miRNA-198靶向调控表皮干细胞内FGFR1表达诱导慢性创面形成的机制研究

目的:研究miR-198对慢性创面形成的影响,探讨miR-198靶向调控表皮干细胞内成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1表达的可能机制与相关性。方法:所有大鼠以表皮干细胞培养划分为三组,对照组20只,采用基础饲料,40只复制糖尿病模型大鼠组,共32只建糖尿病大鼠慢性创面模型成功,其中16只为慢性创面组,另外16只通过快速尾静脉注射miR-198抑制剂转染系统溶液,命名为转染抑制载体组,通过免疫组织化学检测表皮干细胞表达,计算慢性创面的愈合率。通过细胞生长曲线测试和细胞周期分析miR-198对表皮干细胞的影响,实时定量PCR检测各组表皮干细胞中FGFR1表达。用Western-blot法检测各组细胞中FGFR1及下游Ras和MAPK蛋白的表达。结果:与对照组比较,慢性创面组miR-198表达量明显增高(P0.01),转染抑制载体miR-198后,表皮干细胞中表达显著性下调(P0.01),细胞周期分析发现慢性创面组会抑制表皮干细胞增殖,转染抑制载体(Anti-miR-198)阻断miR-198后表皮干细胞增殖得到恢复。免疫组化检测显示,慢性创面培养组FGFR1阳性表达数量增加,随着转染抑制miR-198载体的影响,FGFR1在转染抑制载体组表达增加更明显(P0.01)。Westernblot检测显示,在慢性创面模型中,转染抑制载体(Anti-miR-198)后,FGFR1的蛋白表达明显增加,转染抑制载体组Ras和MAPK的蛋白表达明显降低。结论:miR-198可能负向调控表皮干细胞FGFR1,抑制miR-198可以增强表皮干细胞FGFR1表达,加快表皮干细胞增殖和分化,从而能促进慢性创面愈合。     

不同心肌损伤生化标志物检验的临床价值分析

目的分析不同心肌损伤生化标志物检验的临床价值。方法随机选取我院2016年1月~2017年4月收治的心血管疾病患者220例,所有患者均经临床诊断确诊为心肌损伤,对其临床资料进行回顾性分析,对比分析五种常见生化标志物检验心肌损伤灵敏度及CK-MB、Mb、cTnI标志物特异性。结果在五种常见心肌损伤生化标志物灵敏度对比中,其检测灵敏度存在一定不同,其中以pro-BNP的诊断灵敏度为100%,远高于CK-MB、Mb、cTnI和Hcy,相比于其他四种生化标志物检验灵敏度来说差异有统计学意义(P<0.05)。在CK-MB、Mb、cTnI标志物特异性对比中,Mb首次出现时间、峰值时间均明显高于CK-MB和cTnI,组间比较差异有统计学意义(P<0.05),另外,cTnI恢复时间明显低于Mb和CK-MB,经统计学对比分析差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。结论五种生化标志物在检验心肌损伤患者中,在其发生、发展过程中均起到重要作用,与治疗效果之间存在较强的关联性,只有在检测过程中有效互补,才能够最大程度上提高临床诊断价值。     

