Drp1介导线粒体能量代谢拮抗大鼠缺血再灌注肾损伤

目的　探讨线粒体动力相关蛋白1（Drp1）介导线粒体能量代谢参与缺血再灌注肾损伤的分子机制。方法　实验时间2020年10月14日。8～10周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组和Drp1抑制剂组,每组5只,每只体质量为0.25～0.30 kg。通过手术建立大鼠肾脏缺血再灌注急性肾损伤模型,Drp1抑制剂组大鼠腹腔注射线粒体分裂抑制剂（mitochondrial division inhibitor 1,Mdivi-1）20 mg/kg体质量,其余各组大鼠注射等体积生理盐水,造模24 h留取血清及肾脏组织。比较组间大鼠血肌酐水平、肾组织病理学改变、肾组织细胞凋亡情况、线粒体超微结构、线粒体ATP酶活力,并建立体外HK-2细胞缺氧复氧模型,经处理后JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化。采用方差分析。结果　与假手术组比较,模型组大鼠血肌酐明显升高［（41.12±1.895）µmol/L比（48.68±2.065）µmol/L］,肾小管损伤评分升高［（1.29±0.426）分比（6.50±0.577）分］,每高倍镜视野下大鼠肾组织细胞凋亡数量增加［（2.40±0.547）个比（10.20±1.095）个］,电镜下线粒体损伤更明显,线粒体ATP酶活力降低［（6.38±0.321）U/mg prot比（4.18±0.198）U/mg prot］,HK-2细胞缺氧复氧模型中,模型组较假手术组线粒体膜电位降低的细胞比例增多［（9.81±0.251）%比（4.24±0.598）%］,差异均有统计学意义（均P<0.05）。与模型组相比,Drp1抑制剂组大鼠血肌酐下降［（48.68±2.065）µmol/L比（43.28±0.895）µmol/L］,肾小管损伤评分降低［（6.50±0.577）分比（4.50±0.578）分］,每高倍镜视野下大鼠肾组织细胞凋亡数量减少［（10.20±1.095）个比（6.60±1.140）个］,线粒体结构损伤减轻,细胞线粒体ATP酶活力增加［（4.18±0.198）U/mg prot比（5.16±0.628）U/mg prot］,HK-2细胞缺氧复氧模型中,Drp1抑制剂组较模型组线粒体膜电位降低的细胞比例减少［（5.90±0.360）%比（9.81±0.251）%］,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论　选择性抑制Drp1可通过抑制线粒体分裂,有效改善能量代谢障碍,减少细胞凋亡,减轻肾缺血再灌注损伤。     

依达拉奉右莰醇通过铁死亡-脂质过氧化通路对脑出血大鼠神经保护的作用机制

目的 探讨依达拉奉右莰醇对脑出血大鼠的神经保护作用及血肿周围脑组织脂质过氧化的影响。方法将128只SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组、依达拉奉组和依达拉奉右莰醇组，每组32只。除假手术组外，其余组大鼠构建急性脑出血模型，依达拉奉组、依达拉奉右莰醇组于造模后分别腹腔注射依达拉奉6 mg/kg、依达拉奉右莰醇7.5 mg/kg，每12 h注射1次，假手术组和脑出血组腹腔注射等量生理盐水。术后1 d、3 d、7 d和14 d按Garcia评分标准进行神经功能评分，HE染色观察血肿周围脑组织病理变化，化学荧光法检测血肿周围脑组织活性氧（ROS）含量，微量酶标法检测血肿周围脑组织还原型谷胱甘肽（GSH）含量，蛋白免疫印迹法检测血肿周围脑组织谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)和磷脂胆碱酰基转移酶3(LPCAT3)表达。结果 与假手术组比较，脑出血组大鼠神经功能评分降低，血肿周围脑组织出现大量炎性细胞浸润及神经细胞变性，ROS含量、ACSL4和LPCAT3蛋白表达水平升高，GSH含量、GPX4蛋白表达水平降低（P<0.05）；与脑出血组比较，依达拉奉组和依达...     

