树舌多糖组分的高效液相色谱分析

目的:分析树舌多糖组分的重均相对分子质量(Mw)及其分布,分析树舌多糖的单糖组成.方法:采用高效凝胶液相色谱法、示差折光检测器测定多糖组分的重均相对分子质量;气相色谱法测定单糖组成.结果:树舌多糖由3种具有不同重均相对分子质量的多糖组分组成;树舌多糖中含有6种单糖.结论:高效液相凝胶色谱法可有效分析树舌多糖组分的质量控制.     

当归多糖X—C—3—Ⅱ的分离纯化与组成研究

目的对中药岷当归[Angelicasinensis(Oliv)Diels]的水溶性成分进行研究,分离出有活性的单一的多糖组分.方法采用热水提取、乙醇沉淀、DEAE-SephadexA-25柱层析进行分离,凝胶色谱法测定相对分子质量,利用气相色谱法鉴定多糖组分中所含单糖的种类和它们之间的摩尔比.结果分离得到一个多糖组分X-C3-Ⅱ,相对分子质量为1.0×105,其中所含单糖的种类和它们之间的摩尔比为葡萄糖半乳糖阿拉伯糖鼠李糖半乳糖醛酸=56.022.118.91.91.1.结论x-C-3-Ⅱ为首次从该植物中分离得到,并且为均一性多糖.     

虫草多糖的分离纯化及结构鉴定

摘 要 目的： 分离纯化冬虫夏草菌发酵液多糖,并对虫草多糖的结构进行分析。方法: 采用液体发酵法培养冬虫夏草菌,水提醇沉法提取虫草发酵液多糖EPS和菌丝体多糖IPS,联合使用葡聚糖凝胶柱色谱对虫草多糖进行分离纯化,采用凝胶过滤法测定其纯度和相对分子质量,气相色谱法分析其单糖组成,再通过硫酸咔唑法分析糖醛酸含量。结果:经分离纯化得到多糖EPS的相对分子质量（Mr）为78 kDa,多糖含量为94.8%,单糖组成为甘露糖、葡萄糖和半乳糖,摩尔比为4.5∶8.0∶1.0;糖醛酸含量为6.0%。多糖IPS 的Mr为42 kDa,多糖含量为92.5%,单糖组成为甘露糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为2.8∶3.0∶;糖醛酸含量为4.5%。结论: 虫草多糖EPS和IPS均是杂多糖。     

松木层孔菌杂多糖中的3-O-甲基-半乳糖的分析鉴定

目的:分析鉴定松木层孔菌子实体杂多糖中的未知单糖组分。方法:松木层孔菌子实体经提取分离纯化得到水溶性均一多糖组分PP80W,HPLC法测定其均一性和分子量。PP80W经水解、还原和乙酰化后采用GC法对照测定其单糖组分,并对其中未知的1个单糖组分采用GC-MS、DEPT-135和2D NMR(1H-1H COSY、TOCSY、HMQC、HMBC和NOESY谱)进一步分析鉴定。结果:PP80W相对分子质量为2.99×103,GC分析发现PP80W由鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖和1种未知单糖构成,GC-MS和核磁共振分析鉴定该未知单糖为3-O-甲基-半乳糖。结论:PP80W为含有3-O-甲基-半乳糖结构的杂多糖组分。     

天花粉免疫活性多糖RTPS-的分离及性质结构研究

摘 要 目的：从天花粉中分离纯化免疫活性多糖RTPS-Ⅰ,并进行性质、组成和初步结构研究。方法: 采用水提醇沉方法制备天花粉粗多糖,经过三氯乙酸法除蛋白,DEAE-Cellulose、DEAE Sepharose FF和Sephadex G-200柱色谱分离纯化,得到均一的免疫活性多糖组分RTPS-Ⅰ。利用化学法、高效凝胶过滤色谱法、气相色谱法,并结合红外光谱和核磁共振,对RTPS-Ⅰ进行性质结构分析。结果: RTPS-Ⅰ为白色絮状固体,易溶于水,由碳、氢、氧3种元素组成,比旋光度［α］25D(H2O)为+164.44,相对分子质量为17 555,糖基组成为葡萄糖,不含糖醛酸,糖环为吡喃环,各单糖间以α-型糖苷键相连接。结论:首次从天花粉中分离得到均一的免疫活性多糖RTPS-Ⅰ。     

