胚胎种植前遗传学诊断的应用

胚胎种植前遗传学诊断 (ｐｒｅｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｇｅｎｅｔｉｃｄｉａｇｎｏ ｓｉｓ ,ＰＧＤ)是辅助生殖技术领域中的新兴技术 ,用于对着床前胚胎进行基因诊断。主要是指对体外受精 (ｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａ ｔｉｏｎ ,ＩＶＦ)的胚胎 ,待其发育到 4～ 8细胞期 ,显微操作下行卵裂球细胞活检[1,2 ] ,取出一个细胞 ,或者直接取受精前后的极体[3] ,对它们行聚合酶链反应 (ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃ ｔｉｏｎ ,ＰＣＲ)或荧光原位杂交 (ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ ,ＦＩＳ…     

哌嗪二酮衍生物的合成研究进展

哌嗪二酮衍生物 (ｄｉｋｅｔｏｐｉｐｅｒａｚｉｎｅｓ,ＤＫＰ)是结构最小的环二肽 ,最初在肽合成中尤其在固相肽合成中被视为副反应产物[1～ 4 ] 。生成的ＤＫＰ从固相载体上断裂 ,使肽合成无法继续。这不仅使反应收率下降 ,而且在载体上生成新的反应位点 ,从而引起其他的副反应。另一方面 ,ＤＫＰ骨架是稳定的六元环 ,有两个氢键给体和两个氢键受体。氢键是药物与受体相互作用的主要方式之一 ,因而ＤＫＰ在药物化学中是一个重要的药效团。现已发现许多有活性的天然产物中含有ＤＫＰ结构 ,如抑制哺乳动物细胞生长周期的化合物 1 ,2 [5～ 7] ,抑制谷胱甘肽 Ｓ 转移酶的3 [8] ,抑制血小板活化因子 (ＰＡＦ)的 4[9] (图 1 )。此外 ,ＣＣＫ Ｂ受体激动剂[1 0 ] ,局部异构酶抑制剂[1 1 ] 和具有细胞毒性的ｐｉｓｃａｒｉｎｉｅ[1 2 ] 和ｐｈｅｎｙｌａｈｉｓｔｉｎ (Ｉ) [1 3] 等分子中也含ＤＫＰ结构。Ｆｉｇｕｒｅ 1　Ｎａｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｄｉｋｅｔｏｐｉｐｅｒａｚｉｎｅ　　ＤＫＰ有两种类型 ,即 2 ,5 ｄｉｋｅｔｏｐｉｐ...     

胚胎正常发育中的细胞凋亡及其意义（一）

死亡是生命的自然规律。这适用于整个机体 ,也适用于单个细胞。细胞死亡是生命现象中不可逆转的终止 ,是一个普遍的现象。既发生于正常的胚胎发育中 ,也发生于成体组织。根据细胞死亡的形态学、生物化学和生理学特征的不同 ,可将细胞死亡分为两大类 :细胞坏死 (ｎｅｃｒｏｓｉｓ)和细胞凋亡 (ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)或程序性细胞死亡 (ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈＰＣＤ) [1 ] 。尽管对ＰＣＤ是否与细胞凋亡等同仍有不同的看法 ,但由于大多数ＰＣＤ呈现细胞凋亡的形态特征 ,而且在致畸物诱发胚胎异常发育中通常表现为细胞凋亡的形…     

龙牙楤木根皮中新皂苷的结构鉴定

从龙牙木Ａｒａｌｉａｅｌａｔａ(Ｍｉｑ )Ｓｅｅｍ 根皮中最近又分离得到一个新的三萜皂苷 ,通过理化和谱学分析 (ＭＳ、ＮＭＲ) ,确定其结构为 3 Ｏ {[β Ｄ ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ(1→ 2 ) ] [β Ｄ ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ(1→ 3) β Ｄ ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ (1→ 3) ] β Ｄ ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌ]}ｅｃｈｉｎｏｃｙｓｔｉｃａｃｉｄ[1～3] 。命名为辽东木皂苷ⅩⅤ(ｃｏｎｇｍｕｎｏｓｉｄｅⅩⅤ )。结构见图 1。本皂苷为白色无定形粉末 ,Ｌｉｅｂｅｒｍａｎｎ Ｂｕｒ ｃｈａｒｄ反应和Ｍｏｌｉｓ…     

