丁苯酞抑制趋化因子样因子1表达对大鼠局灶性脑缺血后脑水肿的影响

摘 要 目的：探究丁苯酞对大鼠局灶性脑缺血后脑水肿的影响,并初步探讨相关分子机制。方法: 建立大鼠局灶性脑缺血模型,再灌注6 h后,假手术组和模型组右侧脑室注射生理盐水（均为5 μl）,阳性对照组注射抗趋化因子样因子1（CKLF1）抗体（5 μl）,丁苯酞组注射丁苯酞（5 μl）。再灌注24 h后检测脑组织含水量;免疫组织化学染色法观察缺血右侧半球中性粒细胞浸润情况;采用ELISA、蛋白免疫印迹、实时定量PCR检测缺血半球肿瘤坏死因子（TNF α）、白细胞介素1（IL 1β）、趋化素样因子1（CKLF1）、细胞间黏附分子 1（ICAM 1）、血管细胞黏附分子 1（VCAM 1）表达。结果: 与左侧脑组织相比,模型组、阳性对照组、丁苯酞组大鼠右侧脑组织含水量显著增加（P＜0.05）,阳性对照组与丁苯酞组大鼠右侧脑组织含水量比较差异无统计学意义（P＞0.05）。与假手术组相比,模型组大鼠右侧脑组织含水量、CKLF1表达、TNF α和IL 1β含量、ICAM 1和VCAM 1表达、嗜中性粒细胞数目、MPO活性均显著增加（P＜0.05）。与模型组相比,阳性对照组和丁苯酞组大鼠右侧脑组织含水量、CKLF1表达、TNF α和IL 1β含量、ICAM 1和VCAM 1表达、嗜中性粒细胞数目、MPO活性均显著降低（P＜0.05）。与阳性对照组相比,丁苯酞组大鼠TNF α、IL 1β含量、嗜中性粒细胞数目、MPO活性均显著降低（P＜0.05）;而阳性对照组和丁苯酞组大鼠ICAM 1和VCAM 1 表达比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论: 丁苯酞可能通过抑制脑缺血大鼠脑组织中趋化因子CKLF1表达,降低脑缺血炎性损伤,改善缺血后脑水肿,从而发挥脑保护作用。     

丁苯酞对db/db小鼠学习记忆及海马NR2B受体的影响

目的 观察丁苯酞对2型糖尿病db/db小鼠学习记忆及海马N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)表达的影响,探讨丁苯酞改善糖尿病认知功能障碍的机制.方法 将16只db/db小鼠按随机数字表法分为丁苯酞干预组(L-NBP组,n=8)和糖尿病对照组(DM组,n=8),同窝出生的db/m小鼠作为正常对照组(NC组,n=10).适应性喂养1周后,L-NBP组每日以溶于植物油中的丁苯酞灌胃,剂量为120 mg·kg-1,DM组与NC组则给予同等剂量的植物油灌胃,干预6周后,进行指标观察.应用Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力.实时荧光定量PCR检测NR2B mRNA的表达情况.结果 与NC组比较,DM组小鼠逃避潜伏期延长和平均探索次数减少(P＜0.05),而L-NBP组小鼠较DM组上述学习记忆成绩明显改善(P＜0.05);与NC组相比,DM组和L-NBP组小鼠海马CA1区NR2B mRNA表达水平明显下降(P＜0.05),而L-NBP组较DM组NR2B mRNA表达水平明显增高(P＜0.05).结论 丁苯酞可改善糖尿病引发的认知功能障碍,推测其机制可能与上调海马NP,2B的表达有关.     