蜜环菌多糖的分离纯化及PMP衍生化HPLC分析

目的:对蜜环菌发酵液进行多糖的提取、分离纯化,得到均一多糖,对其进行单糖组分分析.方法:分离纯化采用分步醇沉和葡聚糖凝胶(Sephadex G-200)色谱法;纯度鉴定及分子量测定采用高效液相色谱法;单糖组成采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生HPLC法测定.结果:获得两种均一多糖(AMFP-Ⅰ、AMFP-Ⅱ),峰位分子量分别为 812 939D、596 217D,重均分子量(MW)分别为995 098D、872 640D,分布宽度(Mw/Mn)分别为1.268 93、1.235 20;测定单糖组成为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖.结论:两种多糖分子量分布及单糖组成均不同,AMFP-Ⅰ主要由半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖组成,AMFP-Ⅱ主要由半乳糖醛酸、半乳糖、木糖组成.     

灵芝孢子多糖两纯组分的单糖组成研究

目的：对灵芝孢子多糖的2个纯多糖组分GLPSl和GLPS3的单糖组成进行分析。方法：将灵芝孢子多糖原料精制，SephacrylS一400SF型凝胶分离纯化得2个主要组分GLPSl和GLPS3，经酸水解后TLC法和HPLC法鉴别单糖组成，改良的1一苯基一3一甲基一5一吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化HPLC法分析单糖组成比例，同时采用LC—MS联用技术鉴定单糖PMP衍生化产物。结果：GLPSl的单糖组成为D一甘露糖：D一葡萄糖：D一半乳糖=1：9．228：1．474；GLPS3的单糖组成为D一甘露糖：D．葡萄糖：D．半乳糖=1：15．900：3．686。结论：灵芝孢子多糖二纯组分均含D一甘露糖，D．葡萄糖和D一半乳糖，仅各单糖的比例不同。     

普通念珠藻中多糖的分离纯化研究

目的 研究普通念珠藻多糖分离纯化方法,并测定其相对分子质量.方法 采用水提醇沉法制备粗多糖,Molish反应和硫酸苯酚法对其进行定性和定量检测,二乙胺基乙基纤维素离子交换柱色谱法进行分离纯化,高效凝胶渗透色谱法测定其相对分子质量.结果 普通念珠藻粗多糖的提取率为8.6％,分离获得一个组成均一的酸性多糖组分NSP,其重均相对分子质量为402 717.结论 NSP为首次从普通念珠藻中分离得到一个酸性多糖组分.     

灵芝多糖的提纯、组成及活性研究

目的探讨灵芝多糖的分离纯化、单糖组成以及抗肿瘤活性。方法采用热水提取,Sevag法去蛋白质,乙醇分级沉淀,DEAE-32离子交换色谱法从灵芝子实体粉中分离得到灵芝多糖。用SephadexG-100凝胶柱色谱法判断其纯度及相对分子质量,用薄层色谱法及气相色谱法鉴定其单糖组成,溴化四唑蓝法测定其体外抗肿瘤活性。结果从灵芝子实体粉中分离得到两种粗多糖GLPⅠ、GLPⅡ。GLPⅠ进一步分离得到两种均一多糖GLPH1、GLPH2。GLPH1糖苷键为β型,相对分子质量为45000。GLPH1由葡萄糖、半乳糖和痕量甘露糖、岩藻糖组成。GLPH1对KB细胞、BGC细胞、B16细胞的增殖具有一定的抑制作用。结论灵芝多糖GLPH1可望开发成抗肿瘤药或辅助抗肿瘤药。     

天花粉多糖的单糖组成分析及不同采挖期多糖含量比较

目的从天花粉中提取纯化多糖,在分析其单糖组成的基础上,建立测定天花粉多糖含量的方法,比较不同采挖时期天花粉中多糖含量的变化,为确定天花粉适宜的采挖时间提供依据。方法薄层色谱法和气相色谱法分析天花粉多糖的糖基组成,多糖的含量测定采用改良的苯酚一硫酸法。结果组成天花粉多糖的单糖残基为葡萄糖;9月～12月及次年1月所采挖的5批药材多糖含量分别为7．51％,6．16％,10．40％,18．90％和17．81％。结论天花粉多糖是一种由葡萄糖组成的均多糖;不同时期采挖的天花粉中多糖含量有显著差异,以12月和1月采挖的天花粉中多糖含量最高,所得结果对药材采收时间的确定有指导意义。     

