gp96-肽复合物体外诱导脾淋巴细胞及其抗肿瘤效应

目的研究H22肿瘤细胞来源的热休克蛋白gp96-多肽复合物在体外诱导小鼠脾淋巴细胞的特异性的细胞毒性T细胞(CTL)的产生及其抗肿瘤效应。方法利用蛋白提取纯化技术、细胞培养技术、流式细胞术、CCK-8法、免疫荧光技术等。结果经鉴定获得纯化的热休克蛋白;流式细胞仪检测表明,经gp96-肽复合物诱导后的CD8T细胞比例达到近70%,远远高于对照组的35%、26%;该活化的CTL细胞在效靶比为50∶1时的肿瘤杀伤率达72%与对照组相比具有统计学意义;激光共聚焦显微镜观察证实实验诱导组的培养上清能诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学改变。结论肿瘤来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能诱导小鼠脾淋巴细胞的CTL反应,该活化的CTL具有特异性抗H22肿瘤细胞的免疫保护作用并能分泌免疫活性物质诱导H22肿瘤细胞凋亡。     

大鼠失神经支配后比目鱼肌和趾长伸肌超微结构变化的实验研究

目的:探讨比目鱼肌和趾长伸肌失神经支配后不同时间点超微结构变化。方法:建立SD大鼠坐骨神经离断模型,分别于术后1,2,3,4周电镜下观察大鼠比目鱼肌和趾长伸肌的超微结构变化。结果:失神经支配1周,比目鱼肌纤维局部萎缩变细,肌丝排列不规则,部分线粒体出现肿胀;趾长伸肌的肌丝排列稍不规则,线粒体形态等无明显异常。失神经支配2周比目鱼肌萎缩变细加重,肌节与肌丝排列紊乱,部分线粒体空泡变性;趾长伸肌的肌丝局部萎缩变细,肌间隙增宽,线粒体发生轻微肿胀。失神经支配后3、4周,比目鱼肌肌节肌丝变化明显,结构模糊不清,线粒体呈空泡化;趾长伸肌的肌丝排列不规则,肌原纤维结构可辨,线粒体肿胀明显,部分出现空泡化。结论:周围神经损伤可致骨骼肌超微结构发生明显变化,并随着失神经支配时间延长而逐渐加重;比目鱼肌失神经支配后超微结构的变化较趾长伸肌明显。     

紫外辐照联合多聚甲醛熏蒸法制备真菌扫描电镜样品的初探

目的:探讨简易的扫描电镜样品制备方法,观察病原丝状真菌菌丝、孢子表面形貌的超微结构特征。方法:采用玻片小培养法制备病原丝状真菌的菌株,应用紫外辐照联合多聚甲醛蒸汽熏蒸法对样品进行消毒、固定,并经金属喷镀后在扫描电镜下观察。结果:扫描电镜下,该方法能保留所有菌株的菌丝及孢子原有的排列方式,并且能在扫描电镜下表现出良好的超微结构特征。结论:紫外辐照-多聚甲醛熏蒸法处理病原丝状真菌样品,能简单、快捷的用于扫描电镜观察,并可为相关真菌的分类提供形态学依据。     

肿瘤源性热休克蛋白gp96诱导淋巴细胞反应及其抗肿瘤效应

目的：研究肿瘤细胞来源的热休克蛋白gp96-多肽复合物在体外诱导脾淋巴细胞的特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应.方法：利用蛋白纯化技术、SDS-PAGE凝胶电泳及Western blot法分离纯化、鉴定gp96-多肽;通过流式细胞术、免疫荧光技术、CCK-8法等检测经gp96多肽诱导的CD8^＋T细胞及其抗肿瘤效应.结果：经鉴定获得纯化的热休克蛋白;流式细胞仪检测表明,经gp96-肽复合物诱导后的CD8^＋T细胞比例达到近70%,远远高于对照组的35%、26%;该活化的CTL细胞在效靶比为50：1时的肿瘤杀伤率达72%,与对照组相比具有统计学意义;激光共聚焦显微镜观察证实实验诱导组的培养上清能诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学改变.结论：肿瘤来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能诱导小鼠脾淋巴细胞的CTL反应,该活化的CTL具有特异性抗H22肿瘤细胞的免疫作用,并能分泌免疫活性物质诱导H22肿瘤细胞凋亡.     