IGF-1通过P38MAPK信号下调急性脑梗死大鼠脑组织中凋亡蛋白的表达及其意义

目的:探讨IGF-1通过调控p38MAPK影响急性脑梗死大鼠脑组织细胞凋亡的机制.方法:利用Western-blot检测假手术组(sham),手术组术后24h(MCAO-24h),IGF-1治疗组(IGF-1)3组大鼠脑组织中IGF-1、p38、p-p38,Caspase3和Caspase9和蛋白表达水平.采用ELISA方法检测各组大鼠外周血中IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平.结果:各组大鼠脑组织中IGF-1蛋白含量比较,MCAO-24h组(0.71 ±0.05)低于Sham组(1.01±0.20)(t=2.85,P＜0.05),IGF-1组(1.54±0.12)高于MCAO-24h组(t=7.19,P＜0.05);各组大鼠外周血中IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平比较,MCAO-24h组(55.25±2.84) (222.02±12.77) (6.78±0.01)细胞因子分泌水平均高于Sham组(30.94±1.09) (128.16±5.92)(28.88±1.54)(t=13.82,11.55,4.25,P＜0.01;P＜0.05);IGF-1处理组(40.54±2.89(184.98±15.28) (33.39±0.91)细胞因子分泌水平低于MCAO-24h组(t=6.28,3.22,3.18,P＜0.01;P＜0.05);各组大鼠脑组织中p-P38/p38蛋白含量比较,MCAO-24h组(1.51±0.24)高于Sham组(1.03±0.06)(t=5.05,P＜0.05)和IGF-1组(0.90±0.20)(t=11.15,P＜0.01);各组大鼠脑组织中Caspase3蛋白含量比较,MCAO-24h组(1.61±0.06)高于Sham组(1.10±0.03)(t=7.18,P＜0.05)和IGF-1组(1.14±0.05)(t=4.27,P＜0.05);各组大鼠脑组织中Caspase9蛋白含量比较,MCAO-24h组(1.59±0.08)高于Sham组(1.14±0.06)(t=5.88,P＜0.05)和IGF-1组(1.27±0.05)(t=5.08,P＜0.05).结论:IGF-1是参与急性脑梗死发生后脑组织细胞凋亡重要因子.其作用机制是其调控p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路,阻断p38和p-P38的活化,进而抑制下游凋亡因子caspase-3和caspase-9活化,起到保护大鼠脑组织神经细胞的作用.     

液化石油气中毒大鼠脑组织p38MAPK的表达及意义研究

目的 观察p38MAPK在液化气中毒大鼠脑组织中的表达,探讨p38MAPK信号通路在液化气中毒大鼠发病中的作用.方法 采用大鼠液化石油气中毒模型,动物分别于中毒后1、3、7d处死,苏木精-伊红染色观察脑组织神经细胞的形态变化,免疫组化方法检测脑组织p38MAPK的表达水平.结果 大鼠液化石油气中毒后大脑皮质神经元细胞核浓缩、结构不清,可见神经元坏死迹象.免疫组化技术观察显示p38MAPK在急性液化气中毒大鼠脑组织中的表达与正常组比较明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 p38MAPK信号传递途径促进液化石油气中毒诱导的大鼠脑组织神经元坏死,在液化石油气中毒大鼠发病中起重要作用.     

丁苯酞对大鼠心肌缺血再灌注损伤的预防作用及机制研究

目的:研究丁苯酞对大鼠心肌缺血再灌注损伤的预防作用及机制。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和丁苯酞低、中、高剂量组(50、75、100 mg/kg),每组10只,各组大鼠每天ig相应药物1次,假手术组及模型组大鼠ig等量生理盐水,连续3d。末次给药后除假手术组外其余各组大鼠再灌注120 min后检测各组大鼠心肌梗死面积比例、细胞凋亡率、凋亡相关蛋白[促凋亡蛋白(Caspase-3、Fas、Caspase-9)、抑制凋亡蛋白(Bcl-2)]表达、左室射血分数(LVEF)和血清中血管内皮生长因子(VEGF)含量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠的心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率均明显升高,心肌细胞中Caspase-3、Fas、Caspase-9蛋白表达明显增强,Bcl-2蛋白表达明显减弱,LVEF和血清VEGF含量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,除丁苯酞低剂量组大鼠的LVEF无明显变化(P>0.05)外,其余各给药组大鼠的上述指标均明显改善(P<0.05)。与丁苯酞低剂量组比较,丁苯酞高剂量组大鼠的心肌梗死面积、细胞凋亡率均明显降低(P<0.05);丁苯酞中、高剂量组大鼠心肌细胞中Caspase-3、Fas、Caspase-9蛋白表达明显减弱,Bcl-2蛋白表达明显增强(P<0.05)。结论:丁苯酞可有效减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,保护心功能,其机制可能与上调VEGF有关。     