树舌多糖的分离纯化、理化性质及抗炎镇痛活性研究

目的：分离纯化树舌多糖,获得均一多糖,并对其理化性质进行研究。对树舌多糖抗炎镇痛活性进行研究。方法：分离纯化采用DEAE离子交换色谱法和葡聚糖凝胶色谱法;纯度鉴定及分子量测定采用高效液相色谱法,示差折光检测器;单糖组成采用气相色谱质谱联用法测定。抗炎实验采用小鼠二甲苯性耳廓水肿法及大鼠角叉菜胶足肿胀法,镇痛实验采用小鼠醋酸扭体法。结果：获得三种均一多糖（GapsⅠ、GapsⅡ、GapsⅢ）,峰位分子量分别为6221、5535、3518D。红外光谱证实GapsⅢ结构中有β构型异头碳,核磁共振氢谱和碳谱均证实GapsⅢ结构中有α、β构型异头碳。树舌多糖明显减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜致大鼠足肿胀,并减少小鼠扭体次数。结论：三种多糖分子量分布及单糖组成均不同,均主要由葡萄糖组成。     

紫贻贝多糖的提取、分离和基本理化性质分析

目的从紫贻贝(Mytilus edulis Linnaeus)中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质进行分析,为贻贝多糖的结构和活性研究提供依据。方法依次采用冷水,木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解的方法提取贻贝粗多糖,并对粗多糖的总糖、蛋白、糖醛酸、糖胺聚糖和硫酸根含量进行分析。分别采用Sephacryl S-300凝胶柱层析和QSepharose 4 Fast Flow阴离子交换柱层析对粗多糖进行分离和纯化,并对纯化后的组分进行单糖组成、纯度及相对分子质量分析。结果从紫贻贝中经提取和分离共得到了8种水溶性多糖组分,其中水提组分LTS1-A单糖组成较简单,只含Glc。其余各组分单糖组成相对复杂,主要含有Man、GlcN、Gal和Fuc。采用高效凝胶渗透色谱法对各多糖组分进行分析都呈现较为均一的色谱峰,表明具有较好的纯度,各组分相对分子质量范围约为3.0~40 kD。结论采用水提和酶提方法得到了具有不同理化性质的多糖,经两步层析分离能够得到纯度较高的多糖组分,为下一步紫贻贝多糖结构和活性的深入研究提供了依据。     

锡兰海木耳多糖的提取、理化性质及抗氧化活性研究

目的 从红藻锡兰海木耳（Sarcodia ceylonensis）中提取多糖,对其化学组成和理化性质进行分析,并进行体外抗氧化活性评价。方法 依次通过冷水、热水（85 ℃）和4% NaOH溶液提取海木耳多糖;通过化学方法测定其总糖和硫酸根含量;利用PMP柱前衍生高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法、红外光谱等方法对其单糖组成、相对分子质量和结构特征进行分析;通过测定其对超氧阴离子自由基（O2-）、羟自由基（?OH）和DPPH自由基的清除作用、对Fe2+的螯合能力和还原能力评价其体外抗氧化活性。结果 3种多糖SCW（冷水提取多糖）、SCH（热水提取多糖）和SCA（碱液提取多糖）的相对分子质量分别为6.65 × 105、2.55 × 105和1.35 × 105;单糖组成相似,均含有半乳糖、岩藻糖、甘露糖和葡萄糖醛酸,其中3,6-内醚-半乳糖和半乳糖含量均达到20%以上;硫酸根含量较高,分别为12.74%、13.46%和19.76%;3种多糖对O2-、?OH和DPPH自由基均有显著的清除作用,对Fe2+均表现出显著的螯合能力,其中SCA抗氧化活性最强。结论 从锡兰海木耳中提取得到3种硫酸多糖,均具有显著的体外抗氧化活性,为其将来作为食品和化妆品添加剂提供了有用参考。     

