热休克蛋白70、NF-κB和Bcl-2的表达与人乳头瘤病毒感染的关系

目的:探讨热休克蛋白70(HSP70)、核转录因子NF-κB和癌基因Bcl-2分别在宫颈癌组织和尖锐湿疣组织中的表达,以及与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系.方法:采用免疫组织化学SP法对46例宫颈癌组织、24例尖锐湿疣组织和26例正常宫颈组织进行HSP70、NF-κB和Bcl-2基因蛋白检测;用PCR技术对各组织标本的HPV-DNA进行了检测.结果:HSP70、NF-κB、Bcl-2基因蛋白在宫颈癌组织和尖锐湿疣组织中的表达率显著高于正常对照组(P＜0.05);宫颈癌组HPV和HPV16/18的检出率显著高于正常对照组,尖锐湿疣组HPV和HPV6/11的检出率显著高于正常对照组(P＜0.05);HSP70、NF-κB、Bcl-2基因蛋白在HPV阳性组中的表达率显著高于阴性组(P＜0.05),但它们的表达率在高危型和低危型的HPV感染组间差异无显著性(P＞0.05).结论:HSP70、NF-κB、Bcl-2的表达与宫颈癌、尖锐湿疣的发病及HPV的感染有密切关系,但与HPV的高、低危型无显著关系.     

HSP70、P53、Bcl-2在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头瘤病毒感染的关系

多种肿瘤组织中大量地表达,并可通过与癌基因、抑癌基因及其产物相互作用,调节细胞增殖[1].已报道恶性组织凋亡基因表达异常[2],但宫颈癌组织中HSP70表达及细胞凋亡基因P53、Bcl-2与HPV感染的关系尚未见报道.本研究应用免疫组织化学SP和PCR技术检测宫颈癌组织中HSP70、P53、Bcl-2表达和HPV的感染,以探讨HSP70、P53、Bcl-2蛋白的表达与宫颈癌的发病及与HPV感染的关系.     

P53、Fas、Bcl-2基因在尖锐湿疣和宫颈癌组织中的表达

目的:探讨P53、Fas、Bcl-2基因蛋白表达与尖锐湿疣和宫颈癌发病的关系.方法:采用标准免疫组化技术,分别检测24例尖锐湿疣、46例宫颈癌、22例宫颈糜烂和28例正常宫颈组织P53、Fas和Bcl-2基因产物.结果:三种基因蛋白在尖锐湿疣组和宫颈癌组的表达程度和表达率均显著高于宫颈糜烂组和正常对照组(P＜0.001).尖锐湿疣组和宫颈癌组之间在P53的表达程度上差异有显著性(P＜0.05).结论:P53、Fas、Bcl-2基因表达与尖锐湿疣和宫颈癌的发病均有密切关系.     

结肠癌脾虚证p53, Bcl-2和Bax的表达

目的: 探讨结肠癌脾虚证与p53, Bcl-2, Bax蛋白表达的相关性,揭示病与证之间的内在联系及证的物质基础.方法: 选择进展期低分化结肠腺癌61例,辨证分为脾虚组与非脾虚组,对其主要症状进行半定量积分,并设正常对照组20例.采用免疫组化S-P法检测病理组织中p53, Bcl-2, Bax蛋的表达.结果: 脾虚组患者p53, Bcl-2蛋白的阳性表达率及表达水平显著高于非脾虚组(P<0.05),Bax蛋白阳性表达脾虚组低于非脾虚组,但组间比较差异无显著性(P>0.05),脾虚患者症状积分与p53, Bcl-2蛋白表达水平呈正相关(P<0.01),与Bax蛋白表达水平无相关性(P>0.05);非脾虚患者症状积分与p53, Bcl-2, Bax蛋白表达水平均无显著相关性(P>0.05).结论: 结肠癌中医证型与p53, Bcl-2蛋白的差异表达有关,p53, Bcl-2蛋白是结肠癌脾虚证的相关基因.     

