滇西地区室内鼠形动物巴尔通体感染情况调查研究

目的 了解滇西地区室内鼠形动物巴尔通体感染状况。方法 在滇西地区8个州(市)抽取10个县(市、区)40个自然村,随机抽取800户家庭(每村20户),进行室内捕鼠,采集鼠脾脏标本并提取基因组DNA,运用聚合酶链反应(PCR)扩增巴尔通体枸橼酸合酶(gltA)基因,阳性者进行测序分析。结果 捕获9种421只鼠形动物,采集脏器样本404份,PCR扩增阳性64份,阳性率为15.84%。9种鼠形动物中仅黄胸鼠和褐家鼠检出阳性,阳性率分别为23.05%(62/269)和8.70%(2/23)。10个县(市、区)中6个检出阳性。基因分析表明携带的巴尔通体至少存在6种基因型:B. tribocorum、B. queenslandensis、B. elizabethae、B. rochalimae及2个可能的新型。结论 滇西地区室内鼠形动物感染巴尔通体,且呈现基因多样性特征,部分县(市)阳性率较高,需加强监测和预防控制。     

鼠疫菌caf1基因特异性片段的克隆表达及其抗原与抗体反应

目的 克隆表达鼠疫菌caf1基因上的特异性片段并检测.方法 分别选取F1上C端(caf1-C)及N端(caf1-N)两段B细胞表位进行克隆表达;PCR扩增目的基因,并与表达质粒pET32a(+)进行连接,重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)并诱导表达;表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化,并以Western-blot法检测其抗原与抗体反应.结果 分别诱导表达出大小为26000的Caf1-C和25000的Caf1-N两个片段,2个重组蛋白均以可溶形式存在,并与鼠疫免疫血清有良好的反应.结论 克隆表达出具有抗原与抗体反应的鼠疫菌F1抗原上的两段B细胞表位,为鉴定是否是F1位点交叉奠定了基础.     

浅谈护理类学生实习特点与培养措施

临床实习是进入工作的基础,是护士教育的重要阶段,提高临床实习效果是提高护理质量的首要环节.笔者根据现代教育理论,结合护理工作特点,在参考自身工作经验的基础上,对护理实习过程的问题进行了归纳分析,并针对这些问题,笔者总结了一些相应的措施,从多个方面对实习学生进行引导与强化.     

一种新的葡萄糖代谢关键调控因子:TORC2

新近发现环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)辅激活物(TORC2)是启动糖异生的关键调控因子。空腹状态下,胰升糖素使TORC2去磷酸化,进入核内与CREB结合启动糖异生相关基因的转录。TORC2的磷酸化与去磷酸化是决定糖异生基因启动的关键环节。因此,抑制TORC2的脱磷酸或进入核内,可以减少肝糖生成,从而有望使2型糖尿病得到有效治疗。     

胶体金免疫层析试纸条对云南鼠疫现场材料的检测

目的评价检测鼠疫抗原及抗体胶体金免疫层析试纸条(G ICA及RG ICA)对现场材料的检测效果。方法采用G ICA分别对采自云南省的607份血清标本(查鼠疫抗体)及572份鼠脏器标本(查鼠疫抗原)进行检测,同时以血凝试验(IHA及R IHA)与酶联试验(ELISA及F1-ELISA)作为对照。结果(1)在对607份血清标本的检测中,G ICA、IHA及ELISA三种方法的符合率中度,而G ICA的敏感性比IHA与ELISA分别高111%和90%;(2)在对572份鼠脏器标本的检测中,RG ICA、R IHA及F1-ELISA三种方法的符合率中度,而RG ICA的敏感性比R IHA与F1-ELISA分别高100%和14.3%。结论检测鼠疫的G ICA及RG ICA特异性强、灵敏度高、简便快速,有较大的推广应用价值。     