树突状细胞的抗原提呈及免疫机制

免疫系统在维持机体的自身稳定过程中起着重要的作用,抗原提呈细胞(ＡＰＣ)是启动机体免疫应答的重要细胞,能否进行有效的抗原提呈,直接关系到免疫激活或免疫耐受的诱导。ＡＰＣ包括树突状细胞(Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓ.ＤＣ)、巨噬细胞、Ｂ细胞等,其中ＤＣ是目前所知功能最强的专职ＡＰＣ。ＤＣ的抗原提呈的效率高,并能激活初始型Ｔ细胞(ｎａｉｖｅＴｃｅｌｌｓ)增殖[1～2]。因此,认识ＤＣ在抗原提呈过程中激发免疫应答的分子机理,有助于进一步了解机体免疫应答的调控机制以探讨ＤＣ在预防和治疗某些重大疾病中的意义。1　ＤＣ对抗原…     

木瓜与其伪品小木瓜的鉴别

木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Ｃｈａｅｎｏｍｅｌｅｓｓｐｅ ｃｉｏｓａ (Ｓｗｅｅｔ)Ｎａｋａｉ的干燥近成熟果实。小木瓜为其同科属植物Ｄｏｃｙｎｉａｄｅｌａｖａｙｉ (Ｆｒａｎｃｈ .)Ｓｃｈｎｅｉｄ .和印度Ｄ .ｉｎｄｉｃａＤｅｃｎｅ .等的果实。近来笔者在检验中发现 :市场上有用小木瓜充当木瓜出售和使用。据文献[1] 记载 :小木瓜系伪品 ,不得入药。由于二者的饮片除大小略有差别外 ,其它极为相似。中国药典 2 0 0 0年版有 2个鉴别反应[2 ] :一是Ｌｉｅｂｒｍａｎｎ -Ｂｕｒｃｈａｒｄ反应 ,用于鉴别皂苷。另一个是三氯…     

3,6-二取代-5,6-二氢-1,2,4-均三唑并［3,4-b］-1,3,4-噻二唑的合成及抗菌活性

1 ,2 ,4 三唑类杂环化合物有广泛的生物活性 ,如抗菌、抗痉挛、消炎、抗血小板凝聚及调节植物生长等[1- 3 ] 。噻二唑类杂环衍生物也有广泛的生物活性 ,如消炎、驱虫、除草、调节植物生长、防止水稻白叶枯病、柑桔溃疡病和蕃茄青枯病等[4 - 6] 。对噻二唑衍生物的合成前文[7] 曾做过报道。在此基础上 ,本文用 3 对硝基苯氧甲基 4 氨基 5 巯基 1,2 ,4 三唑和醛合成了 9个新化合物 (2ａ - 2ｉ) (图 1)。Ｓｃｈｅｍｅ 1　Ｒｏｕｔｅｏｆｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｓ 2ａ - 2ｉＴａｂ 1　Ｐｈｙｓｉｃａｌｃｏｎｓｔａｎｔｓ…     

枸枣汁急性毒性和致突变性实验研究

枸枣汁为木通科植物猫儿屎 (ＤｅｃａｉｓｎｅａｆａｒｇｅｓｓｉｉＦｒａｎｃｈ)的果实所榨取的原汁 ,具有清热解毒作用[1,2 ] ,并富含维生素Ｂ1、Ｂ2、Ｃ和铁等营养素 ,可作饮料和保健食品。根据《食品安全性毒理学评价程序》的要求[3 ] ,采用小鼠急性毒性试验、Ａｍｅｓ试验、小鼠微核试验、小鼠精子畸变试验对其急性毒性和致突变性进行测试 ,为进行食品安全性评价提供毒理学依据 ,以便开发利用该植物资源。1　材料与方法1 1　样品　枸枣汁 (原汁 ) ,由彭州市山珍食品开发公司提供。1 2　试验菌种　鼠伤寒沙门氏菌组氨酸营养缺陷型菌株Ｔ…     