Klotho蛋白对肾缺血再灌注大鼠急性肾损伤及纤维化的保护作用

目的 探讨Klotho蛋白在缺血再灌注（I/R）大鼠引起的急性肾损伤及纤维化进程中的作用。方法 60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（Sham组）、肾脏缺血再灌注组（I/R组）和Klotho蛋白干预组（I/R+Kl组），每组20只。I/R组采用夹闭右侧肾蒂40 min再灌注法建立肾缺血再灌注急性肾损伤模型。Sham组游离出右侧肾动脉，但不夹闭右侧肾蒂，暴露40 min后缝合腹腔。I/R+Kl组手术方法同I/R组，造模成功后，腹腔注射Klotho蛋白（0.01 mg/kg）。3组分别于造模成功后第1、7、14、28天收集大鼠血、肾组织标本，分别检测大鼠血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平；HE染色观察肾组织损伤情况，Masson染色观察肾纤维化情况，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清及肾组织Klotho蛋白水平，Western blot法检测肾脏组织Klotho蛋白的表达。结果 与Sham组比较，I/R组及I/R+Kl组血Scr及BUN水平均升高（P<0.05），与I/R+Kl组比较，I/R组各时间点血Scr及BUN水平均升高（P<0.05）。HE染色结果显...     

本期导读

急性肾损伤严重危害人类健康, 由其引起的高病死率和严重并发症越来越受到关注。本期"泌尿生殖专栏"刊发的由南方医科大学附属花都医院(广州市花都区人民医院)肾病学科陈思奇等作者撰写的《Drp1介导线粒体能量代谢拮抗大鼠缺血再灌注肾损伤》一文, 探讨了线粒体动力相关蛋白1(Drp1)介导线粒体能量代谢参与缺血再灌注肾损伤的分子机制。该研究将8～10周龄雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组和Drp1抑制剂组, 每组5只, 每只体质量为0.25～0.30 kg。通过手术建立大鼠肾脏缺血再灌注急性肾损伤模型, Drp1抑制剂组大鼠腹腔注射线粒体分裂抑制剂(Mdivi-1)20 mg/kg体质量, 其余各组大鼠注射等体积生理盐水, 造模24 h留取血清及肾脏组织。研究发现, 选择性抑制Drp1可通过抑制线粒体分裂, 有效改善能量代谢障碍, 减少细胞凋亡, 减轻肾缺血再灌注损伤。由深圳市儿童医院肾脏科叶国嫦等作者撰写的《单中心5年先天性肾脏和尿路畸形住院构成分析》一文, 收集2015年1月至2019年12月住院诊断为先天性肾脏和尿道畸形临床资料, 对其病种构成比及首次入院病因等信息...     

黄柏酮通过调控铁死亡途径对心肌缺血/再灌注大鼠心肌损伤的保护作用研究

目的:探讨黄柏酮对心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组(sham)、模型组(model)、黄柏酮低剂量组(Oba-L)、黄柏酮高剂量组(Oba-H)及高剂量黄柏酮联合Nrf2抑制剂ML385组(Oba-H+ML385),每组14只。除sham组外，其余各组均采用左冠状动脉前降支结扎法建立MIRI模型。于造模前7 d经腹腔注射相应药物，每天一次。造模24 h后，超声心动图检测大鼠心功能；TTC染色观察大鼠心肌梗死面积；HE染色观察大鼠心肌组织病理学变化；生化试剂盒测定大鼠血清中CK-MB、LDH、cTnI水平及心肌组织中MDA、SOD、GSH-Px水平；DCFH-DA荧光探针法检测心肌组织中ROS水平；比色法检测大鼠心肌组织中Fe²⁺含量；Perl blue染色检测大鼠心肌组织中铁沉积情况；Western blot检测大鼠心肌组织中Nrf2、HO-1、GPX4和SLC7A11蛋白表达水平。结果:黄柏酮可改善MIRI大鼠心肌损伤，明显降低LVEDD、LVESD、心肌梗死面积及血清中CK-MB、LDH...     

桑黄素通过抑制TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡的影响

目的 探讨桑黄素(Morin)通过调控硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶1(Caspase-1)信号通路，对脑缺血再灌注大鼠神经元凋亡的影响。方法 将60只大鼠随机均分为假手术组、模型组、Morin低剂量(Morin-L,10 mg/kg)组、Morin高剂量(Morin-H,40 mg/kg)组、Morin-H+pLVXNC组(40 mg/kg Morin+pLVX-NC)、Morin-H+pLVX-TXNIP组(40 mg/kg Morin+pLVX-TXNIP)。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型(除外假手术组)，给药1 h后再灌注。再灌注72 h后，进行神经功能缺损评分；取出全脑进行脑含水量测定；苏木精-伊红(HE)染色观察脑皮质半暗带病理损伤情况；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)检测脑组织梗死面积；酶联免疫吸附试验检测血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量；Western blot检测脑皮质中TXNIP/NLRP3/Caspase-1信号通路蛋白表达水平。结果 与假手术组比较，模型组神经功能缺损评分，...     

