树舌多糖组分的高效液相色谱分析

目的:分析树舌多糖组分的重均相对分子质量(Mw)及其分布,分析树舌多糖的单糖组成.方法:采用高效凝胶液相色谱法、示差折光检测器测定多糖组分的重均相对分子质量;气相色谱法测定单糖组成.结果:树舌多糖由3种具有不同重均相对分子质量的多糖组分组成;树舌多糖中含有6种单糖.结论:高效液相凝胶色谱法可有效分析树舌多糖组分的质量控制.     

气相色谱法分析方格星虫多糖的单糖组成

目的:研究方格星虫多糖的单糖组成。方法:采用3 mol.L-1三氟乙酸将方格星虫多糖水解成单糖,然后与盐酸羟胺进行衍生化反应,采用气相色谱法对其单糖组成进行分析。结果:方格星虫多糖的单糖组成主要为阿拉伯糖和葡萄糖,其质量分数分别为7.91%和79.32%。结论:此法简单、快速,重现性好,可用于方格星虫多糖的单糖组成分析。     

海参硫酸多糖的高温高压降解工艺及其降解机制

目的 分析海参硫酸多糖的高温高压降解工艺和降解产物的结构,探究硫酸多糖的高温高压降解的机理。方法 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法、分子排阻凝胶色谱法、薄层层析法、离子高效液相色谱法和PMP柱前衍生-高效液相色谱法分析多糖的分子量、硫酸根含量和单糖组成的变化,并利用液相色谱-质谱联用技术分析降解产物中硫酸寡糖的结构特征。结果当pH>7时,海参硫酸多糖在高温加压条件下未见明显降解。添加醋酸使溶液的pH降至6以下,海参硫酸多糖在100～121 ℃加热后,pH越低、温度越高、加热时间越长,分子量降低越明显。海参硫酸多糖的硫酸根和单糖组成在降解后变化很小,降解产物中存在一系列奇数和偶数的硫酸岩藻寡糖和硫酸软骨素寡糖,说明高温高压降解为无规断裂型和解聚断裂混合型。相同条件下,岩藻聚糖硫酸酯比硫酸软骨素更易被降解。 结论 本研究建立了高温高压法高效降解海参硫酸多糖的技术,该方法是一种回收率高、易控制、绿色环保的低分子量海参硫酸多糖的制备方法。     

藻糖蛋白单糖组成两种分析方法的初步探讨

目的探讨藻糖蛋白单糖组成的测定方法。方法采用气相色谱法和离子色谱法测定单糖组成。结果气相色谱法1不适于藻糖蛋白单糖分析,气相色谱法2较适合藻糖蛋白单糖分析;离子色谱法测得藻糖蛋白含7种单糖。结论两种方法均可用于单糖的定性定量分析,灵敏度高,重现性好。     

薄芝糖肽结构组成分析

采取薄层层析法分析单糖组成,高效液相色谱法测定分子量及其分布,高碘酸氧化、Smith降解等方法确证糖苷键类型,紫外、Tricine-SDS-PAGE和β-消除等方法确证结合态蛋白的存在,利用柱前衍生化高效液相法测定氨基酸的组成,对薄芝糖肽(Ganoderma Capenseglycopeptide,GCGP)结构组成进行研究。结果:GCGP的多糖部分由葡萄糖组成,连接方式为1→6和1→2两种,含有结合态蛋白,氨基酸组成分析显示GCGP富含谷氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、甘氨酸、苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、半胱氨酸,碱水解结果表明GCGP含微量色氨酸。糖肽连接方式初步定为O-连接。     

天花粉多糖的单糖组成分析及不同采挖期多糖含量比较

目的从天花粉中提取纯化多糖,在分析其单糖组成的基础上,建立测定天花粉多糖含量的方法,比较不同采挖时期天花粉中多糖含量的变化,为确定天花粉适宜的采挖时间提供依据。方法薄层色谱法和气相色谱法分析天花粉多糖的糖基组成,多糖的含量测定采用改良的苯酚一硫酸法。结果组成天花粉多糖的单糖残基为葡萄糖;9月～12月及次年1月所采挖的5批药材多糖含量分别为7．51％,6．16％,10．40％,18．90％和17．81％。结论天花粉多糖是一种由葡萄糖组成的均多糖;不同时期采挖的天花粉中多糖含量有显著差异,以12月和1月采挖的天花粉中多糖含量最高,所得结果对药材采收时间的确定有指导意义。     

二色桌片参的化学成分研究Ⅱ二色桌片参多糖-1，一种新的岩藻聚糖

利用乙醇沉淀分级技术从二色桌片参双酶水解液里分离到一种纯的活性多糖,定名PMI-1。用高效薄层层析法鉴定其组成的单糖,发现PMI-1只含有L-岩藻糖。根据其分析结果和理化特性,PMI－1应是由若藻糖基和岩藻糖-4硫酸酯基组成的均多糖。研究PMI－1的核磁共振谱,可认定它是一种具有直链的和α1－α联接的均多糖。因此它是一种新的岩藻聚糖。     