免疫调节剂:二乙基二硫氨基甲酸钠

二乙基二硫氨基甲酸钠 (ｓｏｄｉｕｍｄｉｅｔｈｙｌｄｉｔｈｉｏｃａｒｂａ ｍａｔｅ ,ＤＤＣ ,ＤＤＴＣ ,ＤＴＣ)商品名为依木巯 (Ｉｍｕｔｈｉｏｌ) ,用于治疗Ｗｉｌｓｏｎ’ｓ病 ,镍与镉中毒 ,还具有抗肿瘤、抗细菌、真菌及抗氧化[1] 等特性。Ｒｅｎｏｕｘ于 1 979年首先发现其有免疫增强作用 ,经试验后用于临床。纽约大学ＲｉｃｈａｒｄＦＢｏｒｃｈ于 1 988年申请美国专利 ,1 990年 3月获批准 ,1 991年由ＰａｓｔｅａｒＭｅｒｉｅｕｘ公司在新西兰首次上市 ,作为治疗艾滋病的免疫增强剂[2 ] 。国内对其研究较少 ,本文就该药与免疫有关…     

反相高效液相色谱法测定怀牛膝中羟基促蜕皮甾酮的含量

怀牛膝系苋科植物牛膝 (ＡｃｈｙｒａｎｔｈｅｓｂｉｄｅｎｔａｔａＢｌ.)的干燥根[1] 。研究表明 ,怀牛膝含有皂苷、甾体类、糖类、氨基酸、生物碱类和香豆素类化合物 ,并含有钾盐及多种微量元素。甾体类化合物有蜕皮激素和植物甾醇 ,蜕皮激素包括羟基促蜕皮甾酮(ｅｃｄｙｓｔｅｒｏｎｅ ,ＥＤＳ)和牛膝甾酮。其中ＥＤＳ有促进蛋白质合成、抑制药物引起的血糖升高、改善肝功和降低血浆胆固醇的作用。目前 ,怀牛膝有效成分含量测定多以皂苷元齐墩果酸为指标 ,用薄层比色法、薄层扫描法、超临界流体色谱法等[2～ 4 ] ,而蜕皮激素的含量测定报…     

谷氨酸脱羧酶抑制剂L-苹果酸对小鼠学习记忆的影响

跳台法和Y迷宫法试验表明,小鼠po L-苹果酸600mg·kg^-1连续5d后对记忆的获得、巩固和再现均有明显的改善作用,并能促进空间辨别学习能力;L-苹果酸改善记忆的作用能被NMDA受体拮抗剂氯胺酮所拮抗。脑内游离氨基酸测定显示,L-苹果酸可明显降低小鼠脑内GABA水平,提高Glu/GABA比值。实验结果表明,脑内GABA水平下降,Glu/GABA比值升高对学习记忆有正性调节作用。     

刺五加愈伤组织的诱导及愈伤组织状态调控

目的获得适宜悬浮培养的刺五加愈伤组织。方法利用植物组织和细胞培养技术,考察3种诱导培养基及9种继代培养基对刺五加愈伤组织的诱导及愈伤组织状态的影响。结果以α-萘乙酸(α-Naphthaleneacetic acid)2.0 mg.L-1+6-苄氨基嘌呤[N-(phenylmethyl)-1H-purin-6-amine,6-BA]2.0 mg.L-1诱导出的愈伤组织适于悬浮培养,叶和叶柄的诱导率分别为93.3%和100%;筛选出最佳固体继代培养的外源激素配比为NAA1.0 mg.L-1+6-BA1.0 mg.L-1,在此激素配比下,愈伤组织生长代谢迅速,性状稳定,呈易分散的颗粒状,易于分散,适合下一步的悬浮培养。结论以刺五加嫩叶为外植体,NAA2.0 mg.L-1+6-BA2.0 mg.L-1为诱导培养基,NAA1.0 mg.L-1+6-BA1.0 mg.L-1为继代培养基可以获得适宜悬浮培养的愈伤组织。     