减低剂量利妥昔单抗联合CHOP方案治疗老年弥漫性大B细胞淋巴瘤的疗效观察

目的 观察减低剂量利妥昔单抗+环磷酰胺+多柔比星+长春新碱+泼尼松(R-CHOP)方案与减低剂量环磷酰胺+多柔比星+长春新碱+泼尼松(CHOP)方案治疗老年弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的临床疗效及不良反应.方法 选取2007年1月至2013年6月,四川省医学科学院·四川省人民医院血液科收治的老年DLBCL患者66例为研究对象.全部患者均经组织病理学及免疫组织化学检测,且均符合《世界卫生组织造血及淋巴组织肿瘤分类(2008年版)》中关于DLBCL的诊断标准,明确诊断为DLBCL.本研究纳入标准:①符合DLBCL的诊断标准;②年龄＞60岁;③Ann Arbor临床分期为Ⅱ～Ⅳ期.排除标准:①患者入院前已接受其他药物或手术治疗;②患者在本次入院前已合并严重的肝、肾疾病,以及恶性肿瘤等严重系统性疾病;③患者对本次治疗应用的药物有变态反应史.采用简单随机法将66例老年DLBCL患者分为2组,分别为减低剂量R-CHOP方案化疗组(n=27)与减低剂量CHOP方案化疗组(n=39).66例初治老年DLBCL患者66例应用减低剂量CHOP或R-CHOP方案进行化疗,每例患者治疗至少3个周期评估疗效,能够耐受减低剂量R-CHOP或CHOP方案的老年DLBCL患者,行化疗4～6个周期,即1个疗程.对老年DLBCL患者进行近期治疗反应的评估,并随访观察总生存(OS)率,无进展生存(PFS)率及无事件生存(EFS)率.并观察老年DLBCL患者接受减低剂量CHOP或R-CHOP方案进行化疗后的不良反应.本研究遵循的程序符合四川省医学科学院·四川省人民医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,征得受试对象的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书.两组患者年龄、性别构成比等一般临床资料比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结果 ①减低剂量R-CHOP方案化疗组27例老年DLBCL患者中,1例患者因合并症而终止化疗,其余26例患者化疗后的完全缓解(CR)率为69.2％(18/26),部分缓解(PR)率为19.2％(5/26),总缓解(OR)率为88.5％(23/26).减低剂量CHOP方案化疗组39例老年DLBCL患者中,1例患者化疗1个周期后猝死,1例化疗后因合并症而终止化疗,其余37例患者化疗后的CR率为43.2％(16/37),PR率为21.6％(8/37),OR率为64.7％(24/37).减低剂量R-CHOP方案化疗组CR率、OR率均高于减低剂量CHOP化疗方案组,且差异有统计学意义(x2=4.15、4.49,P＜0.05);但两组患者PR率相比,差异却无统计学意义(x2=0.05;P＞0.05).②本组中位随访时间为42个月,随访率为95.5％.减低剂量R-CHOP方案化疗组可评估的26例老年DLBCL患者的3年PFS率为53.8％(14/26),3年EFS率为57.7％(15/26),3年OS率为80.8％(21/26).减低剂量CHOP方案化疗组可评估的37例老年DLBCL患者的3年PFS率为51.4％(19/37),3年EFS率为51.4％(19/37),3年OS率为56.8％(21/37).减低剂量R-CHOP方案化疗组老年DLBCL患者3年OS率高于减低剂量CHOP方案化疗组患者,且差异有统计学意义(x2=3.96,P＜0.05);两组患者3年PFS率、3年EFS率相比,差异却均无统计学意义(x2=0.04、0.25,P＞0.05).③两组老年DLBCL患者接受减低剂量CHOP或R-CHOP方案进行化疗后常见化疗相关不良反应为粒细胞计数减低、血小板计数减低、贫血、合并感染、胃肠道反应、肝功能异常、心脏不良反应.减低剂量R-CHOP方案组与减低剂量CHOP方案化疗组不良反应率分别为38.5％(10/26)与40.5％(15/37),两者相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论与减低剂量CHOP化疗方案相比,减低剂量R-CHOP化疗方案可以提高老年DLBCL患者的OR率、CR率、并提高OS率,可作为初治老年DLBCL患者的化疗方案之一.     

