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1.
目的 调查引起云南省普洱市思茅区大面积野鼠自毙疫情的病原体,以便为采取相应措施提供科学依据。方法 通过现场流行病学调查,采集119只自毙野鼠样本,解剖取脏器进行鼠疫耶尔森菌病原体分离、噬菌体裂解实验、F1抗原、caf1基因等病原学、免疫学及分子生物学检测,以排除鼠疫。同时,脏器样本接种绵羊血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、沙氏琼脂培养基等营养培养基和选择性培养基,分离培养细菌、真菌类病原体;选取10只组织腐败较轻的自毙鼠,按肺组织、脑组织、腹腔脏器组织分为3份样本后,研磨、离心,再以0.22μm滤膜过滤,收集离心上清液、滤膜滤出液和滤膜截留残渣共9份样本,腹腔接种雄性、体质量30~40g昆明小鼠,每组2只,每只0.5ml。另接种0.5ml Hank’s液2只鼠作对照。共接种昆明小鼠20只。死亡小鼠解剖观察病理变化,取脏器组织接种上述培养基进行细菌分离培养。结果 鼠疫耶尔森菌病原学、免疫学和分子生物学检测均为阴性;自毙野鼠脏器镜检、分离培养及接种实验动物均检出G- 短小杆菌,经梅里埃VITEK 2GN、GP卡、16S rRNA扩增鉴定为多杀巴斯德菌 (Pasteurella multocida,Pm) ,概率为99%;分离到的G+粗大杆菌为腊样芽孢杆菌,概率为99%。结论 多杀巴斯德菌可能是这次发生野鼠大面积死亡的病原菌。该病原体的生物学特性及危害值得进一步关注。 相似文献
2.
目的评价检测鼠疫抗原及抗体胶体金免疫层析试纸条(G ICA及RG ICA)对现场材料的检测效果。方法采用G ICA分别对采自云南省的607份血清标本(查鼠疫抗体)及572份鼠脏器标本(查鼠疫抗原)进行检测,同时以血凝试验(IHA及R IHA)与酶联试验(ELISA及F1-ELISA)作为对照。结果(1)在对607份血清标本的检测中,G ICA、IHA及ELISA三种方法的符合率中度,而G ICA的敏感性比IHA与ELISA分别高111%和90%;(2)在对572份鼠脏器标本的检测中,RG ICA、R IHA及F1-ELISA三种方法的符合率中度,而RG ICA的敏感性比R IHA与F1-ELISA分别高100%和14.3%。结论检测鼠疫的G ICA及RG ICA特异性强、灵敏度高、简便快速,有较大的推广应用价值。 相似文献
3.
目的 重组表达鼠疫耶尔森菌纤维蛋白溶解酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)蛋白及其特异性片段并检测其免疫反应性.方法 以鼠疫EV76株为模板,PCR扩增pla、pla-c基因,并与质粒原核表达载体(prokaryotic expression vector,pET)32a(+)连接,将pET32a(+)-pla、pET32a(+)-pla-c分别转化E.coli BL21(DE3)诱导表达;产物经镍离子金属螯合亲和层析纯化,免疫印迹(Western blot)法鉴定其免疫反应性.结果 所表达的Pla蛋白相对分子质量(Mr)为52.8×103,以包涵体形式存在;Pla-c蛋白Mr为24.0×103,以可溶形式存在;这两个蛋白质均可与鼠疫免疫血清产生特异结合反应.结论 所表达的鼠疫菌Pla及其特异性片段具有免疫反应性,为辅助诊断鼠疫提供了选择. 相似文献
4.