四磨汤口服液改善功能性消化不良模型大鼠的作用机制

目的 探讨四磨汤口服液调控PTEN诱导假定激酶1(Pink1)/E₃泛素连接酶(Parkin)轴对功能性消化不良(FD)模型大鼠的改善作用及机制。方法 取SD雄性大鼠，利用不可预知的慢性应激法建立FD模型，然后随机分为模型组、阳性对照组(多潘立酮片，3.5 mg/kg)、四磨汤组(四磨汤口服液，5.4 mL/kg)，另设不造模的空白组，每组20只。各给药组大鼠灌胃相应药物，空白组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水，每天1次，持续14 d。末次给药结束后，检测大鼠胃排空率和小肠推进率；检测大鼠血清中胃肠激素[胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、胆囊收缩素(CCK)]含量；观察大鼠胃窦组织中卡哈尔间质细胞(ICC)线粒体结构；观察大鼠胃窦组织中细胞色素C氧化酶Ⅳ(COXⅣ)和Parkin在线粒体中的共定位表达；检测大鼠胃窦组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62、Pink1、Parkin蛋白的表达。结果 与空白组比较，模型组大鼠胃排空率、小肠推进率和血清中MTL、GAS含量以及p62蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)，血清中CCK含量和胃窦组织线粒体中COXⅣ...     

甘草酸对慢性肾脏病大鼠心肌HMGB1/TLR4/NF-κB/HIF-1α信号通路的影响

目的 探讨应用甘草酸（Gly）治疗时对慢性肾脏病（CKD）大鼠心室肌高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核因子κB/缺氧诱导因子1α(HMGB1/TLR4/NF-κB/HIF-1α)信号通路的影响。方法 将38只Wistar大鼠按随机数字表法分为4组：假手术（Sham）组、Sham+Gly组、CKD组、CKD+Gly组，5/6肾切除制备CKD模型，Gly腹腔注射给药（80 mg/kg）。4周后行血流动力学及心脏彩超观察各组大鼠心脏功能；心室取血检测生化指标；心肌组织取材检测HMGB1、TLR4、NF-κB、HIF-1α蛋白表达的变化。结果 与Sham组相比，CKD组肌酐、尿酸、尿素氮和血清镁水平增高（P<0.05），血压升高，舒张期室间隔厚度、收缩期左心室内径增加，左心室射血分数降低，E/A比值降低，肺动脉血流加速时间延长（P<0.05）;HE染色可见心肌细胞肥大，Masson染色见心肌纤维化程度增加（P<0.05），心肌组织HMGB1、NF-κB、HIF-1α蛋白表达水平上调（P<0.05）。与CKD组相比，CKD+Gly组收缩期室间隔厚度增加，左心室射血分...     

左归丸对肾病综合征模型大鼠NF-κB和TNF-α表达的影响

目的研究左归丸对阿霉素大鼠肾病综合征模型的治疗作用。方法将85只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、左归丸低剂量组(1.62 g/kg)、左归丸中剂量组(3.24 g/kg)、左归丸高剂量组(6.48 g/kg)、醋酸泼尼松组(0.9 mg/kg)。除空白对照组外,其余各组分别尾静脉注射阿霉素6.5 mg/kg。连续灌胃给药治疗12周。实验结束时收集24 h尿液,检测尿蛋白。末次给药1 h后,乙醚麻醉大鼠,腹主动脉取血,检测各组大鼠血清总三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)。采血后取肾脏,置于4%多聚甲酸溶液中固定24 h。采用HE染色检查肾脏病理变化,采用免疫组化技术检测各组大鼠肾脏NF-κB p65及肿瘤坏死因子TNF-α的表达水平。结果与模型对照组相比,左归丸低剂量组、中剂量组、高剂量组和醋酸泼尼松组24 h尿蛋白显著降低(P<0.01)。与模型对照组相比,醋酸泼尼松组血清尿素氮显著降低(P<0.05)。与模型对照组相比,左归丸中剂量组、高剂量组和醋酸泼尼松组血肌酐显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,左归丸各治疗剂量组和醋酸泼尼松组的肾组织病变明显减轻,HE染色均匀,肾间炎性细胞浸润减轻,基膜和系膜增生较模型对照组缓解。与模型对照组相比,左归丸高剂量组和醋酸泼尼松组NF-κB P65表达显著降低(P<0.05)。与模型对照组相比,左归丸低剂量组、中剂量组、高剂量组和醋酸泼尼松组TNF-α表达显著降低。结论左归丸对阿霉素引起的大鼠肾病综合征模型具有治疗作用,该作用可能与其对NF-κB信号通路的调节有关。     

