大鼠失神经支配后比目鱼肌和趾长伸肌超微结构变化的实验研究

目的:探讨比目鱼肌和趾长伸肌失神经支配后不同时间点超微结构变化。方法:建立SD大鼠坐骨神经离断模型,分别于术后1,2,3,4周电镜下观察大鼠比目鱼肌和趾长伸肌的超微结构变化。结果:失神经支配1周,比目鱼肌纤维局部萎缩变细,肌丝排列不规则,部分线粒体出现肿胀;趾长伸肌的肌丝排列稍不规则,线粒体形态等无明显异常。失神经支配2周比目鱼肌萎缩变细加重,肌节与肌丝排列紊乱,部分线粒体空泡变性;趾长伸肌的肌丝局部萎缩变细,肌间隙增宽,线粒体发生轻微肿胀。失神经支配后3、4周,比目鱼肌肌节肌丝变化明显,结构模糊不清,线粒体呈空泡化;趾长伸肌的肌丝排列不规则,肌原纤维结构可辨,线粒体肿胀明显,部分出现空泡化。结论:周围神经损伤可致骨骼肌超微结构发生明显变化,并随着失神经支配时间延长而逐渐加重;比目鱼肌失神经支配后超微结构的变化较趾长伸肌明显。     

紫外辐照联合多聚甲醛熏蒸法制备真菌扫描电镜样品的初探

目的:探讨简易的扫描电镜样品制备方法,观察病原丝状真菌菌丝、孢子表面形貌的超微结构特征。方法:采用玻片小培养法制备病原丝状真菌的菌株,应用紫外辐照联合多聚甲醛蒸汽熏蒸法对样品进行消毒、固定,并经金属喷镀后在扫描电镜下观察。结果:扫描电镜下,该方法能保留所有菌株的菌丝及孢子原有的排列方式,并且能在扫描电镜下表现出良好的超微结构特征。结论:紫外辐照-多聚甲醛熏蒸法处理病原丝状真菌样品,能简单、快捷的用于扫描电镜观察,并可为相关真菌的分类提供形态学依据。     

gp96-肽复合物体外诱导脾淋巴细胞及其抗肿瘤效应

目的研究H22肿瘤细胞来源的热休克蛋白gp96-多肽复合物在体外诱导小鼠脾淋巴细胞的特异性的细胞毒性T细胞(CTL)的产生及其抗肿瘤效应。方法利用蛋白提取纯化技术、细胞培养技术、流式细胞术、CCK-8法、免疫荧光技术等。结果经鉴定获得纯化的热休克蛋白;流式细胞仪检测表明,经gp96-肽复合物诱导后的CD8T细胞比例达到近70%,远远高于对照组的35%、26%;该活化的CTL细胞在效靶比为50∶1时的肿瘤杀伤率达72%与对照组相比具有统计学意义;激光共聚焦显微镜观察证实实验诱导组的培养上清能诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学改变。结论肿瘤来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能诱导小鼠脾淋巴细胞的CTL反应,该活化的CTL具有特异性抗H22肿瘤细胞的免疫保护作用并能分泌免疫活性物质诱导H22肿瘤细胞凋亡。     

CONSORT声明在护理临床科研设计中的应用

科学而严谨的科研设计是获得可靠临床结论的前提和基础。循证护理概念的提出,对实验设计也提出了更高的要求。高标准的临床设计所产生的结论证据性也就越强。CONSORT声明是一个指导研究者提高报告质量的标准,其中对临床设计也进行了规范。本文结合CONSORT声明,以“生理盐水与蒸     

纳米细菌纤维素的制备及其超微结构镜观察

制备细菌纤维素,观察纳米细菌纤维素的超微结构特点。用红茶菌做菌种,通过茶水发酵培养制备纳米细菌纤维素,利用扫描电镜、透射电镜观察其超微结构特点。结果表明:新鲜制备的细菌纤维素膜为无色透明胶冻状膜,表面光滑;经预处理后呈乳白色半透明胶冻状;扫描电镜下可见细菌纤维素膜呈疏松的网状结构,纤维素微纤丝从菌体胞壁小孔中分泌出来;透射电镜下,经负染后,在深色的背景中间可见浅色细丝状。说明细菌纤维素具有良好的纳米纤维网络特征,在生物医学领域具有良好的、广泛的应用前景。     

