c.1252A ＞C)、A434D(c.1301C＞ A) 22种致病突变;Q232Q(c.696G＞A)、V245V(c.735G＞ A)、L385L(c.1155C＞G)3种沉默突变;1种单核苷酸多态点rs2280615(c.402A＞ C)。其中194V(c.280A＞ G)、Q160X(c.478C＞ T)、H264R(c.791A ＞G)、G312V (c.935G＞T)和E305K(c.913G＞ A)为PAH基因新发现的突变。2例风险胎儿经产前诊断,1例未发现致病突变,1例诊断为携带者。HRM突变筛查经典型PKU的敏感度和特异度均为100％,其检测结果与DNA测序结果完全一致。结论HRM分析技术是一种简单、准确、快速、高通量、低成本的遗传学分析方法,可用于经典型PKU的PAH基因突变筛查,并可用于已知父母突变的经典型PKU家系快速产前诊断。     

糖皮质激素或雄激素治疗自身免疫性卵巢早衰小鼠

目的：利用自身免疫性卵巢早衰（premature ovary failure, POF）小鼠模型,为临床采用糖皮质激素和雄激素治疗自身免疫性POF提供理论依据。方法：利用小鼠Pzp3诱发小鼠卵巢发生自身免疫反应,制作成自身免疫性卵巢早衰动物模型。选择60只模型小鼠,随机均分为3组：治疗组分别给以糖皮质激素、雄激素治疗,对照组给以注射三蒸水。以性周期的改变、血清抗透明带抗体浓度、病理学检查及免疫组织化学法检测卵巢组织中CD45阳性细胞的浸润程度作为疗效观察指标,判断分析其治疗效果。结果：性周期正常者两治疗组与对照组均存在显著差异（P＜0.01）。两治疗组小鼠血清抗透明带抗体平均浓度均明显低于对照组（P＜0.01）;糖皮质激素组明显高于雄激素组（P＜0.01）。两治疗组小鼠组织学检查生长卵泡比例均明显高于对照组（P＜0.01）。两治疗组小鼠CD45阳性细胞浸润的比例均明显低于对照组（P＜0.01）。结论：糖皮质激素和雄激素均能显著改善自身免疫性卵巢早衰小鼠的病情,二者的治疗效果相似。     

高分辨熔解曲线分析技术及其在遗传学中的应用

高分辨熔解曲线分析（High Resolution Melting,HRM）技术是建立在熔解曲线分析的基础上,通过一种新的饱和荧光染料,以及专业的高分辨率仪器,应用于突变筛查、基因分型等的遗传学分析新方法。这种技术因其简单、准确、快速、高通量、低成本,对样本无污染等优点而受到普遍关注。本文对HRM技术及其应用进行综述。     

定量荧光PCR技术产前检测21三体嵌合体二例

目的报道采用多重定量荧光PCR（QF-PCR）方法在产前诊断中检测到2例21-三体嵌合体。方法采用QF-PCR方法检测21号染色体的数目同时采用传统的核型分型方法检测产前羊水标本,并将二者结果进行对比。结果 QF-PCR方法可以明显看出21三体嵌合体2例,核型分析这2个标本结果为：47,XX,＋21[5]/46,XX,[45];47,XX,＋21[34]/46,XX,[66]。结论 QF-PCR方法与核型分析方法一样可以用于产前三体嵌合体检测,为遗传咨询和产前诊断提供实验依据。