目的:探讨杂交瘤细胞染色体形态、数目与抗体分泌能力及稳定性的关系。方法:对我室融合成功的10株杂交瘤细胞,采用秋水仙素法制备染色体,分别计数100个完整的中期分裂相细胞,并观察其形态。制备腹水和收集细胞培养上清液,间接ELISA法检测抗体效价。结果:经染色体计数与分析,10株杂交瘤细胞中,7株瘤株细胞间染色体形态一致,分散好,既有端着丝点染色体,也见中间着丝点染色体,染色体数目的标准差小于5.0,腹水和细胞培养上清抗体效价高,分泌稳定性好;3株染色体数差异大、标准差大的瘤株中,2株抗体效价低,分泌不稳定。结论:杂交瘤细胞染色体形态、数目与其分泌单克隆抗体的能力和稳定性有关,进行染色体分析有利于了解瘤株特性,可作为筛选高效、稳定瘤株的参考依据。 相似文献
5.
新近发现环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)辅激活物(TORC2)是启动糖异生的关键调控因子。空腹状态下,胰升糖素使TORC2去磷酸化,进入核内与CREB结合启动糖异生相关基因的转录。TORC2的磷酸化与去磷酸化是决定糖异生基因启动的关键环节。因此,抑制TORC2的脱磷酸或进入核内,可以减少肝糖生成,从而有望使2型糖尿病得到有效治疗。 相似文献
6.
目的 调查与分析云南省梁河县鼠疫疫源地室内鼠密度和蚤指数,评估鼠疫发生的潜在危险.方法 根据历史鼠疫监测资料,2007年8-9月在云南省梁河县选择30个鼠疫疫源村,对每个村的全部住户进行编号后,随机抽取20户,放置鼠笼和粘蚤纸用于捕获鼠和蚤,计算鼠密度、染蚤率、蚤指数、中位数.结果 黄胸鼠和臭鼷鼱分别捕获133和33只,平均每村捕鼠5只,平均鼠密度为2.8%(166/6000).染蚤鼠101只,染蚤率为60.8%(101/166).收集鼠体蚤344匹,其中印鼠客蚤296匹.缓慢细蚤48匹.鼠体蚤指数为2.1(344/166).捕获地面游离蚤315匹,地面游离蚤指数为0.026(315/11 888).平均每村5.5匹.其中,猫栉首蚤指明亚种和印鼠客蚤占了地面游离蚤总数的97.8%(308/315).地面游离蚤和鼠体蚤的蚤种构成不一致(精确概率法,P<0.01),鼠体蚤和鼠密度呈现正相关(r=0.68,P<0.01),地面游离蚤与鼠密度和鼠体蚤间均无相关关系(r=-0.17、0.32,P均>0.05).使用诱饵油炸猪皮3600个笼·夜,共捕获105只鼠,使用诱饵油条2400个笼·夜,捕获46只鼠,油炸猪皮的捕鼠效果明显优于油条(χ2=5.59,P<0.05).结论 梁河县鼠疫疫源村室内鼠以黄胸鼠为主,印鼠客蚤和猫栉首蚤指明亚种分别是鼠体蚤和地面游离蚤的优势种.勐宋、邦读村和汤加屯仍有发生鼠疫的可能性. 相似文献
7.
目的 调查处于滇川交界疑似鼠疫疫源地的华坪县鼠疫流行情况,为当地鼠疫的预防控制工作提供依据。方法 采集宿主动物及其体表寄生蚤样本,采集鼠疫指示动物血清,采用间接血凝实验(IHA)和酶联免疫实验(ELISA)两种方法对血清样本进行鼠疫F1抗体检测,采用反向间接血凝实验(RIHA)对自毙鼠脏器进行鼠疫F1抗原检测,对鼠脏器和蚤样本进行鼠疫菌分离培养。同时,对当地近年发生自毙鼠疫情、可疑病例情况进行回顾性调查。结果 共捕获小兽3目4科9属17种240只,居民区捕获率为1.58%,优势种为小家鼠(47.37%,9/19)和褐家鼠(26.32%,5/19);农耕区捕获率为10.85%,优势种为卡氏小鼠(23.08%)、黑缘齿鼠(12.22%)、灰麝鼩(11.76%)、白尾梢麝鼩(11.31%)、锡金小鼠(10.41%)和齐氏姬鼠(10.41%)。共检获小兽寄生蚤5科7属7种26匹,小兽平均染蚤率为10.83%,总蚤指数为1.53,居民区优势种为缓慢细蚤和印鼠客蚤相对较多,农耕区优势种为穗缘端蚤中缅亚种、近端远棒蚤二刺亚种和方叶栉眼蚤。共采集指示动物血清531份,其中犬血清491份、猫血清40份,... 相似文献
8.