HSP70与TNF-α在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理分期关系的研究

目的:探讨热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)在甲状腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系?方法:采用RT-PCR以及Western blot技术检测对比40 例甲状腺癌组织?20例甲状腺良性病变组织以及15例正常甲状腺组织中HSP70?TNF-α的表达情况,并分析HSP70表达水平与甲状腺癌临床病理学特征的关系?结果:3组人群组织中HSP70 mRNA水平比较差异有统计学意义(P < 0.001),甲状腺癌组织中HSP70 mRNA水平显著高于正常甲状腺组织以及甲状腺良性病变组织(P均< 0.05);HSP70 mRNA的表达水平与甲状腺癌组织病理分级显著相关(rs = 0.810,P < 0.05);甲状腺癌组织中HSP70 蛋白水平显著高于正常甲状腺组织(P < 0.05);3组人群组织中TNF-α mRNA水平比较差异有统计学意义(P < 0.05),甲状腺癌组织中TNF-α mRNA水平显著高于正常甲状腺组织以及甲状腺良性病变组织(P均< 0.05)?结论:HSP70?TNF-α在甲状腺癌组织中的表达升高,且HSP70与甲状腺癌组织病理分级明显相关,提示HSP70在甲状腺癌发生发展中发挥重要的作用?     

p53和Bcl-2在食管鳞癌组织中的表达及与放化疗疗效的关系

目的探讨p53、Bcl-2蛋白表达与食管鳞癌的发生发展及放化疗疗效的关系。方法用免疫组织化学法测定50例食管鳞癌患者放化疗前活检组织中p53与Bcl-2蛋白表达,观察指标表达阳性率以及与临床病理特征的关系及与放化疗疗效的相关性。结果p53、Bcl-2蛋白在食管鳞癌组织表达阳性率(42%和68%)与正常组织表达阳性率(12%和10%)之间差异有统计学意义(P<0.05);Bcl-2蛋白表达与食管鳞癌的分化程度相关(P<0.05),p53蛋白表达与淋巴结转移相关(P<0.05);p53蛋白阴性表达组放化疗疗效优于阳性表达组(P<0.05),Bcl-2蛋白表达与食管鳞癌的疗效无关(P>0.05)。结论p53、Bcl-2蛋白表达与食管鳞癌的发生发展有关,p53蛋白检测可作为食管鳞癌患者放化疗敏感性的判断指标。     

Livin和bcl-2 p53基因在宫颈癌组织中表达相关性的初步研究

目的:探讨新的凋亡抑制基因livin在宫颈癌组织中的表达,及其与bc1-2和p53表达的相关性.方法:应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法),检测livin、bcl-2、p53基因在lO例正常宫颈组织及57例宫颈癌组织中的表达.结果:Livin基因在正常宫颈组织中不表达,57例宫颈癌组织中,40例表达阳性,占70.1%.Livin基因表达阳性率与宫颈癌的病理分级和临床分期有关.宫颈癌组织中p53蛋白表达阳性、阴性者中,livin基因表达阳性率分别为76.7%(33/43)、21.4%(3/14),两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);bcl-2蛋白表达阳性、阴性者中,livin基因表达阳性率分别为87.8%(36/41)、25%(4/16),两者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:Livin基因的异常表达而引起的细胞凋亡抑制,在宫颈癌的发生中起一定作用,其表达与宫颈癌组织中p53、bc1-2蛋白的异常表达密切相关.     

C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白在结直肠癌中的表达及意义

目的:研究C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白在结直肠癌组织中的表达及意义.方法:应用组织芯片技术制作正常结直肠、腺瘤组织标本各16例及结直肠癌80例石蜡标本,采用免疫组织化学SP法检测C-erb B-2,nm23,bcl-2和p53基因蛋白的表达,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)检测结直肠癌细胞的凋亡指数.结果:C-erb B-2的标记率(%)在结直肠癌组织(45.62±4.27)明显高于正常结直肠组织(15.53±1.43)及腺瘤组织(22.47±2.19)(P＜0.01),后两者无显著性差异(P＞0.05);结直肠癌C-erb B-2标记率与分化程度(rs=0.525,P=0.000)、Dukes分级(rs=0.473,P=0.000)及淋巴结转移(rs=0.540,P=0.000)呈正相关.结直肠癌C-erb B-2表达与转移抑制蛋白nm23表达(rs=-0.403,P=0.000)和靶蛋白p53表达(rs=-0.357,P=0.000)呈负相关;结直肠癌C-erb B-2表达与凋亡抑制蛋白bcl-2表达呈正相关(rs=0.628,P=0.000);结直肠癌C-erb B-2表达程度不同的结直肠癌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)间存在显著性差异(F=57.81,P＜0.01).结论:结直肠腺癌中原癌基因C-erb B-2和bcl-2蛋白的过表达,抑癌基因nm23和bcl-2的表达缺失共同参与了肿瘤的发生,发展,浸润,转移,联合检测上述标志物有一定的临床意义.     