硫化氢在SB203580影响肝星状细胞增殖、凋亡中的作用

【摘要】目的 探讨H₂S 在 P38 丝裂原活化蛋白激酶（P38MAPK）阻断剂 SB203580 影响大鼠肝星状细胞（HSC）-T6增殖、凋亡中的作用及对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法设对照组（HSC加含10%胎牛血清的DMEM培养液）、二甲基亚砜（DMSO）组（对照组基础上加DMSO）、NaHS组（对照组基础上加NaHS至最适浓度）、SB组（DMSO组基础上加SB203580至最适浓度）、SB+NaHS组。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定SB203580及H2S对HSC的增殖抑制率（IR）;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术（FCM）检测HSC凋亡率;逆转录PCR法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA的表达。结果SB组（7.64±2.46）、SB+NaHS组（12.71±2.73）细胞凋亡率高于对照组（1.70±0.88）,且SB+NaHS组高于SB组（均P＜0.05）;DMSO组（2.07±1.18）、NaHS组（2.56±1.23）与对照组差异无统计学意义。Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA在各组细胞中均表达,其中NaHS组表达高于对照组（P＜0.05）,且表达量最多,条带最亮、最宽,SB组与SB+NaHS组表达低于对照组和NaHS组（P＜0.05）,表达量较少,条带较暗。结论H₂S激活P38MAPK信号通路,且SB203580特异性阻断P38MAPK信号通路后,H2S刺激的HSC增殖受到抑制,凋亡得到促进。     

下调TMEM97对卵巢癌细胞SKOV3增殖、凋亡的影响及其相关机制探讨

目的　观察下调跨膜蛋白97（TMEM97）对卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法　将卵巢癌细胞SKOV3分为转染组（si-TMEM97组）、阴性对照组（siNC组）和空白对照组（Control组）。采用实时荧光定量PCR（qPCR）及Western blot法分别在mRNA和蛋白表达水平评估转染siRNA-TMEM97后TMEM97的沉默效果;分别在转染后采用CCK-8法、PI染色法、Annexin V-FITC/PI染色法和流式细胞术检测下调TMEM97对细胞的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响,并检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白质（Bax）及P38丝裂原活化蛋白激酶（P38 MAPK）通路相关蛋白（P38/MAPK、p-P38/MAPK）的表达变化。结果　si-TMEM97组细胞的增殖能力相比Control组和siNC组降低,而早期凋亡率增高（均P＜0.01）。si-TMEM97组细胞Bcl-2的蛋白相对表达量较Control组和siNC组降低,而Bax、p-P38/MAPK的蛋白相对表达量较Control组和siNC组增高（均P＜0.05）。结论　下调TMEM97的表达使卵巢癌细胞SKOV3增殖减少,凋亡增加,这可能与调节凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达及P38/MAPK信号通路的激活有关。     

丁苯酞对大鼠骨髓间充质干细胞炎性损伤的改善作用及机制

目的 研究丁苯酞对大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）炎性损伤的改善作用及其可能机制。方法 将大鼠BMSCs分为对照组、模型组和丁苯酞低、中、高浓度组（10、20、50μmol/L）。体外培养BMSCs并采用脂多糖（终浓度为10 mg/L）建立炎性损伤模型,经丁苯酞干预后检测细胞存活率、凋亡率和细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)含量以及细胞中核因子κB(NF-κB)p65 mRNA和胱天蛋白酶3(caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和NF-κB p65蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组细胞存活率和Bcl-2蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）;细胞凋亡率,TNF-α、IL-1β、IL-6含量,NF-κB p65 mRNA以及caspase-3、Bax、NF-κB p65蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）。与模型组比较,丁苯酞各浓度组上述指标均显著逆转（P<0.05）,且呈浓度依赖性。结论 丁苯酞对脂多糖诱导的BMSCs炎性损伤具有改善作用,其机制可能与抑制...     

