钙磷脂结合蛋白Ⅱ在人肝细胞癌中的表达

目的：应用抑制差减杂交技术（supression subtractive hybridization,SSH）结合cDNA芯片筛选人肝细胞癌中差异表达基因.进一步探讨所筛选出的钙磷脂结合蛋白（annexinⅡ）在肝细胞中的表达及作用.方法：以肝癌组织和非肿瘤肝组织进行SSH,构建正、反向差减杂交文库,差减片断的PCR产物制备cDNA芯片,筛选出肝癌组织中差异表达基因.进一步应用荧光实时定量技术验证芯片结果,免疫组化方法分析annexinⅡ在肝细胞癌和正常肝组织中的表达.结果：成功构建了肝细胞癌差减杂交文库.芯片结果显示annexinⅡ在肝细胞癌中高表达并经荧光实时定量技术证实.免疫组化结果表明annexinⅡ在肝细胞癌和癌旁肝硬化组织中高表达,在正常肝组织中不表达（P＜0.05）.在低分化肝细胞癌中annexinⅡ的表达有增高趋势.结论：SSH方法构建的肝细胞癌差减杂交文库富含肝细胞癌差异表达基因.肝细胞癌中高表达基因annexin Ⅱ可能与肝细胞的恶性转化,肝癌细胞的转移和侵袭能力有关.     

人源日本血吸虫Fab抗体库的构建及抗独特型抗体的筛选、鉴定

目的:构建人源日本血吸虫Fab抗体库,筛选出日本血吸虫抗独特型抗体并进行初步鉴定。方法:以3名晚期血吸虫患者切除的脾脏为源,构建人源日本血吸虫Fab抗体库。并以日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)及成虫抗原(SWAP)免疫鼠血清IgG包板进行筛选,经ELISA鉴定后,对阳性克隆进行可溶性表达。结果:构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,库容为4.3×106,经核苷酸序列分析,证实插入片段为Fab基因片断。经过5轮筛选后,从富集的次级抗体库中随机挑取60个克隆,用ELISA法鉴定得到4个可与免疫鼠血清(Ab1)特异性结合,而不与SEA及SWAP结合的单克隆抗体(A3、B6、C4、C17),其中B6经SDS-PAGE电泳显示插入片断正确。结论:成功构建了人源日本血吸虫Fab抗体库,并从中获得人源日本血吸虫抗独特型抗体B6,为研制用于人体血吸虫病免疫预防的抗独特型抗体疫苗奠定了基础。     

558株铜绿假单胞菌耐药情况分析

近期，我们对2004年分离的558株铜绿假单胞菌（PA）的耐药情况进行了分析。现报告如下。材料与方法：558株PA均分离自2004年我院住院患者的痰、脓、胸腹水等标本。质控菌株：PAATCC27853。     

电针结合牵引治疗腰椎间盘突出症58例临床观察

目的:观察电针结合牵引治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法:116例病例随机分为两组,每组58例。两组患者均采用牵引治疗,治疗组在此基础上结合电针治疗,15d为1个疗程,2个疗程后观察疗效。结果:对照组治疗后总显效率为87.9%,治疗组总有效率为98.3%,两组患者显效率比较有显著性差异(P<0.01)。结论:电针结合牵引治疗腰椎间盘突出症具备解除突出椎间盘对神经的压迫,消除无菌性炎性水肿,改善神经功能等多方面作用。     

Survivin在卵巢癌中表达的研究

目的：探讨凋亡抑制基因Survivin在卵巢癌中的表达及其与临床病理资料的关系。方法：采用RT-PCR和Western blot检测20例卵巢癌及正常卵巢组织中survivivn基因的表达情况。结果：通过统计分析，发现Survivin在卵巢癌组织中表达明显高于正常组织。结论：Survivin可能在卵巢癌的发生发展中起一定的作用。     