埃他卡林对脂多糖、油酸、二甘醇等所致肾脏损伤的影响

目的观察埃他卡林对脂多糖、油酸和二甘醇等不同因素所致肾脏损伤的影响。方法采用大鼠股静脉注射2%醋酸铅致敏后注射脂多糖1μg（1ml/kg）,4h造成内毒素休克肾损伤模型,大鼠左肾动脉注射油酸0.15ml/kg,24h造成油酸所致肾损伤模型,分别在造模前3d及1h,以埃他卡林1,3,9mg/（kg.d）灌胃给药;小鼠腹腔注射二甘醇10g/kg后,立即以埃他卡林1,3,9mg/（kg.d）灌胃给药6d,第7天造模成功。3种模型建立后,观察血清肌酐、尿素氮水平和肾脏形态学变化,评价肾脏功能。结果（1）内毒素性休克大鼠血清肌酐和尿素氮水平显著升高,组织病理显示有肾小球微血栓、肾小管上皮肿胀和管腔内蛋白管型形成。埃他卡林9mg/kg组能明显降低血清尿素氮和肌酐水平,改善上述病理变化。（2）左肾动脉注射油酸大鼠血清肌酐和尿素氮水平显著升高,组织病理显示肾小球内皮细胞坏死,球囊腔减小,肾小管间质充血且管腔内有蛋白管型形成。埃他卡林对油酸所致大鼠肾脏损伤无显著性改善作用。（3）二甘醇肾损伤小鼠血清肌酐水平显著性升高,埃他卡林9mg/kg组血清肌酐水平恢复至正常。结论埃他卡林不适合于脂多糖、油酸所致肾脏损伤的防治,埃他卡林可否用于二甘醇所致肾损伤的治疗值得进一步研究。     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

10例狂犬病误诊原因分析

狂犬病近年来发病率有逐年增加的趋势,近十二年来,我们共遇见狂大病２３例,其中１０例被误诊为其它疾病,现就其误诊原因进行分析如下。１临床资料１．１ 一般资料：男８例,女２例;年龄最大７８岁,最小４岁。发病季节为３月～１１月。首诊科室,儿科３例、内科３例、转院３例、急诊科１例。１．２ 临床表现：发热７例,恐风５例,恐水６例,怕光３例,流涎１０例,胸闷、气促、呼吸困难４例,烦躁不安１０例,多汗７例,恐惧６例,肢体麻木４例,抽搐４例,恶心、呕吐２例,昏厥１例。所有病例发病至死亡时间为２天～６天,死亡原因为…     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

复发性耳廓假性囊肿的治疗

目的 探讨不同方法对复发性假性耳廓囊肿的治疗效果.方法 对2008年5月至2012年2月在我科就诊的58例复发性假性耳廓囊肿分成2组,穿刺抽液+冷冻+加压包扎组(19例),手术切除囊肿前壁软骨+对穿缝合组(39例),随访3个月到1年,观察2组治愈率、复发率,有效率、并发症等情况.结果 对照组1次治愈后痊愈5例,复发14例,治愈率为26.3％,复发率为73.7％,有效率为78.9％,其中耳廓增厚6例,1例并发化脓性软骨膜炎.观察组治愈38例,复发1例,经过1次穿刺后治愈,治愈率为97.4％,复发率为2.6％,有效率为100.0％.所有患者无耳廓变形、增厚,无化脓性耳廓软骨膜炎的并发症.结论 囊肿前壁软骨切除+对穿缝合是治疗复发性假性耳廓囊肿的高效、首选办法,值得推广.     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

The effect of temperature and of cetrimide on the rate of loss of refractility of spores of Bacillus megaterium

The rate of germination of spores of Bacillus megaterium at 30° is not significantly different from the rate at 37° but the onset of germination is delayed; outgrowth is normal. At 45° germination of some spores occurs but the rate is much slower than at 37°, and there is no lag; emergence occurs from only a proportion of the germinated spores and after 3 or 4 vegetative cells have been produced, replication ceases. A single regression equation can represent the germination rate of the spores at 37° in the presence of from 0.0005 to 0.02% w/v of cetrimide and in its absence. In 0.0005% w/v of cetrimide, germ cells emerge from some of the germinated spores but many of them become swollen and disintegrate. Concentrations of 0.00125% w/v or more progressively inhibit swelling and completely inhibit emergence.     

药品风险管理之风险的起因分析——关于药品天然风险

药品认知水平是把握药品天然风险的决定因素，却又受到伦理需求和产业发展需求的影响。药品不良反应监测，正是常规的取法三者平衡关系的制度工具。