丁苯酞对兔视网膜缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的 观察丁苯酞对兔视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)后凋亡因子P53/Bcl-2表达的影响。方法 选取新西兰白兔80只(均为雄性),采用随机数字表法分为对照组10只,RIRI组和给药组各35只,其中对照组再分为6 h、24 h两个亚组,RIRI组和给药组均再分为再灌注后1 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、7 d等7个亚组。制作兔RIRI模型的方法采用高眼压灌注法,HE染色法观察视网膜组织形态变化,免疫组化法检测P53及Bcl-2的表达,TUNEL法检测神经节细胞的凋亡。结果 P53、Bcl-2及TUNEL凋亡细胞均在对照组检测到极少的表达,在RIRI组组内不同时间点的表达均为先增多后减少的趋势,24 h时达到最高峰,分别为(22.60±1.14)(P53、24 h)、(28.00±1.87)(Bcl-2,4 h)、(27.20±0.83)(凋亡,24 h),差异有统计学意义(均P＜0.01);给药组最高峰出现在24 h,分别为(13.40±0.54)(P53、24 h)、(34.60±1.67)(Bcl-2,24 h)、(19.40±2.30)(凋亡,24 h),差异有统计学意义(均P＜0.01)。组间比较P53及TUNEL凋亡细胞的表达各个时间点均较RIRI组明显减少(均P＜0.05),Bcl-2蛋白的表达较RIRI组增多(P＜0.01)。结论 RIRI后行丁苯酞药物治疗可抑制视网膜神经节细胞P53的表达,增强Bcl-2的表达,减少神经节细胞的凋亡,对RIRI有一定的保护作用。     

丁苯酞对Aβ1-42致阿尔茨海默病模型大鼠记忆的影响作用和可能机制

目的 探讨丁苯酞(3-n-Butylphthalide,NBP)对Aβ142致阿尔茨海默病模型大鼠记忆的影响作用与可能机理.方法 将Aβ1-42制备的AD大鼠随机分为五组,对照组,AD模型组、NBP 40 mg/kg组、NBP 80 mg/kg组和NBP 160 mg/kg组,20只/组,对照与模型组给予蒸馏水,给药30 d.结果 对照组大鼠状态良好,AD模型组大鼠精神萎靡,活动迟缓,进食量少,体质量增高不明显,NBP组大鼠的状态介于模型和对照组间.与对照组比,AD模型组逃避潜伏期延长,SOD和OH-降低,胆碱酯酶增高(P＜0.05).NBP组可明显降低AD大鼠逃避潜伏期,增高SOD和OH,降低胆碱酯酶(P＜0.05),与NBP低剂量组比,NBP中、高剂量可明显降低逃避潜伏期时间、增高OH、降低胆碱酯酶(P＜0.05).与对照组比,AD模型组的Tau表达明显增高(P＜0.05),AKT表达明显降低(P＜0.05),与AD模型组比,NBP组的Tau表达明显降低(P＜0.05),AKT表达明显增高(P＜0.05).结论 NBP可明显改善AD大鼠的记忆能力,可增高脑内SOD和OH,降低胆碱酯酶,改善脑内Tau和AKT表达.     

