气相色谱法鉴别扇贝糖胺聚糖的中性糖基

从海湾扇贝中提取分离出糖胺聚糖，分子中除含有氨基己糖和己糖醛酸外，还含有中性糖基。样品经盐酸－甲醇试剂醇解成单糖，用六甲基二硅胺烷和三甲基硅烷硅醚化成三甲基硅醚衍生物，于气相色谱仪中测定，并与标准单糖比较分析，结果发现，扇贝糖胺聚糖含有５种中性糖基，即葡萄糖，半乳糖，木糖，岩藻糖和鼠李糖。     

扇贝糖胺聚糖的琼脂糖凝胶电泳分析

从海湾扇贝边中提取分离出扇贝糖胺聚糖，其红外光谱与肝素类似。将扇贝糖胺聚糖制品在０．０６ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ８．６巴绥缓冲系统中进行琼脂糖凝胶电泳分析，发现其电泳图谱显示单一区带。与糖胺聚糖标准品－肝素，透明质酸和６－硫酸软骨素对照，其电泳相对迁移率和肝素最为接近。     

扇贝糖胺聚糖的琼脂糖凝胶电脉分析

从海湾扇贝边中提取分离出扇贝糖胺聚糖,其红外光谱与肝素类似。将扇贝糖胺聚糖制品在0.06mol/L,pH8.6巴比妥缓冲系统中进行琼脂糖凝胶电泳分析,发现其电泳图谱显示单一区带;与糖胺聚糖标准品——肝素、透明质酸和6-硫酸软骨素对照,其电泳相对迁移率与肝素量为接近。     

栉孔扇贝不同部位多糖的提取分离及抗肿瘤活性研究

目的 研究栉孔扇贝不同部位（柱、性腺、肝脏、外套膜、鳃、足）多糖的抗肿瘤活性。方法 以新鲜栉孔扇贝为原材料,经胰蛋白酶水解、醇沉后得到栉孔扇贝不同部位多糖,通过柱前衍生高效液相色谱法进行栉孔扇贝不同部位多糖的单糖组成分析,以人宫颈癌细胞（Hela）和人肝癌细胞（HepG2）为对象对栉孔扇贝不同部位多糖的抗肿瘤活性进行研究。结果 从新鲜栉孔扇贝中提取得到六种多糖,分别为栉孔扇贝柱多糖（CFCP）、栉孔扇贝性腺多糖（CFGOP）、栉孔扇贝肝脏多糖（CFLP）、栉孔扇贝外套膜多糖（CFMP）、栉孔扇贝鳃多糖（CFGIP）、栉孔扇贝足多糖（CFFP）,其中CFCP仅含一种单糖,其余五种多糖均含十种单糖,且单糖摩尔比各不相同。栉孔扇贝六种部位多糖对Hela细胞的抑制率均随多糖浓度的增大而增大,其中CFLP抑制率最强。CFCP、CFGOP、CFMP对HepG2细胞的抑制率均较弱,CFLP、CFGIP、CFFP对HepG2细胞的抑制率均随多糖浓度的增大而增大,其中CFFP抑制率最强。结论 栉孔扇贝不同部位多糖对Hela细胞的抑制率由高到低依次为CFLP>CFGOP>CFMP>CFGIP>CFFP,对HepG2细胞的抑制率由高到低依次为CFFP>CFLP>CFGIP。同时,CFFP、CFMP、CFGIP、CFLP、CFGOP五种多糖对Hela细胞的抑制作用普遍高于HepG2细胞。     

扇贝糖蛋白中蛋白及多糖的组成

目的研究扇贝糖蛋白的蛋白及多糖的含量及组成。方法栉孔扇贝（Chlamys farreri）的扇贝边经水煮、分离纯化、醇沉及酶解等分离出扇贝酸性糖蛋白（FAGP）、扇贝中性糖蛋白（FNGP）、及扇贝多（FPS）；通过纸层析（PC）、氨基酸分析、UV、IR、元素分析等技术确定其单糖及元素组成。结果PC分析FAGP单糖组成为：葡萄糖、甘露糖、鼠李糖、岩藻糖、半乳糖、木糖、葡萄糖醛酸。主要元素含量C42．62％、H5．73％、N6．81％。     