天冬多糖的提取与单糖组成分析

目的 从常用中药天冬中提取多糖,并建立柱前衍生化高效液相色谱法分析天冬多糖的单糖组成. 方法采用水提醇沉法提取天冬多糖. 用2 mol•L^-1 硫酸溶液将多糖水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)与水解后的单糖进行衍生化反应;衍生产物采用反相高效液相色谱法分离,并在250 nm波长处检测,研究天冬多糖的单糖组成. 结果 水提醇沉法提取的多糖经过精制后,所得多糖的平均含量可达95.84%. 用高效液相色谱法检测天冬多糖中单糖组成比例为甘露糖:鼠李糖:葡萄糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖(2.18:0.95:1.00:1.62:2.06). 结论 该多糖提取及精制方法可得到含量较高的天冬多糖. 柱前衍生的高效液相色谱法可用于天冬多糖的单糖组分分析,该法操作简便,结果 准确,适用于多糖中的单糖组成分析.     

柱前衍生化高效液相色谱法分析茯苓多糖的单糖组成

［摘要］目的建立柱前衍生化高效液相色谱法分析茯苓多糖的单糖组成。 方法用稀碱浸提法提取茯苓多糖,用三氟乙酸（TFA）水解,通过1 苯基 3 甲基 5 吡唑啉酮（PMP）衍生水解后的单糖,衍生物采用反相高效液相色谱（RP HPLC）250 nm紫外检测和梯度洗脱,研究茯苓多糖的单糖组成。结果6种标准单糖的衍生物实现了良好的分离并具有良好的峰形。茯苓多糖是由葡萄糖组成的均一多糖,与文献报道的一致。结论该方法简便,结果准确,可用于茯苓多糖或者其他多糖的单糖组成分析。     

天花粉多糖的组成及组分Ⅱ相对分子质量分析

目的：对天花粉多糖的组分及组分Ⅱ相对分子质量进行分析。方法：采用水提醇沉提取天花粉多糖,经纯化后进行气相-质谱联用分析得出多糖的组成。相对分子质量分析则采用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）。结果：天花粉多糖组分Ⅰ是含有葡萄糖,未知单糖一和未知单糖二的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ是含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和未知单糖三的杂多糖。天花粉多糖组分Ⅱ经高效凝胶渗透色谱法得重均相对分子质量（M_w）=42 025;10%大分子部分重均相对分子质量=197 011;10%小分子部分重均相对分子质量=6 676;分布系数（D）=2.56;数均相对分子质量（M_n）=16 427。结论：天花粉多糖组分Ⅰ和天花粉多糖组分Ⅱ的单糖组成不相同,天花粉多糖组分Ⅱ是一个相对分子质量段在42 025左右的大分子。     

桦褐孔菌多糖的纯化及其单糖组成分析

目的对桦褐孔菌多糖进行纯化,并对其中的单糖组成进行研究。方法桦褐孔菌粗多糖经过脱蛋白、脱色得到纯化多糖。柱前衍生化后利用气相色谱分析得到多糖的单糖组成。结果酶法+TCA法蛋白脱除率较高,为82.32%;多糖保留较多,为76.13%。聚酰胺层析柱法多糖脱色效果最好,脱色率高达93.39%,并且多糖保留率也高达81.68%。多糖脱蛋白后的纯度从之前的21.5%提升到80.4%,脱色后的纯度从80.4%提升到85.2%。桦褐孔菌的多糖主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,各单糖质量百分数分别占3.84%、3.69%、3.32%、18.52%、27.30%、28.17%。结论桦褐孔菌多糖最佳脱蛋白方法为酶法+TCA法,最适宜的脱色方法是聚酰胺层析柱法。气相色谱分析方法简便、灵敏,不但多糖纯度高,而且可以准确测出桦褐孔菌多糖中单糖组成。     

灵芝多糖的提纯、组成及活性研究

目的探讨灵芝多糖的分离纯化、单糖组成以及抗肿瘤活性。方法采用热水提取,Sevag法去蛋白质,乙醇分级沉淀,DEAE-32离子交换色谱法从灵芝子实体粉中分离得到灵芝多糖。用SephadexG-100凝胶柱色谱法判断其纯度及相对分子质量,用薄层色谱法及气相色谱法鉴定其单糖组成,溴化四唑蓝法测定其体外抗肿瘤活性。结果从灵芝子实体粉中分离得到两种粗多糖GLPⅠ、GLPⅡ。GLPⅠ进一步分离得到两种均一多糖GLPH1、GLPH2。GLPH1糖苷键为β型,相对分子质量为45000。GLPH1由葡萄糖、半乳糖和痕量甘露糖、岩藻糖组成。GLPH1对KB细胞、BGC细胞、B16细胞的增殖具有一定的抑制作用。结论灵芝多糖GLPH1可望开发成抗肿瘤药或辅助抗肿瘤药。     