Bcl-2和p53基因蛋白在原发性肝癌诊断中的应用价值

目的 研究Bcl-2和p53基因蛋白在原发性肝癌诊断中的应用价值.方法 用免疫组化的方法分别检测炎症组、非典型增生组、癌变组的肝组织Bcl-2和p53蛋白的阳性表达情况.结果 p53蛋白在非典型增生组开始表达(58.3%),与癌变组的阳性表达率(69.7%)无显著差异(P＞0.05);Bcl-2蛋白在炎症组低表达(12.5%),在癌变组高表达(57.6%),两组间有显著性差异(P＜0.05);并且两种蛋白的阳性程度随病变的恶性程度逐渐增加.结论 Bcl-2和p53基因在原发性肝癌诊断中有较高的应用价值.     

宫颈癌组织中HPV和p53基因表达的检测

①目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）感染和p53基因异常在宫颈癌发生发展中的作用。②方法 用PCR技术检测12例宫颈原位癌、45例宫颈癌和20例正常宫颈组织中HPVl6／18DNA，RT-PCR检测HPV16／18阳性标本E6基因mRNA表达，聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术检测p53基因外显子5～8的突变，同时采用免疫组化技术检测P53蛋白的表达。③结果 宫颈原位癌、宫颈癌HPV16／18阳性率均为66．67％，明显高于正常宫颈组织（20．00％），差异有显著性（χ^2=5．12、12．09，P〈0．05、0．01）。宫颈癌组织中HPV16／18 E6基因mRNA阳性表达率明显高于正常宫颈组织，差异有显著性（P=0．039）。宫颈原位癌和正常宫颈组织间、宫颈原位癌和宫颈癌间HPV16／18 E6 mRNA阳性表达率差异均无显著性（P=0．141、0．272）。45例宫颈癌标本中测得exon5和exon7突变各1例，均发生在HPV阴性宫颈癌组织，未检测到exon6和exon8的突变。宫颈原位癌和正常宫颈组织中均未检测到p53基因突变。正常宫颈组织中未检测到P53蛋白表达，宫颈原位癌和宫颈癌组织中P53蛋白阳性表达率分别为25．00％和42．22％，明显高于正常宫颈组织（χ^2=10．81，P（0．01）。P53蛋白的表达与HPV16／18感染无明显相关性（P〉O．05）。④结论 HPV感染和p53基因异常与官颈癌的发生密切相关，官颈癌组织中p53基因的突变率较低，推测P53蛋白的异常累积可能并非p53基因突变所致。     