兔肝VX2移植瘤门静脉阻断模型的建立及其多层螺旋CT评价

背景:临床研究发现肝癌门静脉阻断有利于抑制肝癌的生长,促进未阻断肝组织的代偿性增生,并降低经门静脉途径的转移,目前尚需动物实验进一步验证。目的:探讨兔肝VX2移植瘤门静脉阻断模型的建立方法,及其多层螺旋CT评价价值。)设计:随机分组设计、动物实验。单位:解放军第三军医大学新桥医院放射科。材料:实验于2002-07/2005-01在第三军医大学新桥医院影像学实验室完成。选择新西兰大白兔40只,随机数字表法分为4组,每组10只,门静脉阻断即刻移植瘤体组、瘤体移植3周后门静脉阻断组、阴性对照组、阳性对照组。方法:采用开腹包埋接种法移植兔肝VX2肿瘤,分别进行门静脉阻断后即刻移植瘤体和移植瘤体生长3周后行门静脉阻断,同时设立阴性对照组(门静脉左外支行假手术阻断,兔肝左外叶假性包埋接种)、阳性对照组(移植瘤体未行门静脉阻断)。所有实验兔均行兔多层螺旋CT检查。主要观察指标:门静脉阻断后肝大体变化、瘤体变化、肿瘤转移情况,肝动脉、门静脉各级分支的多层螺旋CT血管成像显示率,肝血流量、血容量、平均通过时间、血管表面通透性和肝动脉灌注分数。结果:纳入动物40只,均进入结果分析。①门静脉阻断即刻移植瘤体组于门静脉分支结扎术3周后均未见瘤体生长。瘤体移植3周后门静脉阻断组动物左内叶明显萎缩,肿瘤的生长明显受抑制,其瘤体最大径明显小于阳性对照组[分别为(2.55±0.46),(3.59±0.37)cm,t=5.57,P<0.001]。瘤体移植3周后门静脉阻断组肝内转移及肺转移发生率也明显少于阳性对照组(分别为10%,40%和100%,90%);但两者的邻近转移率差异却无显著性意义。②多层螺旋CT血管成像检查对Ⅲ级以上肝动脉分支的显示率明显低于Ⅰ、Ⅱ级肝动脉分支的显示率(分别为40%,100%,70%,P<0.05)。门静脉各级分支的显示率差异无显著性意义(P>0.05)。③门静脉阻断即刻移植瘤体组、瘤体移植3周后门静脉阻断组肝血流量、血容量、平均通过时间和血管表面通透性值均较相应对照组降低,但肝动脉灌注分数值均明显增高。结论:门静脉左外支结扎是兔肝VX2移植瘤门静脉阻断的理想模型。多层螺旋CT在兔肝门静脉阻断效果的评价中起着重要作用。     

不同HBV-DNA载量乙型肝炎肝硬化患者血小板参数及D-二聚体检测的临床意义

目的 探讨不同乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量乙型肝炎肝硬化患者血小板参数及D-D变化情况. 方法 以2015年1月至2016年12月间我院收治的乙型肝炎肝硬化患者60例作为研究对象,所有患者均进行HBV-DNA病毒载量检测、血小板参数检测以及D-二聚体(D-D)检测.将乙型肝炎肝硬化患者按照HBV-DNA载量数量级进行分组,对各组间血小板参数及D-D表达水平进行比较.另收取同期于我院进行常规体检的健康人25例作为对照组.结果 乙型肝炎肝硬化患者血小板计数(PLT)、血小板比容(PCT)、明显低于对照组,平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)及D-D明显高于对照组;检测下限组、低载量、中载量及高载量组患者之间血小板参数及D-D均存在显著差异(P<0.05),并且下限组、低载量、中载量及高载量组患者的PLT和PCT依次逐渐减小,MPV、PDW及D-D依次逐渐增大. 结论 乙型肝炎肝硬化高HBV-DNA载量患者存在明显凝血纤溶功能失衡,提示应对患者进行早期抗病毒干预,以减少病毒复制,维持凝血纤溶平衡.     