鼠疫耶尔森菌纤维蛋白溶解酶原激活因子蛋白及其特异性片段的原核表达

目的 重组表达鼠疫耶尔森菌纤维蛋白溶解酶原激活因子(Plasminogen activator,Pla)蛋白及其特异性片段并检测其免疫反应性.方法 以鼠疫EV76株为模板,PCR扩增pla、pla-c基因,并与质粒原核表达载体(prokaryotic expression vector,pET)32a(+)连接,将pET32a(+)-pla、pET32a(+)-pla-c分别转化E.coli BL21(DE3)诱导表达;产物经镍离子金属螯合亲和层析纯化,免疫印迹(Western blot)法鉴定其免疫反应性.结果 所表达的Pla蛋白相对分子质量(Mr)为52.8×103,以包涵体形式存在;Pla-c蛋白Mr为24.0×103,以可溶形式存在;这两个蛋白质均可与鼠疫免疫血清产生特异结合反应.结论 所表达的鼠疫菌Pla及其特异性片段具有免疫反应性,为辅助诊断鼠疫提供了选择.     

山丘型传播阻断地区血吸虫病突发疫情的应急处置

我国山丘型血吸虫病流行区主要分布在四川、云南2省，虽然山丘型流行区血吸虫病防治工作取得了显著成效，但局部地区仍存在血吸虫病疫情回升的风险。本文对2011、2013年发生在云南省传播阻断地区的两起血吸虫病突发疫情处置事件进行分析，指出目前山丘型流行区血吸虫病死灰复燃的风险依然存在，并提出了相关建议。     

鼠疫耶尔森氏菌Pla蛋白的分离纯化与质谱分析

目的建立一种从鼠疫耶尔森氏菌疫苗株EV76中分离纯化纤维蛋白酶原激活因子（Pla）的方法。方法采用超声破碎与硫酸铵盐析结合的方法初步提取Pla,经CHT陶瓷羟基磷灰石层析分离纯化,所获取的Pla进行质谱分析及Western blot实验。结果菌悬液超声破碎后上清以0~10%饱和硫酸铵沉淀,获得含有相对分子质量（Mr）约为31 000、35 000、37 000的3条Pla蛋白带,约占蛋白总量33%;CHT柱层析后,3条带约占蛋白总量80%。经质谱分析,在Mr约为31 000、35 000的条带中含有Pla,Pla单克隆抗体能特异性地识别该蛋白。结论采用超声破碎结合硫酸铵盐析的方法可从鼠疫菌中提取Pla,CHT柱层析可达到基本纯化,获得的样品经质谱分析和Western blot实验证实为Pla蛋白。     

浅谈狂犬疫苗预防接种中的几个问题

狂犬病至今仍是一种死亡率极高的急性人兽共患传染病，死亡率达100％。人狂犬病通常由病兽以咬伤方式传给人。为了防上狂犬病的发生，在暴露后一般采用接种疫苗的方式来预防该病的发生。云南省地方病防治所门诊已开展此项工作多年，现对1998～2003年的相关资料进行分析，并结合实际工作中遇到的问题，将结果报告如下：     

14株钩端螺旋体混生株的发现

云南省孟连县是钩体血清群(型)较为复杂的地区之一,至今已检出14个血清群、22个血清型。作者在复核分离自该县的75株钩体菌株群别时,发现14株钩体的菌群与新分离时的鉴定发生了变更。14株钩体中,12株分离自病人血液、2株分离自鼠肾。第一次初定与第二次复定的时间相隔一年以后,菌群发生了变更,时隔半年后,又做了第三次复检工作,结果与第二次相同。从14株钩体三次定群结果发现:14株钩体均为混生株,混生率为18.7％,其中:黄疸出血群1株变为赛罗群;爪哇群6株变为波摩那群1株、赛罗群4株、巴达维亚群1株;致热群3株变为赛罗群2株、七日热与赛罗群交叉1株;赛罗群3株变为爪哇群2株、巴达维亚群1株;塔拉索夫群1株变为巴达维亚群巴叶赞型