栉孔扇贝边的营养价值和应用研究

采用酶解方法制备栉扇贝蛋白粉。测定了扇贝蛋白粉与扇贝柱中的氨基酸含量，分别为８３．８４％和７６．１５％，两者中氨基酸的组成比例基本一致。     

栉孔扇贝柱及扇贝边脂肪酸组成与含量

对山东烟台海洋养殖栉孔扇贝中的扇贝柱及扇贝边脂肪酸进行了比较研究。结果表明，扇贝柱和记忆吵饱和脂肪酸分别占脂肪酸总量的６５．０％和６６．２％，其中扇贝柱中高度不饱和脂肪酸为５５．１％，ＥＰＡ＋ＤＨＡ为３７．５％；扇贝边， 高度不饱和脂肪酸为４８．８％，ＥＰＡ－ＤＨＡ为２２．２％。     

扇贝糖胺聚糖对六羟基多巴胺诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

<正>研究报道[1-2]多种海洋多糖可通过抗氧化应激发挥神经保护作用,但海洋贝类多糖神经保护活性的研究则鲜有报道。扇贝糖胺聚糖(Chlamys farreri skirts glycosaminoglycan,CFS-GAG)是本组从海洋贝类栉孔扇贝裙边中提取的活性成分,已获专利(专利号:ZL200410035656.3)。已证实CFSGAG对血管内皮细胞氧化应激损伤有保护作用[3],本文研究其对六羟基多巴胺(6-OHDA)诱导SH-SY5Y神经元细胞凋亡的保护作用。     

扇贝糖蛋白的化学组成与抗肿瘤活性的研究

栉孔扇贝边经热水煮提,DEAE—纤维素及Sephadex G-100柱层析分离纯化后得栉孔扇贝糖蛋白Ⅰ[glycoprotein of Chlamys(Azumapecten)farreri Ⅰ,GCFⅠ],GCFⅠ经酶解后得栉孔扇贝糖蛋白Ⅱ(GCFⅡ),分别对GCFⅠ、GCFⅡ 进行化学组成分析及抗肿瘤活性研究。结果表明:GCFⅠ和GCFⅡ是蛋白组成、糖含量不同的糖蛋白,对小鼠S_(180)肉瘤均有明显的抑制作用,抑瘤率分别为47.29％、46.97％。药理实验提示:扇贝糖蛋白的抗肿瘤活性主要与分子中糖链的结构有关。     

扇贝中肠腺脂质的提取及脂肪酸分析

对大连沿海地区养殖的栉孔扇贝Chlamys farreri、虾夷扇贝Pecten yesoensis中肠腺中的脂质的提取方法及脂质中脂肪酸进行比较研究。结果表明,在冲气隔氧、提取温度为100℃、时间为60min、料水比为1:2条件下,脂质的水提取率最高,为3.01%。栉孔扇贝、虾夷扇贝中肠腺脂质中的不饱和脂肪酸分别占脂肪酸总量的32.0%和32.8%,其中2种扇贝中肠腺中EPA DHA的含量分别为13.6%和13.8%。     

海洋肽的体外抗氧化作用

海洋肽系栉了孔扇贝中提取的多肽,分子量为800～1000。为研究其抗皮肤衰老的作用机制,测定了海洋肽对由邻苯三酚自氧化产生的超氧阴离子、Fenton反应产生羟自由基的清除率,过氧化脂质的最终分解产物丙二醛(MDA),油脂过氧化值(peroxide value,POV)。结果表明,海洋肽(3％,15％)对超氧阴离子的清除率分别为11.7％和41.8％,对羟自由基的清除率分别为8.6％和38.4％,与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。同时,海洋肽(0.05％,0.50％)能降低5d和10d的POV和MDA含量(P<0.05,0.01)。实验证明,海洋肽通过有效清除超氧阴离子、羟自由基并抑制脂质过氧化而抗皮肤老化。     

Polypeptide from Chlamys farreri attenuates murine thymocytes damage induced by ultraviolet B