彩超诊断外伤性下肢假性动脉瘤1例

患者,男,37岁。7个月前因胫腓骨开放性骨折, 行清创+骨外固定架固定术后,有一枚钉孔时有渗血, 加压包扎后好转出院。时有周期性出血,间隔5～7天, 每次量约70ml;每一次小腿剧烈活动,此钉孔亦有少 量渗血,均经加压包扎后好转。同时发现患侧小腿增 粗,遂入院。行彩超检查:于右胫骨外侧距皮肤表面 1.05cm处探及大小为7.8cm×4.5cm ×6.8cm梭形 包块回声,边界清,有包膜,以液性暗区为主,见密 集点状强回声,呈漩涡状。CDFI显示内部血流信号, 其外上有一破口,宽约0.8cm,破口处血流呈涡流状, PW呈双相血流频谱,收缩期流速较高,高达5m/s,近 侧腘动脉血流信号未见异常。足背动脉信号较弱,压 迫近侧腘动脉后,PW测破口处血流速度明显下降(彩 图12见Ⅳ页)。     

宫颈锥切术在重度宫颈上皮内瘤变诊治中的意义简

目的探讨重度宫颈上皮内瘤变(CIN)的临床特点及诊治方法。方法回顾性分析2012年1月至2013年2月在南京市妇幼保健院阴道镜下活检诊断为CINⅢ的72例患者的临床资料,采用自身对照法,对阴道镜下活检病理、宫颈锥切术后病理以及子宫切除术后病理行对照研究。结果宫颈锥切术与阴道镜下检查的病理结果完全符合者54例(75%),不符合者18例(25%)。锥切术后病理诊断级别下降者16例(22.2%),浸润癌2例(2.8%)。34例患者再次行子宫切除术,其中27例(79.41%)术后病理转阴,7例病理诊断级别降低。结论宫颈锥切术是CINⅢ首选的治疗方法。是否进一步治疗应根据患者年龄、切缘状态、生育要求等多方面个体化、综合考虑以决定。     

靶向Trop-2 CAR-T细胞的制备及其体外对卵巢癌细胞杀伤作用的研究

目的：制备靶向人滋养层细胞表面抗原2（human trophoblast cell surface antigen 2 , Trop-2)的嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cell , CAR-T）,观察Trop-2 CAR-T细胞在体外对卵巢癌细胞增殖的影响。方法：运用分子克隆及基因重组技术构建Trop-2 CAR;采用Western blot检测Trop-2 CAR在293T细胞中的表达;CCK-8法检测Trop-2 CAR-T细胞对卵巢癌细胞增殖的影响;ELISA检测细胞因子分泌的变化。结果：酶切鉴定及测序分析结果表明,Trop-2 CAR各基因片段连接正确;Western blot检测结果显示,该质粒能够在293T细胞中有效表达;CCK-8结果显示,制备的Trop-2 CAR-T细胞在体外能明显抑制表达Trop-2的卵巢癌细胞的增殖（P＜0.05）;ELISA检测结果表明Trop-2 CAR-T细胞与表达Trop-2的卵巢癌细胞共培养后,干扰素（interferon-γ,IFN-γ)、白介素（interleukin-2,IL-2)细胞因子分泌增加（P＜0.01）。结论：该研究成功制备了Trop-2 CAR-T细胞,可有效抑制Trop-2表达阳性的卵巢癌细胞的增殖。     

超声诊断双侧腹腔内隐睾合并睾丸肿瘤1例

患者,男,30岁。因下腹部包块触摸疼痛前来就诊。查体:于下腹部,右下腹分别触及包块。病人双侧阴囊内未及睾丸,阴茎发育正常,于1993年结婚,一直未曾生育。 超声检查所用仪器:西门子Sonoline Versa彩色多普勒,用3.5MHz探头常规腹部检查:于下腹部探及一左侧睾丸回声,其体积明显增大,大小约为10.0cm×8.6xm×8.0cm,边界清,形态呈椭圆形,内部呈中等亮度的光点回声,分布不均匀,见小片状低回声。附睾头可见显示,体积增大,于其鞘膜腔内睾丸的上、下方均见液性暗区(图1右)。右下腹探及一右侧睾丸回声,大小为 6.3cm×4.5cm×4.0cm,边界清,内回声不均匀(图1左)。CDFI双侧宰丸内血流信号显示均较丰富。