宁心宝胶囊多糖组分的HPLC分析

目的：建立宁心宝胶囊多糖组分的相对分子质量及其分布测定方法。方法：高效液相色谱法，采用Shodex SB-803HQ、SB-804HQ、SB-805HQ（8．0mm×300mm，5μm）3根凝胶色谱柱串联分离，以磷酸盐缓冲液（pH7．8～8．0）为流动相，流速为0．8mL·min^-1，柱温和检测器温度均为30℃，示差检测，进样量20μL，GPC软件分析。结果：宁心宝胶囊中所占比例最大的多糖组分重均相对分子质量为28749—129690，多分散性为1．12～3．73。结论：不同厂家的宁心宝胶囊多糖组分相对分子质量和相对分子质量分布存在一定差异，可作为其质量控制指标。     

气相色谱法测定吐鲁番无核白葡萄树伤流液组成多糖的单糖

目的对吐鲁番葡萄树伤流液多糖进行分离纯化,并分析其单糖组成。方法采用醇沉法提取多糖,Sevage法脱蛋白,经DEAE-52纤维素柱及Sephadex G-150凝胶柱分离纯化,采用气相色谱分析单糖组成。结果用体积分数80%乙醇沉淀、Sevage法除蛋白,得葡萄树伤流液粗多糖,粗多糖经过DEAE-52纤维素柱分离得到8个多糖组分,编号分别为:组分-1,组分-2,组分-3,组分-4,组分-5,组分-6,组分-7,组分-8。其中4个多糖组分经过Sephadex G-150纯化后,通过GC分析组分-1和组分2含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖;组分-3含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖;组分-5含有鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖。结论该方法可较好地分离纯化葡萄树伤流液多糖。采用GC分析多糖的单糖组成,研究结果适用于多糖中的单糖组成分析。     

药用真菌马勃多糖的分离纯化及结构分析

目的 研究马勃多糖的分离纯化及基本性质.方法 以马勃为材料,经热水浸提,用Sevag法脱蛋白,乙醇沉淀,经DEAE-sepharose FF和Sephacryl S-300 HR层析纯化制备多糖;采用Sephacryl S-300 HR凝胶层析,200～360 nm扫描和SDS-PAGE鉴定多糖的纯度,并测定多糖的表观分子质量;GC-MS分析单糖的组成和摩尔比;咔唑-硫酸法测定糖醛酸的含量;高碘酸氧化、Smith降解和红外光谱分析其结构.结果 经分离纯化得到CGP-Ⅱ、CGP-Ⅱ、CGP-Ⅲ主要多糖组分,经凝胶层析检测显示单一对称蜂;琼脂糖电泳显示单一多糖条带,未见蛋白染色条带,200～360 nm扫描未见特征吸收峰.CGP-Ⅰ、CGP-Ⅱ和CGP-Ⅲ的表观分子质量分别为9.12×10<'4>、18.6×10<'4>、15.6×10<'4>.3种多糖均含有甘露糖、葡萄糖和半乳糖,CGP-Ⅲ还含有另外一种未知单糖,各自的摩尔比分别为1.22∶11.28∶3.92、1.74∶26.45∶0.36、1.06∶9.9∶3.29.CGP-Ⅱ和CGP-Ⅲ的糖醛酸含量分别为17.2%和20.5%,为酸性多糖,CGP-Ⅰ为中性多糖.3种多糖均为1→4连接,有少量的1→6连接.CGP-Ⅰ以α-和β-差向异构为主;CGP-Ⅱ、CGP-Ⅲ以β型差向异构为主,均主要以吡喃糖形式存在.结论 对所纯化的马勃多糖进行了初步的性质研究与结构分析.     