纳米细菌纤维素的制备及其超微结构镜观察

制备细菌纤维素,观察纳米细菌纤维素的超微结构特点。用红茶菌做菌种,通过茶水发酵培养制备纳米细菌纤维素,利用扫描电镜、透射电镜观察其超微结构特点。结果表明:新鲜制备的细菌纤维素膜为无色透明胶冻状膜,表面光滑;经预处理后呈乳白色半透明胶冻状;扫描电镜下可见细菌纤维素膜呈疏松的网状结构,纤维素微纤丝从菌体胞壁小孔中分泌出来;透射电镜下,经负染后,在深色的背景中间可见浅色细丝状。说明细菌纤维素具有良好的纳米纤维网络特征,在生物医学领域具有良好的、广泛的应用前景。     

循证护理证据的检索策略

循证护理强调基于问题的研究,依靠当前可得的最好临床研究证据、结合经验和患者需求进行决策与实践[1]。及时、系统地获得最佳证据是循证研究的基础。本文以“呼吸道湿化在体外循环后护理中的作用”为例,介绍循证护理证据检索的策略及步骤。1证据的分类及来源1.1根据研究方法的不同,可分为原始研究证据和二次研究证据[2]。原始研究证据是对单个临床研究进行统计学分析、总结所获得的第一手数据、结论。包括单个的随机对照试验等。二次研究证据是在收集原始研究证据的基础上,进行评价、分析、总结后所得出的结论,是原始研究证据再加工后得到…     

gp96-肽复合物体外对脾淋巴细胞基因表达及其抗肿瘤效应研究

目的： 研究H22肿瘤细胞来源的gp96-多肽复合物体外对小鼠脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ mRNA表达的影响；并观察其培养上清诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学变化。方法： 利用蛋白提取纯化技术提取H22肿瘤细胞来源的热休克蛋白gp96，Western blotting法鉴定所得目的蛋白；RT-PCR法检测细胞TNF-α和IFN-γ mRNA 的表达水平；激光共聚焦显微镜及透射电子显微镜观察细胞培养上清诱导H22肿瘤细胞的形态学变化。结果： 经鉴定获得纯化的热休克蛋白gp96；gp96肽复合物诱导组的脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ mRNA的表达强度（RV）分别为0.20±0.02及0.22±0.01，明显高于对照组的0.11±0.02、0.11±0.01和0.10±0.01、0.11±0.01(P<0.05)；实验诱导组的培养上清能诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学改变。结论: H22肿瘤来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能在体外增强小鼠脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ mRNA 的表达；同时，经诱导的脾细胞能分泌免疫活性物质诱导H22细胞凋亡。     

肝癌患者PBMC中TH1/TH2类细胞因子mRNA表达

目的探讨TH1类细胞因子IL-2、IFN-γ及TH2类细胞因子IL-4mRNA在Ⅰ期和Ⅱ期肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达模式,并观察IL-2、IFN-γmRNA在手术前后的表达变化。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定8例Ⅰ期和10例Ⅱ期原发性肝癌患者手术前后及15例健康人外周血中IL-2、IFN-γ的表达,并用凝胶图像分析系统进行图像分析。结果在18例肝癌患者中,IL-2、IFN-γmRNA的表达率分别为16.7%、5.6%,低于IL-4的表达率88.9%(P<0.05),呈现明显的TH2偏移状态,且IL-2、IFN-γ的表达强度在0.10~0.11之间,也远低于IL-4的0.21~0.22;在8例Ⅰ期肝癌患者中,术前有25.0%(2/8)表达IL-2mRNA,12.5%(1/8)表达IFN-γ,高于对照组的13.3%(2/15)、5.6%(1/15);手术治疗后两者的表达率分别是50.0%、37.5%,高于术前组;术前组及正常对照组两种细胞因子mRNA表达强度(0.10~0.12)明显低于术后组的0.20~0.22(P<0.05)。另外,10例Ⅱ期患者手术前后术均无IFN-γm...     

CONSORT声明在护理临床科研设计中的应用

科学而严谨的科研设计是获得可靠临床结论的前提和基础。循证护理概念的提出,对实验设计也提出了更高的要求。高标准的临床设计所产生的结论证据性也就越强。CONSORT声明是一个指导研究者提高报告质量的标准,其中对临床设计也进行了规范。本文结合CONSORT声明,以“生理盐水与蒸