7-(3-氨基-4-烷氧亚胺基-1-哌啶基)喹诺酮类化合物的合成与抗菌作用

为寻找新的更加优秀的喹诺酮类抗菌药，设计合成了21个7-(3-氨基-4-烷氧亚胺基-1-哌啶基)喹诺酮类化合物，并测定其体内外抗菌活性。化合物结构经¹H NMR和HRMS得到确证，并用单晶X-衍射分析确定其双键构型。化合物14a和14m表现出优秀的广谱抗菌活性，它们对所实验的12株革兰氏阳性菌的活性，总体上明显优于3个对照药，特别是对包括MRSA和MRSE在内的金葡菌和表葡菌的活性是吉米沙星和巴罗沙星的4～16倍、左氧氟沙星的8～64倍。它们对金葡菌的MIC值分别是0.25～1 mg·L^-1和0.125～1 mg·L^-1，对表葡菌的MIC值分别是0.5～4 mg·L^-1和1～8 mg·L^-1，对小鼠系统感染的体内保护作用与吉米沙星、莫西沙星基本相当(P>0.05)。     

关附甲素对实验性心律失常和心肌收缩性的影响

关附甲素(GFA)浓度为20～3oμg·ml^-1时,可以降低无K⁺高Ca²⁺液灌流离体大鼠心脏诱发VT和VF的发生率。清醒大鼠ivGFA2.5～10mg·kg^-1,可依剂量性显著增加北草乌头碱引起室性早搏的用量。清醒犬ivGFA10mg·kg^-1,可逆转哇巴因引起VT,并对麻醉犬(10～20mg·kg^-1),由ACh诱发房颤有明显的抑制作用。GFA10mg·kg^-1iv可明显减慢麻醉犬或清醒犬心率,对心肌收缩性(V_max和V_pm)只有轻度而短暂的抑制,但对左室收缩压,心搏量和心输出量无明显影响。     

四肽FMRFa对大鼠心室肌Na+/Ca2+交换的抑制

目的　研究四肽FMRFa对大鼠单个心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换的作用。方法　用膜片钳全细胞记录法测定成年大鼠心室肌细胞Na⁺/Ca²⁺交换电流(I_Na⁺/Ca²⁺)和其他离子通道电流。结果　FMRFa对大鼠心室肌细胞I_Na⁺/Ca²⁺呈浓度依赖性抑制,100μmol·L^-1浓度时抑制内向和外向I_Na⁺/Ca²⁺密度分别达60.1%和56.5%,对内向电流及外向电流的IC₅₀分别为20μmol·L^-1和34μmol·L^-1。FMRFa5μmol·L^-1抑制I_Na⁺/Ca²⁺内向和外向电流密度分别为38.7%和34.9%,但FMRFa5μmol·L^-1及20μmol·L^-1对L型钙电流、钠电流、瞬时外向电流和内向整流钾电流均无显著抑制作用。结论　FMRFa对大鼠心室肌细胞是一个特异性Na⁺/Ca²⁺交换抑制剂。     

