健康人和HIV感染者IgG各亚型水平及特点

以IgG抗体的血清学变化为基础建立的一系列免疫学方法、技术在艾滋病病毒(HIV)抗体检测及宏观决策等方面发挥着不可忽视的作用.目前我国广泛用于HIV抗体检测的第3代ELISA试剂和各种快速检测试剂的工作原理就是检测感染者的IgG抗体为主.     

应用BED．CEIA检测干血斑样本监测HIV-1发病率的可行性研究

目的 研究干血斑样本应用于现场HIV-1 BED-CEIA新近感染的检测以及监测HIV-1发病率的可行性.方法 收集27个自愿咨询检测(VCT)哨点的10 313名咨询者的血浆和干血斑样本,进行HIV抗体检测,对经免疫印迹方法确认的349例HIV感染者的血浆和干血斑样本同时进行BED-CEIA检测,检验干血斑样本BED-CEIA新近感染检测结果的稳定性和重复性,比较两种样本检测结果的差异及对HIV发病率估计的一致性.结果 应用干血斑样本检测具有较好的稳定性和重复性,R2值分别达到0.9551和0.95.349对样本的检测结果显示,294对样本被同时判定为长期感染,53对样本被同时判定为新近感染,两种样本对HIV-1是否为新近感染判断的一致性达到99.43%.而2对样本得到不同的结果,其An值均处于临界值附近.在人群总体水平上,两种样本计算得到的HIV-1发病率完全一致.结论 在HIV-1 BED-CEIA新近感染检测中,尽管个别样本检测结果存在差异,但在人群水平上千血斑样本的检测结果对HIV-1发病率的估计与血浆样本没有差异,因此在中国可以应用于血斑样本进行HIV-1 BED-CEIA新近感染检测.     

纳米生物条形码方法检测蛋白的关键技术及其发展

蛋白生物标志物的检测对了解疾病的发生和发展至关重要,在很多疾病早期,蛋白标志物的浓度通常很低,常用的ELISA法经常无法检出,灵敏度尚不能满足临床的需要.纳米BCA技术是将DNA标记技术与目标蛋白结合起来,将与蛋白识别过程相关的信号进行放大,通过标记DNA的鉴定来实现蛋白的检测,为生物标记物的高灵敏度检测打开了新的局面[1],在生物分子检测、传染病监测、肿瘤早期发现和监测等各个方面有着广泛的应用前景.     

干血斑样本用于人类免疫缺陷病毒1型前病毒基因诊断的研究

目的研究干血斑（DBS）样本用于人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）感染前病毒DNA基因诊断的可行性。方法采集59例静脉吸毒HIV-1感染者和22名HIV-1阴性健康人EDTA抗凝静脉全血5ml，保存全血1ml，另用50μl制备干血斑样本后，分离血浆。QIAamp Blood Mini试剂盒和10％Chelex 100树脂分别提取全血和干血斑中细胞DNA。Roche Cobas Amplicor逆转录聚合酶链反应检测HIV-1感染者血浆病毒载量。HIV-1Env基因Gp41区，gag基因，pol基因分别用2对外侧和内侧引物，按照套式PCR方法，进行扩增。以HIV-1任何两个基因区扩增结果组合判断HIV-1感染。结果在重复2～3次的前提下，59份DBS样本HIV-1感染基因诊断敏感度93％（95％可信区间89％～97％），34份全血样本94％（95％可信区间89％～98％）。疋。检验显示，两种样本用于HIV-1基因诊断时差异无统计学意义。22份两种阴性样本特异性均为100％（95％可信区间95．93％～100％）。8份血浆病毒载量（VL）〉4．0 Log的DBS样本用于基因诊断的可重复性和HIV-1感染样本检出率优于5份VL〈4．0 Log样本。18对全血和DBS样本HIV-1基因诊断一致性分析，符合率94％，一份DBS样本HIV-1特异三个基因片段均未扩增。结论干血斑样本易采集，便于运输，保存条件低，费用低廉，用于HIV-1基因诊断时与全血样本检测结果无显著性差异，病毒载量〈4．0 Log的样本，为增加检出概率需要对样本重复检测。DBS样本HIV-1基因诊断方法适合于无条件立即处理血样本的偏远地区或采样困难的感染者的诊断，及HIV-1母婴垂直传播研究中婴幼儿感染的早期诊断。     

