正交试验优选苯酚-硫酸法测定石莼多糖的含量

目的 建立苯酚-硫酸法测定石莼多糖含量的方法.方法 用超声法提取石莼多糖,用苯酚-硫酸法进行含量测定,以葡萄糖为对照品,检测波长为480nm,用L9（34）正交试验设计优化测定条件.结果 1.0mL样液,加5%苯酚液0.8mL、硫酸5.0mL,100℃水浴保温15min结果最佳,测得石莼超声提取物中粗多糖含量为15.62%.结论 优化后的苯酚-硫酸法测定石莼多糖方法简单,重复性好,结果准确.     

绿藻石莼多糖的提取工艺

用正交设计法对绿藻石莼多糖成分提取工艺进行研究。采用苯酚-硫酸法测定石莼提取液中石莼多糖含量。结果显示在pH4、温度100℃条件下提取的提取液中石莼多糖含量最高，达55.19％。溶液pH和提取温度是提取石莼多糖的关键影响因素，提取次数和时间长短的影响不大。     

1种绿藻硫酸多糖的化学组成及其结构研究

目的 对1种绿藻硫酸多糖的化学组成及其结构特征进行研究。方法 通过热水提取法,从1种石莼属海藻中提取硫酸多糖,采用强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对多糖进行分离纯化;采用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、高效液相色谱以及化学方法对多糖的纯度、分子量、单糖组成和化学成分进行分析测定;通过红外光谱和气质联用方法对多糖的结构进行表征。结果 多糖HP2S在HPGPC色谱图上呈单一对称峰,分子量为90.5 kDa,硫酸根和糖醛酸含量分别为32.1%和7.4%,HP2S主要由鼠李糖组成,含有少量葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖和木糖,HP2S糖链中鼠李糖主要存在形式为(1→2)-Rhap 、(1→3)-Rhap 和(1→2, 3)-Rhap,硫酸根位于(1→3)-Rhap 的C-2位或(1→2)-Rhap 的C-3位上。结论 水溶性多糖HP2S是1种结构新颖的主要由鼠李糖组成的硫酸化多糖。     

沙蚕(Perinereis aibuhitensis)硫酸多糖的结构表征及抗凝血活性研究

目的 对来源于沙蚕（Perinereis aibuhitensis）的硫酸多糖进行结构表征和抗凝血活性研究。方法 采用两步酶解法从沙蚕中提取多糖;利用强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对粗多糖进行分离纯化;通过离子色谱法、高效液相色谱法（HPLC）、高效凝胶渗透色谱-多角度激光光散射仪（HPGPC-MALLs）联用技术、硫酸软骨素酶ABC酶法分析、核磁共振氢谱（1H-NMR）等方法,研究纯化多糖的化学组成和结构特征;通过测定APTT、PT和TT评价其体外抗凝血活性。结果 从沙蚕中纯化得到了2种硫酸多糖组分PAE1和PAE2,二者的总糖含量、蛋白含量、硫酸根含量及分子量分别为65.21%、14.31%、0.33%、24.49 kDa和53.08%、11.33%、13.46%、57.39 kDa。PAE1主要由Gal（43.58%）、Glc（32.63%）、GalN（8.71%）、GlcA（7.66%）及少量Fuc（2.77%）组成;PAE2主链为硫酸软骨素C（GlcAβ1→3GalNAc6S）,支链主要由Fuc（35.33%）、Gal（20.9%）和Glc（8.98%）构成。PAE1和PAE2均可明显延长APTT和PT。结论 首次从沙蚕中提取、分离得到2种硫酸多糖,其中PAE2是1种含有Fuc、Gal与Glc支链并具有明显的体外抗凝血活性的结构新颖的类硫酸软骨素,该发现为沙蚕硫酸多糖的开发提供了依据。     