子宫中隔切除术后预防粘连方法探讨

目的 探讨子宫中隔并不孕患者宫腔镜术后不同处理方法预防宫腔粘连的效果.方法 55例子宫中隔并不孕患者行腹腔镜监护下宫腔镜子宫中隔切除术(TCRS),术后针对不同患者采用不同术后处理措施,包括宫腔放置与不放IUD,是否进行人工周期治疗,部分患者术后使用GnRH-a类药物治疗术后第1、3个月行宫腔镜检查随访,宫内放置IUD的患者;于术后第3个月取环.结果 54例患者术后进行宫腔镜检查随访,其中40例分别于术后第1、3个月完成了术后2次宫腔镜检查,另14例只完成一次检查.宫腔术后放环与否对术后宫腔形态影响无差异(P>0.05),术后使用人工周期治疗患者较未使用者子宫内膜厚,此两者术后第3个月宫腔镜检查发现宫底创面均已有内膜覆盖.使用GnRH-a类药物患者术后官腔形态满意.结论 TCRS术后宫腔放置IUD无助于预防术后粘连的发生;术后人工周期治疗应更个体化并有针对性的使用GnRH-a类药物治疗.术后及时进行宫腔镜检查随访可防止术后宫底新粘连的形成.     

欧洲药典适用性认证介绍

目的介绍欧洲药典适用性认证程序,为国内药品监管机构和原料药生产企业提供信息,促进我国原料药生产企业的国际化。方法通过查阅调研欧盟相关药品法规和与EDQM同行面对面的交流,详细了解欧洲药典适用性认证的组织机构和具体程序。结果与结论欧洲药典适用性认证程序在对原料药的质量控制有重要作用,加强了药典的监管力度,进一步保证了原料药的质量、安全性和有效性。     

槲皮素代谢产物定性检出条件研究

目的:研究给予大鼠槲皮素后血浆中代谢产物的定性检出条件。方法:给予大鼠槲皮素单体(100mg.kg-1)后腹腔静脉取血,血浆样品经2mol.L-1盐酸(甲醇-水溶液)水解,采用高效液相色谱法对血浆样品中代谢产物进行定性分析。结果:大鼠给药后3h内取血、血浆样品经盐酸水解处理4h,可稳定检测槲皮素和异鼠李素,样品在—20℃条件下贮存稳定。结论:血浆样品采集时间、盐酸水解时间及贮存方式等不同均可影响代谢产物的有效检出。     

甲泼尼龙佐治毛细支气管炎疗效观察

目的探讨甲泼尼龙与布地奈德治疗毛细支气管炎的疗效。方法将182例毛细支气管炎患儿随机分成三组,三组均采用综合治疗,A组62例用甲泼尼龙静脉滴注,B组60例雾化吸入布地奈德,C组60例用静滴氢化可的松,观察三组喘憋、哮鸣音消失和住院时间。结果A组喘憋、哮鸣音消失时间及住院时间均比B,C组缩短（P〈0.05）。结论甲泼尼龙静滴治疗毛细支气管炎有效、安全、方便,明显加快治愈过程,优于布地奈德与氢化可的松。     

绝经妇女宫颈涂片特点及诊断

目的:探讨绝经妇女宫颈病变的诊断及筛查的必要性。方法:对980例绝经妇女宫颈涂片特点进行回顾性分析。结果:未绝经组及绝经组宫颈Ⅱb涂片的检出率分别为5.17%及4.08%,两组比较差异无显著性(P>0.05)。两组涂片检查的敏感性无差别,特异性差异有显著性(P<0.05)。结论:对绝经妇女进行宫颈细胞学筛查是非常必要。     

复发性耳廓假性囊肿的治疗

目的 探讨不同方法对复发性假性耳廓囊肿的治疗效果.方法 对2008年5月至2012年2月在我科就诊的58例复发性假性耳廓囊肿分成2组,穿刺抽液+冷冻+加压包扎组(19例),手术切除囊肿前壁软骨+对穿缝合组(39例),随访3个月到1年,观察2组治愈率、复发率,有效率、并发症等情况.结果 对照组1次治愈后痊愈5例,复发14例,治愈率为26.3％,复发率为73.7％,有效率为78.9％,其中耳廓增厚6例,1例并发化脓性软骨膜炎.观察组治愈38例,复发1例,经过1次穿刺后治愈,治愈率为97.4％,复发率为2.6％,有效率为100.0％.所有患者无耳廓变形、增厚,无化脓性耳廓软骨膜炎的并发症.结论 囊肿前壁软骨切除+对穿缝合是治疗复发性假性耳廓囊肿的高效、首选办法,值得推广.     