目的:构建绿色荧光蛋白(GFP)标记的人脂联素(Adiponectin)真核表达质粒。方法:用本实验室已构建好的人脂联素克隆载体pMD18—T/Adiponeetin为模板,结合已设计好的特异性引物。采用PCR方法克隆出Adiponectin目的片段,将该目的片段再连至真核表达载体pcDNA3.1/CT—GFP—TOPO上,转化入TOP10感受态细胞中,通过筛选得到融合有绿色荧光蛋白的重组质粒pcDNA3.1/CT—GFP—TOPO—Adiponectin。结果:PCR获得长度为736bp的目的片段,经pcDNA3.1/CT—GFP-TOPO真核表达载体连接、筛选及序列分析后,证实所插入的目的片段与genebank检索的人脂联素cDNA序列(Accession NM-004797)100%配。结论:绿色荧光蛋白标记的人脂联素真核表达载体构建成功。 相似文献
9.
李某,男,75岁。2004年6月26日诊。下肢发凉、麻木、酸沉,活动后疲乏,肌肉疼痛,间歇性跛行。下肢水肿,按之凹陷,肤色紫黯。自汗,面色苍白,舌质淡紫,舌苔黄厚,舌下络脉青紫且粗张,脉细涩。在某市级医院诊断为动脉硬化性闭塞症,伴高血脂、糖尿病及心脑血管动脉粥样硬化。先后静脉滴注环磷酰胺、脉络宁及活血化淤通络中药,疗效均不显著。笔者纵观患者脉症,认为属气虚寒痛。方用自拟益气止痛汤:人参10 g,黄芪20 g,白术15 g,附子10 g(先煎),白芍20 g,熟地10 g,鸡血藤30 g,炙甘草6 g,水煎服。五剂后,诸症有所缓解。效不更方,又进五剂。但复诊时,腿疼又加重。此为病重药轻,遂加党参20 g,黄芪加至30 g,白术加至20 g,附子加至15 g(先煎),服后疗效理想。在后续的治疗中,气虚乏力加重时,加重人参或党参之量。寒痛加重时,加重附子之量,最多加至35 g。舌苔黄厚时,加重生白药之量。共服30 g余剂而愈。按:动脉硬化性闭塞症,属中医“脉痹”范畴。西医认为是动脉粥样硬化病变及周围动脉引起的慢性闭塞的一种疾病,多发于50岁以上者。目前西医治疗以降脂、扩张血管、抗凝及溶栓为主;中医治疗以活血化瘀通络... 相似文献
10.
目的 了解滇西地区室内鼠形动物巴尔通体感染状况。方法 在滇西地区8个州(市)抽取10个县(市、区)40个自然村,随机抽取800户家庭(每村20户),进行室内捕鼠,采集鼠脾脏标本并提取基因组DNA,运用聚合酶链反应(PCR)扩增巴尔通体枸橼酸合酶(gltA)基因,阳性者进行测序分析。结果 捕获9种421只鼠形动物,采集脏器样本404份,PCR扩增阳性64份,阳性率为15.84%。9种鼠形动物中仅黄胸鼠和褐家鼠检出阳性,阳性率分别为23.05%(62/269)和8.70%(2/23)。10个县(市、区)中6个检出阳性。基因分析表明携带的巴尔通体至少存在6种基因型:B. tribocorum、B. queenslandensis、B. elizabethae、B. rochalimae及2个可能的新型。结论 滇西地区室内鼠形动物感染巴尔通体,且呈现基因多样性特征,部分县(市)阳性率较高,需加强监测和预防控制。 相似文献