以拉力参数构建兔腰骶神经牵拉损伤模型***★◆

背景：神经根牵拉损伤是腰椎手术失败综合征的近期发病原因之一，但确切的病理机制尚未经证实。 目的：建立一种不同程度的腰骶神经根牵拉损伤动物模型，探讨脊髓、神经根牵拉损伤后光镜和电镜改变。 设计、时间及地点：随机对照，形态学动物实验，于2004-04/2006-10在南通大学第二附属医院中心实验室和南通大学江苏省神经再生重点实验室完成。 材料：清洁级健康12周龄雄性大白兔40只，随机分为对照组、轻度牵拉组、中度牵拉组、重度牵拉组4组，每组10只。 方法：轻、中、重度牵拉组动物全椎板切除显露双侧S1神经根，用测力神经根拉钩分别以0.4，1和1.8 N的拉力水平牵拉左侧S1神经根造成神经根和脊髓的牵拉性损伤，分别定义为轻、中和重度牵拉，时间持续10 min。对照组不牵拉。 主要观察指标：术后2周对受牵拉节段脊髓，两侧S1神经根行光镜和透射电镜检测神经元和髓鞘。 结果：轻度牵拉组牵拉侧前角个别神经元稍肿胀，神经元及神经纤维形态基本上正常，个别白质小片状脱髓鞘样改变，神经根髓鞘和轴索轻度水肿，脱髓鞘不明显；中度牵拉组白质有脱髓鞘改变，神经纤维排列紊乱，轴索崩解、断裂；灰质神经元水肿明显加重，前角运动神经原细胞尼氏体消失，核固缩、深染，神经根髓鞘和轴索水肿，局部轻度脱髓鞘改变；重度牵拉组牵拉侧白质为不规则的大片脱髓鞘区，前角运动神经元胞体固缩、变形、核深染，神经根有髓神经纤维萎缩、数目减少,重度脱髓鞘改变。 结论：以拉力为参数可以稳定地建立不同程度的腰骶神经根牵拉性损伤动物模型，术后神经根和脊髓的病理分级改变与牵拉损伤程度一致。     

肿瘤源性热休克蛋白gp96诱导淋巴细胞反应及其抗肿瘤效应

目的：研究肿瘤细胞来源的热休克蛋白gp96-多肽复合物在体外诱导脾淋巴细胞的特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应.方法：利用蛋白纯化技术、SDS-PAGE凝胶电泳及Western blot法分离纯化、鉴定gp96-多肽;通过流式细胞术、免疫荧光技术、CCK-8法等检测经gp96多肽诱导的CD8^＋T细胞及其抗肿瘤效应.结果：经鉴定获得纯化的热休克蛋白;流式细胞仪检测表明,经gp96-肽复合物诱导后的CD8^＋T细胞比例达到近70%,远远高于对照组的35%、26%;该活化的CTL细胞在效靶比为50：1时的肿瘤杀伤率达72%,与对照组相比具有统计学意义;激光共聚焦显微镜观察证实实验诱导组的培养上清能诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学改变.结论：肿瘤来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能诱导小鼠脾淋巴细胞的CTL反应,该活化的CTL具有特异性抗H22肿瘤细胞的免疫作用,并能分泌免疫活性物质诱导H22肿瘤细胞凋亡.     

gp96-肽复合物体外对脾淋巴细胞基因表达及其抗肿瘤效应研究

目的： 研究H22肿瘤细胞来源的gp96-多肽复合物体外对小鼠脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ mRNA表达的影响；并观察其培养上清诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学变化。方法： 利用蛋白提取纯化技术提取H22肿瘤细胞来源的热休克蛋白gp96，Western blotting法鉴定所得目的蛋白；RT-PCR法检测细胞TNF-α和IFN-γ mRNA 的表达水平；激光共聚焦显微镜及透射电子显微镜观察细胞培养上清诱导H22肿瘤细胞的形态学变化。结果： 经鉴定获得纯化的热休克蛋白gp96；gp96肽复合物诱导组的脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ mRNA的表达强度（RV）分别为0.20±0.02及0.22±0.01，明显高于对照组的0.11±0.02、0.11±0.01和0.10±0.01、0.11±0.01(P<0.05)；实验诱导组的培养上清能诱导H22肿瘤细胞凋亡的形态学改变。结论: H22肿瘤来源的热休克蛋白gp96-肽复合物能在体外增强小鼠脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ mRNA 的表达；同时，经诱导的脾细胞能分泌免疫活性物质诱导H22细胞凋亡。     

肝癌患者PBMC中TH1/TH2类细胞因子mRNA表达

目的探讨TH1类细胞因子IL-2、IFN-γ及TH2类细胞因子IL-4mRNA在Ⅰ期和Ⅱ期肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达模式,并观察IL-2、IFN-γmRNA在手术前后的表达变化。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定8例Ⅰ期和10例Ⅱ期原发性肝癌患者手术前后及15例健康人外周血中IL-2、IFN-γ的表达,并用凝胶图像分析系统进行图像分析。结果在18例肝癌患者中,IL-2、IFN-γmRNA的表达率分别为16.7%、5.6%,低于IL-4的表达率88.9%(P<0.05),呈现明显的TH2偏移状态,且IL-2、IFN-γ的表达强度在0.10~0.11之间,也远低于IL-4的0.21~0.22;在8例Ⅰ期肝癌患者中,术前有25.0%(2/8)表达IL-2mRNA,12.5%(1/8)表达IFN-γ,高于对照组的13.3%(2/15)、5.6%(1/15);手术治疗后两者的表达率分别是50.0%、37.5%,高于术前组;术前组及正常对照组两种细胞因子mRNA表达强度(0.10~0.12)明显低于术后组的0.20~0.22(P<0.05)。另外,10例Ⅱ期患者手术前后术均无IFN-γm...