新疆维吾尔自治区基层医院平均住院日调查分析

目的 通过对新疆维吾尔自治区14个县乡级医疗机构住院患者平均住院日及影响因素进行分析,为县乡级医疗机构进一步提高医疗管理质量提供依据.方法 将2009-2010年1504例县乡级医院住院患者平均住院天数,按性别、年龄、院别、付费方式、疾病分类进行描述性统计和秩和检验分析.结果 不同性别间及院别间平均住院日差异均有统计学意义(均P＜0.05),男性平均住院日为10.39 d,女性为8.69d,乡级医院为9.27d,县级医院为9.50 d.不同年龄间平均住院日差异有统计学意义(P＜0.05),小于15岁组、15 ～24岁组、25～44岁组、45 ～65岁组、大干65岁组平均住院日分别为8.10 d、7.66d、8.83 d、10.26 d和11.33 d.自费患者平均住院日为8.39 d,新农合组为9.10 d,商业保险组10.17 d,社会基本医疗保险患者则为11.08 d.不同疾病分类间平均住院日差异明显,妊娠类平均住院日最短,为6.73 d,而肿瘤患者则为14.26 d.结论 不同性别、不同年龄段、不同疾病分类及不同付费方式间平均住院日存在差异,县级医疗机构和乡级医疗机构住院患者平均住院日也存在差异.     

住院患者精神用药情况调查分析

目的：了解目前住院精神患者的药物使用情况。方法：采用一日法调查西安市精神卫生中心403例住院精神患者诊断和治疗情况，并与上海市精神卫生中心2004年调查结果相比较。结果：①传统精神药物使用显著减少，新型精神药物使用占据首位；②抗精神病药物使用趋向小剂量化；③本组联用丙戊酸盐类药物显著增多；④我院精神药物使用情况与上海精神卫生中心比较有显著差异。结论：近年来精神药物使用情况已发生了显著变化，与新型精神药物疗效好，副作用少，患者依从性高有关。     

不同方法治疗慢性宫颈炎的疗效分析

目的慢性宫颈炎是妇科最常见的疾病之一,可引起盆腔脏器炎症,并且与宫颈癌的发生关系密切。本文诣在探讨不同方法在慢性宫颈炎中的疗效。方法回顾性分析新乡市中心医院收治的210例宫颈炎患者,采用药物保妇康栓、聚焦超声治疗及宫腔镜下宫颈电切术的临床效果进行统计分析。结果宫颈电切术治疗有效率为97.9%,明显高于另外两组,差异有统计学意义。结论宫腔镜下宫颈电切术治愈慢性宫颈炎,并且切除宫颈移行带,减少宫颈癌发生。     

利多卡因在小儿气管异物取出术中的应用

目的观察在小儿气管异物取出术的麻醉中静脉应用利多卡因是否较咽喉部喷雾更有利于抑制气道反射。方法拟行气管异物取出术的患儿随机分为A、B两组,每组14例,A组为利多卡因静脉组,B组为利多卡因喷雾组,A组诱导期注射咪唑安定0.1mg/kg、利多卡因3mg/kg、芬太尼1.5μg/kg、异丙酚2mg/kg;B组诱导期改利多卡因静注为咽喉部喷雾。麻醉维持以微量输液泵持续输入异丙酚5mg/(kg.h),A组加利多卡因2mg/(kg.h)泵入。观察麻醉诱导后和支气管镜置入气管后MAP、HR、SpO2的变化以及不良反应的发生率。结果①支气管镜置入气管后两组的MAP、HR、SpO2有显著差异(P<0.05)。②支气管镜置入气管后B组屏气、呛咳、气道痉挛的发生率明显高于A组(P<0.05)。结论全凭静脉复合利多卡因麻醉能够更有效的抑制气道反射,使小儿气管异物取出术的麻醉更趋平稳、合理。