小鼠CXCR4腺病毒的构建及其转染对MSCs向受损肝脏归巢的影响

目的:观察小鼠CXCR4腺病毒(Ad-mCXCR4)转染对骨髓间充质干细胞(MSCs)受损肝脏归巢的影响。方法:分离小鼠MSCs并体外扩增、鉴定;从小鼠肝脏组织中获得CXCR4目的基因,用同源重组法构建腺病毒载体Ad-mCXCR4并鉴定;用Ad-mCXCR4转染MSCs,以转染空载体Ad-vector和未转染的MSCs为对照,然后用Western blot法检测各组细胞CXCR4蛋白的表达;小鼠注射CCl4诱导肝损伤模型后随机分为3组,分别通过尾静脉注射转染Ad-mCXCR4,Ad-vector和未转染的MSCs,48 h后用激光共聚焦观察各组MSCs归巢到受损肝组织的情况。结果:成功构建小鼠CXCR4腺病毒载体Ad-mCXCR4;MSCs转染Ad-mCXCR4后CXCR4蛋白呈高表达,而转染Ad-vector和未转染的MSCs无CXCR4蛋白表达;注射未转染MSCs组小鼠肝脏未见绿色荧光蛋白阳性细胞,注射Ad-mCXCR4-MSCs组小鼠较注射转染Ad-vector-MSCs组小鼠肝脏绿色荧光蛋白阳性细胞明显增加[(21.25±1.56)vs.(5.42±0.81)](P<0.01)。结论:基因修饰可提高MSCs的CXCR4表达,高表达CXCR4的MSCs向受损肝脏归巢增加。     

联合检测CA125、CYFRA21-1、NSE和CEA对肺癌诊断价值的探讨

目的 探讨糖类抗原125（CA125）、细胞角蛋白21-1（CYFRA21-1）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、癌胚抗原（CEA）联合检测对肺癌的诊断价值.方法 应用检测灵敏度高和线性范围宽的电化学发光技术对68例肺癌、41例肺良性疾病及33例健康体检者血清进行检测.结果 肺癌组血清CA125、CYFRA21-1、NSE和CEA含量均显著高于健康对照组和肺良性疾病组（P〈0.01）.单项肿瘤指标对肺癌检测敏感性分别为73.5%、75.0%、79.4%、82.4%,联合检测可提高检测敏感性达97.1%;如以任何三项以上阳性作为肺癌的诊断依据,则敏感性为75.0%,而对照组无1例阳性.结论 CA125、CYFRA21-1、NSE和CEA联合检测可显著提高肺癌诊断的敏感性,在肺癌的早期诊断方面可为临床提供有价值的资料.     

现代高科技与传统教学模式的整合推动个性化教学效果——从耳鼻咽喉科临床型硕士研究生培养探讨教学改革

临床型硕士研究生的培养目标是具有高水平临床诊疗能力的应用型人才,结合耳鼻喉科的学科特点,我们通过个性化规范教学充分发挥研究生的主观能动性,通过现代影像视频教学手段强化学生的临床技能,通过信息化教学巩固学生的学习效果,全面发展学生的临床技能。     

沉默BC047440基因对HepG2细胞侵袭能力的影响

目的:观察沉默BC047440基因后对HepG2细胞侵袭能力的影响。方法:实验分为3组,即HepG2细胞转染siRNA的沉默组,HepG2细胞转染无关质粒组及未转染的HepG2细胞组。利用前期构建的BC047440基因的小干扰RNA（siRNA）沉默BC047440基因,然后用MTT法检测细胞黏附率,细胞划痕法检测细胞迁移能力,Boyden小室法检测细胞侵袭性。结果:沉默组的细胞黏附率在20 min和40 min时与HepG2细胞组和无关质粒组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,但在60 min时沉默组显著低于后2组(P＜0.05); 划痕实验显示划痕48h后,无关质粒组和HepG2细胞组划痕区已基本长满,而沉默组划痕依然明显; 接种16 h后无关质粒组和HepG2细胞组侵袭到Boyden小室下室面的细胞数明显多于沉默(P＜0.05)。而无关质粒组与HepG2细胞组间差异均无显著性（P＞0.05）。结论:沉默BC047440基因后可明显抑制HepG2细胞其在细胞外基质上的黏附能力、运动能力和体外侵袭能力,提示BC047440基因可增加肝癌的转移侵袭性。