威灵仙多糖的分离纯化及其理化性质

目的:对威灵仙多糖进行分离纯化,并进行组成和理化性质分析。方法:威灵仙根经热水提取、DEAE-SepharoseFF柱层析得到威灵仙多糖CCP-Ⅰ、CCP-Ⅱ、CCP-Ⅲ3个组分。CCP-Ⅲ再经Superdex-200柱层析得到威灵仙多糖CCP-Ⅲa、CCP-Ⅲb。通过HPLC和比色等方法对CCP-Ⅲa、CCP-Ⅲb进行分析测定,采用红外、气相色谱、高碘酸氧化等手段对其结构进行初步研究。结果:CCP-Ⅲa为均一组分,其总糖含量、糖醛酸含量分别为92.4%,27.6%,相对分子质量为3.1×105Da,单糖组成及摩尔比为鼠李糖-阿拉伯糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖(4.7∶1.0∶5.6∶26.4∶3.9);CCP-Ⅲb也为均一组分,其总糖含量、糖醛酸含量分别为89.9%,39.5%,相对分子质量为1.5×105Da,单糖组成及摩尔比为鼠李糖-甘露糖-葡萄糖-半乳糖(1.5∶1.0∶25.8∶16.3)。糖苷键主要为β-构型,且均含有1→3、1→6连接键型。结论:CCP-Ⅲa和CCP-Ⅲb是2种均一的酸性杂多糖。     

爆发期条浒苔多糖的提取分离及其理化性质研究

目的从爆发期条浒苔中提取、分离多糖并对其理化性质进行研究。方法对干燥后的条浒苔乙醇脱脂后采用热水和热碱提取,得到了两种条浒苔粗多糖ECP1和ECP2,通过Q-Sepharose FF阴离子交换柱进一步分级,分别从ECP1和ECP2中得到ECP1A～F和ECP2A～F共12种多糖组分。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)分析多糖相对分子质量,并用高效离子色谱(HPIC)法分析各组分单糖组成。结果热水和热碱提取粗多糖得率分别为34.87%和14.77%,粗蛋白含量分别为0.39%和1.17%。单糖组成分析表明,多数组分中有高含量的鼠李糖以及不同含量的岩藻糖,葡萄糖,木糖,半乳糖和糖醛酸。ECP1E～F和ECP2E～F中含有较多的葡萄糖醛酸,而ECP1B～D及ECP2D中则含有较多的艾杜糖醛酸。ECP1A、ECP1E和ECP1F以及ECP2A、ECP2E和ECP2F的相对分子质量分别为604、311、45、274、106和277kD;硫酸基含量分别为3.67%、30.39%、17.11%、0.3%、27.63%和15.89%。结论爆发期条浒苔中多糖含量高、蛋白含量低,除了含有鼠李糖和葡萄糖醛酸外,还含有少见的艾杜糖醛酸,尤其不含甘露糖,表明其与常规条浒苔多糖明显不同,是一类值得开发的新多糖资源。     

基于分子量分布的黄芪多糖抗炎活性组分筛选及代谢组学调控机制研究

黄芪多糖分子量分布广,常规水提醇沉制备的多糖为大分子混合物,虽有研究证明黄芪多糖具有双向免疫调节功能,然而免疫抑制或抗炎活性组分的多糖分子量分布及调控机制并不明确。因此,课题组通过水提醇沉法制备黄芪总多糖,采用凝胶色谱法对其测定分子量分布,结合超滤膜截留法分离制备不同分子量多糖组分,通过脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW 264.7过度炎症模型进行筛选,并采用LC-MS/MS代谢组学技术研究其调控机制。结果表明,黄芪多糖主要由APS-Ⅰ(大于2 000 kDa)和APS-Ⅱ(10 kDa)组成; APS-Ⅰ由Man、Rha、Gal A、Glu、Gal和Ara 6种单糖组成,各单糖组成比例约为0.54∶0.26∶12.24∶17.24∶8.46∶1; APS-Ⅱ由Rha、Gal A、Glu、Gal和Ara 5种单糖组成,各单糖组成比例约为0.26∶0.14∶24.04∶0.62∶1。APS-Ⅰ和APS-Ⅱ在0～100μg·mL^-1对RAW 264.7无毒性;与模型组相比, APS-Ⅰ在0～100μg·mL^-1...     

多肋藻(Costaria costata)多糖的提取分离及理化性质分析

目的 从多肋藻(Costaria costata)中提取分离多糖并对其进行理化性质分析.方法 采用水和2%碳酸钠水溶液于85℃提取多糖,采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)分析多糖相对分子质量,用核磁共振氢谱(<'1>H-NMR)法分析褐藻胶中M/G比,用高效液相色谱法(HPLC)分析褐藻糖胶单糖组成.结果 从多肋藻中...