一种多棘海盘车内脏多糖的提取分离和结构表征

目的　从多棘海盘车(Asterias amurensis)内脏中提取、分离纯化多糖,并对其基本理化性质和结构进行表征。方法　采用沸水提取与酶解联用的方法从多棘海盘车内脏脱脂粉中提取粗多糖;采用Q Sepharose FF强阴离子交换和Sephacryl S-100凝胶渗透色谱对粗多糖进行分离纯化;采用硫酸-苯酚法、Folin-酚法、高效凝胶渗透色谱-十八角激光散射仪(HPGPC-MALLS)和高效液相色谱(HPLC)分别进行总糖含量,蛋白含量,分子量和单糖组成进行分析;采用甲基化、红外光谱(IR)、气质联用(GC/MS)和一维、二维核磁共振波谱(NMR)法对纯化多糖结构进行表征。结果　从多棘海盘车内脏中提取粗多糖的收率为3.3%。经过离子交换和分子排阻色谱分离纯化,得到一种分子量均一的多糖组分 F2-A,该多糖主要由葡萄糖(Glc)组成,其糖含量为97.6%,分子量为2708 kDa,是一种以α-(1-4)-Glc为主链并含有少量β-(1-3,4)分支的海星内脏来源葡聚糖。结论 从多棘海盘车内脏中纯化得到一种高分子量、结构独特的葡聚糖,为将来从事其结构和生物活性关系的研究提供了有用信息。     

海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备和抗血小板聚集活性研究

目的：研究低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯的制备和纯化技术,筛选抗血小板聚集活性的低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯。方法：以海带硫酸多糖为原料,采用自由基降解和强阴离子交换色谱技术,制备纯化出高硫酸根和高岩藻糖的低分子量岩藻聚糖硫酸酯;采用体外凝血酶诱导血小板聚集模型,筛选出抗血小板聚集活性的低分子量岩藻聚糖硫酸酯。结果：强阴离子交换色谱能够有效地将复杂的低分子量海带岩藻聚糖硫酸酯分离纯化,得到4个纯度较高的高硫酸根、高岩藻糖的低分子量多糖,其岩藻糖含量超过85% ~ 95%,硫酸根含量35%以上,分子量在20 ku ~ 30 ku。体外抗血小板聚集试验结果证明,这4个高硫酸根高岩藻糖组分的抗血小板聚集活性最高,而低硫酸根组分含有较高的半乳糖、甘露糖和糖醛酸,其抗血小板活性非常低。结论：采用自由基氧化降解和强阴离子交换色谱法,可获得抗血小板活性高的高硫酸根高岩藻糖的低分子量岩藻聚糖硫酸酯。     

改良-差示酚硫法的建立及对淫羊藿多糖的含量测定

目的建立改良-差示酚硫法并测定淫羊藿多糖含量。方法在以往苯酚硫酸法、差示苯酚硫酸法的基础上进一步研究改进,建立新的可用于多糖含量测定的方法。结果改良-差示酚硫法的测定条件:样品可直接用未精制多糖提取物,反应应在2.5h内完成,测定波长λmax=490 nm,线性范围为30~400μg·mL-1,相关系数r=0.999 0,RSD=2.2%,回收率为98.9%。结论改良-差示酚硫法可用于多糖的含量测定,多糖不必进行繁琐的分离纯化,该法操作简捷、快速,精密度高。     

南沙参中多糖含量测定方法的建立及比较

目的:建立南沙参中多糖含量的测定方法并进行比较.方法:采用水提醇沉法分离提取南沙参多糖,以葡萄糖为对照制备标准曲线;采用蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法,利用紫外分光光度计测定多糖含量.结果:蒽酮-硫酸法测定南沙参中多糖含量为16.37％,加样回收率为101.1％,RSD为2.1％;苯酚-硫酸法测定南沙参中多糖含量为15.26％,加样回收率为99.9％,RSD为1.8％.结论:两种方法操作简单,精密度高、重复性好,均可用于南沙参中多糖含量的测定.     