Aim： Polypeptide from Chlamysfarreri （PCF, molecular mass is 879） is a new marine polypeptide compound isolated from Chlamysfarreri. This study investigates the possible protective roles and the mechanism of PCF against ultraviolet B （UVB）-induced apoptosis in murine thymocytes. Methods： The rate of apoptosis and caspase-3 activation was measured by flow cytometry. The expression of stress-response genes c-fos and c-jun was observed by RT-PCR. Western blot analysis was performed to determine the release of cytochrome c. Results： It was found that UVB induced murine thymocyte death. The cells treated with UVB showed an increase in cytochrome c release, caspase-3 activity, as well as in the expression of c-fos and c-jun. In addition, all were involved in UVB-induced cell apoptosis. Conclusion： Our present observations pointed to the ability of PCF to avert UVB-induced apoptosis in thymocytes by modulating c-fos and c-jun expression, cytochrome c release, and the consequent activation of caspase-3, which were essential components of the UV-induced cell apoptotic pathway. The results suggested that PCF is a promising protective substance against UV radiation.     

扇贝多肽保护单次UVA氧化损伤HaUaT细胞

目的探讨扇贝多肽对单次长波紫外线辐射HaCaT角质形成细胞氧化损伤的保护作用机制。方法从栉孔扇贝中提取扇贝多肽(PCF,Mr=879)。UVA辐射强度为5J·cm-2。酶生化法测定胞质SOD,GSH-px活性,ROS、MDA水平;透射电镜观察细胞超微结构的改变;原位杂交技术检测细胞内p21mRNA的变化。结果在5J·cm-2UVA辐射下,在给定浓度范围内PCF能剂量依赖性降低胞质ROS、MDA水平;提高SOD,GSH-px活力;电镜下可见PCF可保护细胞超微结构;p21mRNA原位杂交发现PCF可明显抑制其表达。结论扇贝多肽对单次UVA诱导的人HaCaT细胞氧化损伤有保护作用。其机制与清除氧自由基、提高抗氧化酶活性、抑制p21mRNA表达及细胞凋亡有关。     

扇贝多肽保护单次UVA氧化损伤HaCaT细胞

目的探讨扇贝多肽对单次长波紫外线辐射HaCaT角质形成细胞氧化损伤的保护作用机制。方法从栉孔扇贝中提取扇贝多肽(PCF,Mr=879)。UVA辐射强度为5J·cm-2。酶生化法测定胞质SOD,GSH-px活性,ROS、MDA水平;透射电镜观察细胞超微结构的改变;原位杂交技术检测细胞内p21mRNA的变化。结果在5J·cm-2UVA辐射下,在给定浓度范围内PCF能剂量依赖性降低胞质ROS、MDA水平;提高SOD,GSH-px活力;电镜下可见PCF可保护细胞超微结构;p21mRNA原位杂交发现PCF可明显抑制其表达。结论扇贝多肽对单次UVA诱导的人HaCaT细胞氧化损伤有保护作用。其机制与清除氧自由基、提高抗氧化酶活性、抑制p21mRNA表达及细胞凋亡有关。     

从扇贝边料中分离DNA和卵磷脂的研究

从扇贝边料中提取DNA,其收率为4.11%;分离纯化了卵磷脂,其收率为0.53%.     

Inhibitory effect of polypeptide from Chlamys farreri on UVA-induced apoptosis in human keratinocytes

Polypeptide from Chlamys farreri (PCF, Mr = 879) is a novel marine active product isolated from gonochoric Chinese scallop Chlamys farreri which has been served as sea food for several thousand years. As an octapeptide, PCF consists of 8 amino acids, namely, Pro, Asn, Ser, Thr, Arg, Hyl, Cys, and Gly. PCF had been identified as a marine chemopreventive drug that protected hairless mice's epidermis against UV-induced damage in our previous study. However, the molecular mechanisms that underlie the effect of PCF on ultraviolet A-induced apoptosis in ketatinocytes are not well understood yet. In the present study, PCF was investigated as a potential inhibitory agent for UVA-induced apoptosis in a human keratinocyte cell line, HaCaT. The effects of PCF on UVA-induced generation of ROS and MDA, DNA damage, apoptosis rate were examined. We also investigated whether PCF could inhibit UVA-induced decreasing of mitochondrial membrane potential and the changing of morphology of the cells. We found that, compared with UVA only group, PCF attenuated UVA-induced generation of ROS and MDA, increased the mitochondrial membrane potential, and decreased the apoptosis rate. These results indicate that PCF may protect HaCaT keratinocytes against UVA-induced apoptosis.