氟伏沙明和CYP1A2*1F基因多态性对血清奥氮平浓度的影响

目的研究氟伏沙明与细胞色素P450酶1A2(cytochromeP4501A2,CYP1A2)基因*1F位点多态性对精神分裂症患者血清奥氮平浓度的影响。方法入组精神分裂症患者单用奥氮平者(奥氮平组)92例以及奥氮平联用氟伏沙明者(联合组)103例,采集血液,测定CYP1A2*1F基因型以及血清奥氮平浓度,比较2组以及CYP1A2*1F各个基因型间的血清奥氮平浓度差异。结果奥氮平组血清奥氮平浓度(3.39±2.70)mg·L-1·mg-1显著低于联合组(5.14±3.06)mg·L-1·mg-1(t=4.23,P=0.000)。AA型血清奥氮平浓度比CC型低[奥氮平组:(2.46±1.64)mg·L-1·mg-1 vs(4.42±2.88)mg·L-1·mg-1,P<0.05;联合组:(4.06±2.65)mg·L-1·mg-1 vs(6.86±3.25)mg·L-1·mg-1,P<0.01],但是CA型与CC型的差异无统计学显著意义。结论氟伏沙明可升高血清奥氮平浓度;不同基因型个体,血清奥氮平浓度不同;应根据氟伏沙明使用情况和CYP1A2*1F基因型个体化给药。     

4-氨基吡啶诱发组胺释放及某些药物的拮抗作用

4-氨基吡啶(4-AP)有组胺释放作用。小鼠ip4-AP5mg·kg^-1后,肺中组胺含量明显减低,血中组胺含量显著增高。钙拮抗剂硝苯啶、TMB-8及钾通道开放剂米诺地尔均能明显抑制4-AP诱发的小鼠PMC释放组胺。结果提示,MC可能存在钾通道,4-AP诱发MC释放组胺可能与它阻滞钾通道,从而使钙通道开放,增加Ca²⁺内流有关。     

一氧化氮对一叶萩碱诱导的突触传递长时程增强的作用

目的研究一叶萩碱对麻醉大鼠突触可塑性形成中一氧化氮(nitric oxide,NO)的作用。方法以在体记录突触传递长时程增强(long-term potentiation,LTP)的电生理学方法,记录大鼠海马齿状回颗粒细胞层群峰电位(population spike,PS);以硝酸还原酶法测定NO含量。结果在侧脑室给予0.2 nmol·L^-1一叶萩碱(securinine,5 μL)前给予1 μmol·L^-1 7-硝基吲唑可抑制LTP的诱导。给药前ip L-精氨酸250 mg·kg^-1可逆转这种抑制作用。取脑进行NO含量测定,与一叶萩碱对照组相比,7-硝基吲唑+一叶萩碱给药组的NO含量明显下降。结论选择性一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂7-硝基吲唑抑制一叶萩碱对LTP的诱导;由nNOS催化产生的NO参与了一叶萩碱诱导LTP的过程。     

钾通道开放剂拮抗4-氨基吡啶诱发大鼠肥大细胞释放组胺

4-氨基吡啶(4-AP)能诱发大鼠腹腔肥大细胞(PMC)释放组胺,且呈浓度依赖关系。钾通道开放剂二氮嗪(Dia),米诺地尔(Min)及钙拮抗剂硝苯啶(Nif)均能明显抑制4-AP诱发大鼠PMC释放组胺。实验结果提示,大鼠肥大细胞膜上可能存在钾通道,4-AP可能通过阻滞钾通道,使钙通道开放,Ca²⁺内流增加而促进组胺释放,钾通道开放剂可能是一类新的组胺释放拮抗剂。     

粉防己碱对体外培养大鼠脑皮层神经元损伤的保护作用

兴奋性氨基酸类神经毒剂与粉防己碱(Tet)共同作用于原代培养胎鼠大脑皮层神经元24h,发现10^-7,10^-6mol·L^-1Tet明显降低谷氨酸(Glu),β-N-oxalylamino-L-alanine(BOAA)和β-N-methylamino-L-alanine(BMAA)导致的培养液乳酸脱氢酶(LDH)活性增高,细胞形态损害减轻,细胞数量增加。对NMDA介导的神经元损伤改变无影响。提示Tet对某些Glu类神经毒剂引起的胎鼠大脑皮层神经元损伤有一定保护作用,其机制可能是抑制细胞膜Na⁺通道开放,阻止膜去极化而影响电压依赖性Ca²⁺通道启动。对NMDA受体可能亦有一定作用。