青钱柳叶多糖的结构表征及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

目的从青钱柳Cyclocarya paliurus叶中提取分离多糖,对其结构进行表征,并评价其α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法采用水提醇沉法制备粗多糖,经732阳离子交换树脂脱蛋白,50%乙醇沉淀,得青钱柳叶多糖CP50。利用高效凝胶渗透色谱-十八角度激光光散射联用法(HPGPC-MALLS)测定CP50的相对分子质量,采用PMP柱前衍生-高效液相色谱法(HPLC)测定单糖组成。采用甲基化分析、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、核磁共振氢谱(1H-NMR)对CP50的结构进行表征。采用PNPG法对CP50抑制α-葡萄糖苷酶活性进行评价。结果 CP50的相对分子质量为59 000,由半乳糖醛酸(GalA)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、阿拉伯糖(Ara)、甘露糖(Man)、木糖(Xyl)、鼠李糖(Rha)和葡萄糖醛酸(Glc A)8种单糖组成,摩尔比为29.1∶25.6∶16.5∶9.3∶6.7∶6.1∶4.1∶2.6,分子中主要含有→4)GalA(1→、→4)Glc(1→和→4)Gal(1→糖苷键,在半乳糖的C6位存在分支结构。CP50能显著抑制α-葡萄糖苷酶活性,半数抑制浓度(IC50)为3.3μg/m L,远小于抗2型糖尿病药物阿卡波糖(193.6μg/m L),属于混合非竞争性抑制。结论 CP50单糖种类多、结构复杂,属于果胶类酸性多糖,且具有较好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,具有潜在的开发应用价值。     

3种鱼鳃中糖胺聚糖的分离纯化及细微结构比较分析

目的 从狭鳕 (Alaska pollack)、褐牙鲆 (Bastard halibut) 和真鲷 (Red seabream) 三种鱼鳃中提取分离糖胺聚糖并对其细微结构进行比较分析。方法 利用酶法降解并以阴离子交换色谱法分离纯化糖胺聚糖,通过单糖组成和醋酸纤维素薄膜电泳对其种类进行鉴别,采用高效液相色谱法对其相对分子量和二糖组成进行比较分析,最后利用核磁共振波谱法 (₁H-NMR) 对其结构进行表征。结果 从3种鱼鳃组织中提取分离得到54种多糖,其中18种是电荷和分子量均一的糖胺聚糖,它们集中在0.8 mol?L_-1 NaCl洗脱部分 (P4) 和1.0 mol?L_-1 NaCl洗脱部分 (P5),占多糖总量的17.4～58.4%;P4主要为硫酸软骨素C (CSC),P5主要为硫酸软骨素A (CSA) 和杂合硫酸软骨素 (HyCS),尤其,与牛气管来源CSA比较,HyCS的4S/6S比和电荷密度均较大。结论 狭鳕、褐牙鲆和真鲷鱼鳃组织中的糖胺聚糖主要为CSA、CSC和HyCS。     

不同方法对寡聚甘露糖醛酸铬配合物分子量测定的影响

目的探讨不同方法对于测定具有抗2型糖尿病活性的海洋寡聚甘露糖醛酸铬配合物(HS203)分子量测定的影响。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),高效凝胶渗透色谱(HPGPC)及高效凝胶渗透色谱与多角度激光光散射器联用(HPGPC-MALLS)法分别测定HS203的分子量,并考察了不同色谱柱以及不同分子量对照品的选择对于HS203分子量测定结果的影响。结果 PAGE法表明HS203的聚合度为5~20之间,通过计算得出HS203的重均分子量范围在2 400~2 600Da。在HPGPC分析过程中,不同色谱柱对于HS203分子量测定结果影响不大,采用右旋糖酐作为对照品测得分子量为6 000~7 10...     

一种 β-葡聚糖的结构表征及其体外免疫活性研究

目的 从海茸(Durvillaea antarctica)中提取、分离和纯化β-葡聚糖,并对其结构和体外免疫活性进行研究。方法 将干燥海茸粉碎,经水提取和Q-Sepharose Fast Flow离子交换层析分离得到β-葡聚糖(DAC)。采用硫酸-苯酚法、Folin-酚法、柱前衍生高效液相色谱法和多角度高效凝胶渗透色谱与多角度激光光散射器联用(HPGPC-MALLS)法对DAC的总糖含量、蛋白含量、单糖组成和分子量进行分析,并通过甲基化和气质联用(GC-MS)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振波谱(NMR)对其结构进行表征。采用中性红法对DAC的体外免疫活性进行评价。结果 从海茸中分离纯化得到一种总糖含量达97.5%的β-葡聚糖,其蛋白含量和分子量分别为2.0 %和18.3 kDa。经甲基化和NMR分析结果表明,DAC是以→3)Glc(β1→为主链,并含有少量→6)Glc(α/β1→分支的葡聚糖。体外免疫活性结果显示,在浓度为50 μg.mL-1时, DAC对巨噬细胞的吞噬能力达到最大值。结论 海茸β-葡聚糖能显著增强巨噬细胞的吞噬能力,是一种潜在的免疫增强剂。     

不同提取方法对褐藻糖胶理化性质的影响

目的 比较不同提取方法对褐藻糖胶理化性质的影响。方法 分别采用稀盐酸法和氯化钙从6种褐藻粗多糖中获得 12 种褐藻糖胶(Fucoidan),并进一步对其理化性质进行分析和比较。采用高效液相色谱法(HPLC)测定其单糖组成,离子色谱法(IC)测定其硫酸基含量,Folin-酚法测定其粗蛋白含量,高效凝胶渗透色谱与多角度激光散射仪联用法(HPGPC-MALLS)测定其绝对分子量。结果 稀盐酸法提取褐藻糖胶的得率显著高于氯化钙法,但所得褐藻糖胶的硫酸基含量和绝对分子量都明显降低。结论 稀盐酸法提取褐藻糖胶造成糖链断裂及硫酸基脱落,破坏褐藻糖胶的结构,因此采用氯化钙法更适合褐藻糖胶的提取。     

拟小叶喇叭藻和喇叭藻多糖对α-葡萄糖苷酶活性的影响

摘 要：目的 研究喇叭藻多糖对α-葡萄糖苷酶抑制活性。方法 采用热水提取从拟小叶喇叭藻（Turbinaria conoides）和喇叭藻（Turbinaria ornata）中获得水溶性多糖TCP和TOP,并采用硫酸-苯酚法测定其总糖含量;用改良的咔唑法测定其糖醛酸含量;用Folin-酚法（Lowry法）测定其蛋白含量;用高效液相色谱法（HPLC）测定其单糖组成;用离子色谱法（IC）测定其硫酸根含量;用高效凝胶渗透色谱与多角度激光散射仪联用法（HPGPC-MALLS）测定其平均分子量;用PNPG显色法测定TCP和TOP对α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果TCP和TOP具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC50值分别为204.1和113.2 μg?mL?1,效果优于阿卡波糖（220.3 μg?mL?1）。初步动力学研究表明其均为混合型抑制方式。结论 热水提取自拟小叶喇叭藻和喇叭藻的多糖具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性。 关键词：拟小叶喇叭藻;喇叭藻;多糖;α-葡萄糖苷酶;抑制活性