高效液相色谱法建立银耳多糖特定图谱的研究

目的:建立银耳多糖特定图谱。方法:通过对银耳多糖PMP柱前衍生化,采用高效液相色谱法进行糖组成分析。结果:银耳多糖特定图谱由6个共有峰组成,为甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、木糖、岩藻糖以及1个未鉴定出的单糖。结论:高效液相色谱法建立多糖的特定图谱,其操作方法简便,分离度高,重复性及稳定性良好,该结果可有效控制银耳多糖的内在质量,同时可作为酸性杂多糖糖组成的测定方法。     

柱前衍生化HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成

目的建立PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生化HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成。方法采用水提醇沉法提取黄河滩枣多糖,多糖水解后进行PMP衍生化,HPLC法测定黄河滩枣多糖的单糖组成及摩尔比,并对等度和梯度洗脱两种模式的测定结果进行分析比较。结果黄河滩枣多糖由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖等六种单糖组成,它们的摩尔比约为0.54∶0.50∶0.27∶2.03∶5.40∶1.00,等度和梯度洗脱测定结果基本一致。结论本实验改进的等度洗脱方式更加简便易行,快速准确,适用于黄河滩枣多糖的单糖组成分析。     

益智多糖含量测定

目的 研究益智中多糖含量测定方法。方法 水提醇沉法提取粗多糖,Sevage法除蛋白,H₂O₂脱色,流水透析和冷冻干燥制备多糖。PMP(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)柱前衍生,HPLC测定其单糖组成。以益智精致多糖测得多糖对葡萄糖的换算因子,苯酚-硫酸法测定益智中多糖的含量。结果 益智多糖由葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖和阿拉伯糖五种单糖组成。益智多糖含量为12.91%,RSD=4.72%(n=5),平均加样回收率为99.1%,RSD为4.57%(n=5)。结论 该法简便,快捷,可用于益智多糖的含量测定。     

肉桂多糖的单糖组成分析及其降血糖作用研究

目的:分析肉桂多糖的单糖组成,并探讨其对糖尿病小鼠糖脂代谢的影响。方法:采用PMP-HPLC法分析肉桂多糖的单糖组成。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法建立糖尿病小鼠模型,将成模小鼠随机分成5组:模型组,二甲双胍组,肉桂多糖低、中、高剂量组。给药4周后检测各组小鼠的空腹血糖值(FBG)、血清生化指标、血清胰岛素(INS)、肝糖原和肌糖原含量;HE染色法观察胰腺病理学特征;qRT-PCR法检测GLUT2、PEPCK、GCK mRNA表达量;Western blot检测PEPCK、GCK蛋白表达量。结果:肉桂多糖主要由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,各单糖摩尔比依次为1.00∶2.79∶24.30∶2.12∶2.19。与模型组相比,各给药组的FBG和LDL-C水平显著下降,肝糖原和肌糖原水平显著上升;肉桂多糖高剂量组的TC、TG和LDL-C水平显著下降,HDL-C和INS水平显著上升。高剂量肉桂多糖可显著上调糖尿病小鼠肝脏中GCK、GLUT2的表达量,显著下调PEPCK表达量。结论:建立的PMP-HPLC分析方法操作简单可行,准确性、重复性良好。肉桂多糖对链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠具有降血糖作用,其降糖机制可能与调节糖脂代谢有关。     

盐藻多糖单糖组成分析的四种色谱方法比较

目的 通过对几种单糖组成分析的色谱方法进行比较,选择一种准确有效的方法测定盐藻多糖(PDS3)的单糖组成.方法 分别采用薄层色谱(TLC)法、糖腈乙酸酯衍生气相色谱(AA-GC)法、离子排阻液相色谱(IEC)法及1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生高效液相色谱(PMP-HPLC)法测定PDS3的单糖组成.结果 TLC法和IEC法无需衍生化处理,操作简便、快捷,但各单糖间的分离效果较差,只适合于单糖组成较为简单的多糖样品的定性分析.AA-GC法测定单糖组成灵敏度高,各单糖具有良好的分离度,并可进行定量分析,与质谱联用还在PDS3中新发现了一种2-甲氧基戊糖,但AA-GC法不适合糖醛酸和氨基糖的分析;PMP-HPLC法不仅灵敏度高,分离效果好,而且还可同时检测PDS3中11种中性、酸性和碱性单糖,该法测得PDS3中各单糖的摩尔比为:Gal:Man:Ara:Glc:Rha:Xyl:GlcUA:GalUA:GlcNAc:GlcN=19.3:10.6:6.9:1.6:1.1:1.0:12.9:6.4:4.1:1.6.另外,本实验还确定了PMP-HPLC法的最适衍生条件为:反应时间60min,反应温度70℃,NaOH与单糖的摩尔比为6:1,衍生试荆PMP与单糖的摩尔比为12:1.结论 PMP-HPLC法较其它色谱方法更适合于PDS3这类复杂样品的单糖组成分析.