NaHSO3/NaNO2法修饰海带多糖及抗肿瘤活性研究

目的:对海带多糖进行硫酸酯化修饰,考察修饰前后多糖结构及抗肿瘤活性的变化.方法:采用三磺酸钠胺水相法对海带多糖进行硫酸化修饰,对反应条件进行单因素分析,红外光谱核磁共振谱分析海带多糖以及硫酸酯结构,BaSO4-明胶分光光度法测定产物硫酸基,采用苯酚-浓硫酸法测定海带及其硫酸酯多糖含量,高效液相色谱法测定分子量,MTT法进行抗肿瘤活性评价.结果:海带多糖硫酸酯化后,硫酸根含量为38.34％,多糖含量为55.65％.海带多糖及硫酸酯的分子量分别为5000和14,000.硫酸基在红外光谱出现特征吸收峰.海带多糖是β-吡喃型葡萄糖以1,3-糖苷键为主链,海带多糖硫酸酯的硫酸基团取代位置为C2-OH.海带多糖及其硫酸酯对人乳腺癌MCF-7细胞、人结肠癌细胞LOVO增殖的抑制作用.结论:海带多糖经过硫酸化修饰后,其对抗肿瘤细胞的作用高于未经修饰的海带多糖,且海带多糖硫酸酯对LOVO细胞的敏感性优于对MCF-7细胞.     

金线莲多糖苯酚-硫酸法测定条件的优化

目的:从金线莲中提取多糖,并建立金线莲多糖含量测定方法。方法:用超声法提取金线莲多糖,以苯酚-硫酸法进行含量测定,以葡萄糖为对照品,检测波长为490nm,用L9(34)正交试验设计优选测定条件。结果:1.0mL样液,加5%苯酚液0.6mL、硫酸6.0mL,100℃水浴保温15min结果最佳,测得金线莲超声提取物中粗多糖含量为12.09%。结论:优化后的苯酚-硫酸法测定金线莲多糖,方法简单,重复性好,结果准确。     

普通念珠藻中多糖的分离纯化研究

目的 研究普通念珠藻多糖分离纯化方法,并测定其相对分子质量.方法 采用水提醇沉法制备粗多糖,Molish反应和硫酸苯酚法对其进行定性和定量检测,二乙胺基乙基纤维素离子交换柱色谱法进行分离纯化,高效凝胶渗透色谱法测定其相对分子质量.结果 普通念珠藻粗多糖的提取率为8.6％,分离获得一个组成均一的酸性多糖组分NSP,其重均相对分子质量为402 717.结论 NSP为首次从普通念珠藻中分离得到一个酸性多糖组分.     

艾叶多糖的提取、含量测定及对羟自由基清除作用的研究

目的:探讨艾叶多糖的提取、含量测定及其对羟自由基(·OH)的清除作用.方法:采用热水浸提法提取艾叶多糖并进行初步纯化;苯酚-硫酸法测定其含量;·OH清除实验观察艾叶多糖对·OH的作用.结果:样品中多糖含量为2.56%,回收率为98.45%,RSD = 0.391%(n = 5),其纯度和产率均较高;艾叶多糖溶液对由Fenton体系产生的·OH有一定的清除作用,随着艾叶多糖浓度的增加,对·OH自由基的清除能力也增强.结论:艾叶中含有一定量的多糖;艾叶多糖对·OH具有较好的清除作用,在一定范围内呈现良好的量效关系.     

白花蛇舌草多糖的提取纯化工艺研究

目的优选白花蛇舌草多糖的提取及纯化工艺。方法采用正交试验设计法优选白花蛇舌草多糖的最佳提取工艺;通过乙醇沉淀法、鞣酸沉淀法并联用活性炭对传统多糖的纯化工艺进行改进。结果最佳提取工艺为:白花蛇舌草药材预先加12倍量水浸泡2h,加热至70℃,提取3次,每次1.5h,采用鞣酸沉淀法联合活性炭可有效去除多糖中的蛋白质和色素等杂质。结论提取时间对多糖的提取效率影响较大;所优选的纯化工艺方法简便,蛋白去除率高,色素脱除完全,多糖损失少,工艺可行性强。     