HIV-1病毒载量检测常用技术及研究进展

病毒载量检测是HIV-1感染后需要长期观察的重要指标,在基础研究、早期感染的诊断、药物治疗学研究和流行病学监测方面都有特殊的意义。目前普遍使用的HIV病毒载量检测主要是测定血浆中病毒RNA的量,采用的方法包括荧光定量PCR技术、核酸等温扩增技术以及分支DNA杂交技术等。检测的样本包括血清、分泌物及全血制备的干血斑等多种类型,检测的靶点也会涉及到细胞基因组中整合的病毒DNA的应用。反转录酶法检测技术和其他等温扩增技术等许多技术已用于实验检测,一些交叉学科技术正进行着实验性探索。我国已有HIV-1病毒载量检测实验室140余家,3种经典的检测技术均有涉及。各种技术特点不同,但在病毒载量检测工作中均发挥巨大的作用。     

云南省德宏州2010—2011年新报告HIV-1感染者中新近感染比例及其影响因素

采用BED HIV-1捕获酶联法(BED Capture EIA,BED-CEIA)可区别近期感染与既往感染以估算新近感染率。云南省德宏州对2010—2011年新报告HIV感染者进行了BED-CEIA检测研究。     

HIV抗体快速诊断试剂的评估

目的 通过对艾滋病病毒(HIV)抗体快速诊断试剂的质量评估，筛选检测性能好的试剂，为艾滋病自愿咨询检测(VCT)提供依据。方法 用国家艾滋病参比实验室提供的50份参比样品、来自不同人群的400份样品、两套BBI(BOSTON BIOMEDICA，INC)抗体阳转血清盘(包括10份样品)，对8个厂家的HIv抗体快速诊断试剂的敏感性、特异性进行了评估。结果 被评价的各种快速诊断试剂的敏感性为97．71％～100％，特异性为81．78％～99．63％；阳性预示值为72．78％～99．22％，阴性预示值为98.89％～100％；用BBI血清盘检测时的试剂敏感性及特异性均为100％。结论 HIV抗体快速诊断试剂有较好的检测性能，有些试剂的敏感性及特异性均在95％以上，适合在发展中国家的VCT场所、仪器设备缺乏的实验室、偏远地区的血液筛查及职业暴露后的快速诊断中使用。     

16例AIDS病人治疗前后CD_4~+T淋巴细胞绝对计数及病毒载量结果分析

目的 评价高效抗逆转录病毒疗法(HAART)对新疆艾滋病(AIDS)病人的疗效.方法 对16例用HAART治疗5-24个月的AIDS病人,通过观察其临床症状改善情况,检测病毒载量、CD4 T淋巴细胞绝对计数,对现行治疗进行初步评估.结果 16例患者在HAART治疗5-24个月后,临床症状明显改善,14例患者病毒复制得到有效抑制,病毒载量在检测线以下,CD4 T淋巴细胞绝对计数均值平均升高(188.5±60.9)个/mm3.结论 HAART治疗对新疆HIV感染者/AIDS病人疗效显著,能降低机会性感染,提高生存质量,并在一定程度上维护免疫功能.     

网络购买HIV快速检测试剂用于自我检测人群特征

目的了解网络购买艾滋病病毒(HIV)快速检测试剂用于自我检测人群的特征,为进一步扩大基于互联网的HIV检测服务,促进人群主动检测提供依据和参考。方法随机选取网络购买HIV快速检测试剂的1 000人作为调查对象,在邮寄给其的快递盒内放入项目简介卡发布问卷调查信息。利用网络平台,设计、录入网络版"网络购买HIV快速检测试剂用于自我检测调查问卷",调查对象通过QQ,微信在电脑或手机端完成调查问卷。结果共有591人完成网络问卷调查,其中男性512人,女性79人;年龄中位数25岁(15～50岁);未婚占78.7%(465人);大专或本科以上文化占66.2%(391人);自由职业者及大学生人群是主要购买人群,分别占36.0%(213人)及26.2%(155人);月收入在2 000～5 000元之间的占53.0%(313人)。异性恋人群占57.5%(340人),男男同性恋人群占27.2%(161人),双性恋人群占15.2%(90人)。此外,64.7%(220/340)的异性恋人群、69.6%(112/161)的男男同性恋人群及72.2%(65/90)的双性恋人群在最近6个月内发生过无保护性行为。50.9%(301/591)的调查对象在自我检测后会和客服人员联系进行咨询。28.8%(170人)的调查对象在自我检测后,选择去疾病预防控制中心或医院寻求进一步确证及咨询服务。结论网络购买HIV快速检测试剂用于自我检测的人群大部分是未婚年轻男性,他们受教育程度较高,多数为异性恋,且收入属中上等,在最近6个月内发生过无保护性行为,对该人群提供检测后的专业咨询服务非常重要。