不同提取方法对褐藻糖胶理化性质的影响

目的 比较不同提取方法对褐藻糖胶理化性质的影响。方法 分别采用稀盐酸法和氯化钙从6种褐藻粗多糖中获得 12 种褐藻糖胶(Fucoidan),并进一步对其理化性质进行分析和比较。采用高效液相色谱法(HPLC)测定其单糖组成,离子色谱法(IC)测定其硫酸基含量,Folin-酚法测定其粗蛋白含量,高效凝胶渗透色谱与多角度激光散射仪联用法(HPGPC-MALLS)测定其绝对分子量。结果 稀盐酸法提取褐藻糖胶的得率显著高于氯化钙法,但所得褐藻糖胶的硫酸基含量和绝对分子量都明显降低。结论 稀盐酸法提取褐藻糖胶造成糖链断裂及硫酸基脱落,破坏褐藻糖胶的结构,因此采用氯化钙法更适合褐藻糖胶的提取。     

马粪海胆生殖腺中多糖的纯化方法及其抗肿瘤作用研究

目的 优化马粪海胆生殖腺中多糖的纯化方法,并评价其体外对肿瘤细胞的生长抑制作用.方法 马粪海胆生殖腺经水提取、木瓜蛋白酶结合Sevage法除蛋白、透析后醇沉、干燥制得马粪海胆总多糖,总多糖应用Sephacryl S-300凝胶柱色谱分离纯化;采用苯酚-硫酸法测定多糖含量;通过噻唑蓝(MTT)法测试多糖的体外抗肿瘤作用.结果 马粪海胆生殖腺的水提液应用木瓜蛋白酶结合Sevage法除蛋白效果最佳,木瓜蛋白酶最佳用量为100∶6(海胆脱脂粉与酶质量比),制得总多糖的纯度达90%;总多糖及分离得到的2个多糖体外对人肝癌Bel7402细胞表现出生长抑制作用.结论 该纯化方法步骤简单、易操作,所得多糖理化性质好、易溶于水,适用于马粪海胆生殖腺多糖的纯化.     

苯酚硫酸法定量测定桔梗流浸膏中多糖的研究

目的：建立桔梗流浸膏中桔梗多糖含量的定量测定方法。方法：以葡萄糖为对照品绘制标准曲线,采用苯酚-硫酸法测定桔梗流浸膏中多糖的含量。结果：建立了一种苯酚-硫酸法测定桔梗流浸膏中多糖含量的方法,其平均回收率为98.87%,RSD=1.47%。对不同来源桔梗流浸膏中多糖的含量进行测定,其范围为0.0113g/ml～0.1890g/ml。结论：该方法简便、准确,可作为桔梗流浸膏中多糖的含量测定方法。     

超声波辅助过氧化氢氧化降解制备相对低分子质量异枝麒麟菜硫酸多糖

目的 制备相对低分子质量异枝麒辟菜硫酸多糖。方法 采用超声波辅助过氧化氢氧化降解异枝麒辟菜硫酸多糖，并测定各多糖样品的相对分子质量及硫酸基、3，6-内醚半乳糖含量。结果 制备了相对分子质量为5000～40000的硫酸多糖，其硫酸基含量均在18．5％以上。结论 该方法适合于制备相对低分子质量高水溶性多糖，后处理简单，并能较好地保持多糖中的硫酸基。     

大半边莲多糖的提取与含量测定

目的:研究大半边莲多糖提取工艺.方法:多糖含量测定采用蒽酮-硫酸法;多糖提取采用水提醇沉法,以大半边莲多糖提取得率为指标进行正交试验设计,考察对大半边莲多糖提取得率的影响因素.结果:多糖含量测定的线性回归方程为A=35.602C+0.030 2(r=0.999 4),线性范围为0.002 6～0.015 4 mg·ml-1.多糖提取的最佳工艺为加入8倍量的水,70℃提取2次,每次1h.结论:为大半边莲提供了稳定可行的多糖提取工艺,多糖含量测定方法准确可靠.