人乳头瘤病毒16/18、Bcl-2和Survivin在宫颈癌组织中的表达

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)16/18、Bcl-2、Survivin在宫颈癌组织中的表达及意义。方法收集2010年4月至2012年7月湖北省肿瘤医院保存的宫颈癌组织标本80例、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织标本70例及正常宫颈组织标本32例,采用原位杂交法检测3种组织中HPV16/18和Survivin的表达,采用免疫组织化学方法检测Bcl-2表达,并分析其表达情况与宫颈癌临床病理特征的关系。结果 Survivin mRNA在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为6.25%、45.71%和77.50%,Bcl-2蛋白在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为3.13%、40.00%和71.25%,HPV16/18 DNA在宫颈正常组织、CIN及宫颈癌组织中的阳性表达率分别为3.13%、51.43%和83.75%,3种组织中Survivin mRNA、Bcl-2蛋白、HPV16/18 DNA阳性表达率比较差异均有统计学意义(P<0.01)。Survivin mRNA、Bcl-2蛋白及HPV16/18 DNA在CIN组织中的表达与CIN分级有相关性,Survivin mRNA、Bcl-2蛋白及HPV16/18 DNA在CINⅢ级中的阳性表达率显著高于CINⅠ、Ⅱ级(P<0.01)。Bcl-2蛋白的表达与宫颈癌组织分化程度及淋巴结转移有相关性(P<0.01),但与宫颈癌组织类型、临床分期及肿瘤生长类型无显著相关性(P>0.05)。Survivin mRNA、HPV16/18 DNA表达与宫颈癌的组织分化程度、临床分期及淋巴结转移有相关性(P<0.01,P<0.05),但与宫颈癌的组织类型及肿瘤生长类型无相关性(P>0.05)。结论 HPV16/18、Bcl-2和Survivin的高表达可能与宫颈癌的发生发展有关,HPV16/18、Bcl-2和Survivin的检测有助于宫颈癌的早期诊断、手术疗效评价及预后判断。     

NMP238,HSP70在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的探讨NMP238和HSP70在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法收集60例病理确诊的宫颈鳞癌标本为试验组,取同时期因子宫肌瘤手术切除的正常宫颈组织30例作为对照。应用免疫组化S-P法检测癌组织及对照组中NMP238,HSP70的表达。统计分析方法采用χ2检验和pearson相关分析。结果NMP238,HSP70在宫颈鳞癌组的阳性表达率分别为85%,71.7%;正常组织分别为43.3%和33.3%。两者在鳞癌组与对照组中的表达差异有显著性(P<0.05);宫颈鳞癌组织中NMP238和HSP70的阳性表达在不同病理分级、临床分期中差异均无显著性(P>0.05),在鳞癌组中,NMP238,HSP70的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论宫颈鳞癌中存在NMP238,HSP70的异常表达,表明宫颈鳞状细胞癌的发生发展与NMP238,HSP70的异常表达有关。且两者在宫颈鳞癌组织中表达呈显著正相关(P<0.05),提示二者对宫颈鳞癌的发生、发展可能有协同作用。     

增殖细胞核抗原和p53在肺癌组织中的表达及临床意义

目的 研究增殖细胞核抗原（PCNA）和p53在肺癌组织中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学SABC法检测肺癌患者肿瘤组织中PCNA和p53的表达，并探讨其与肿瘤发生及恶性行为之间的关系。结果 肺癌组织中p53蛋白阳性表达率为70％，较正常组有显著性差异（P＜0．01），p53蛋白阳性表达率在淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者（P＜0．01），在不同组织学分级和病理分期的肺癌组织间p53的表达无差异性。肺癌组织PCNA标记指数随组织学分级和病理分期的增高而增高（P＜0．01），有淋巴结转移者较无淋巴结转移者显著增高（P＜0．01），p53阳性表达者PCNA标记指数显著高于p53表达阴性者（P＜0．01）。结论 p53蛋白表达与肺癌的发生和淋巴结转移密切相关；PCNA与肺癌的生长及恶性行为有关。     

热休克蛋白27、60、70在直肠癌中的表达及意义

目的：探讨热休克蛋白27（HSP27）、60、70及其mRNA在直肠癌、癌旁组织、直肠炎和正常直肠粘膜组织中的表达情况,及与临床、病理资料之间的关系。方法：采用免疫组织化学方法、组织芯片技术检测病理诊断明确的54例直肠癌组织标本及对应的距直肠癌组织边缘1．0cm处的癌旁组织、直肠炎组织及距直肠癌组织边缘5cm以上的正常组织中HSP27、60、70的表达差异,RT—PCR法对12例患者的直肠癌组织及对应的癌旁组织、直肠炎组织和正常组织的HSP27、60、70mRNA的表达情况进行检测,结合临床、病理资料进行统计分析。结果：HSP27、60、70的表达：在54例直肠癌组织中的阳性表达率为75．9％、74．1％、77．8％,明显高于癌旁组织、直肠炎组织和正常组织（P〈0．01）;在mRNA水平,直肠癌组织的HSP27、60、70表达也明显高于其余3组（P〈0．01）。HSP27、60、70的表达与病人性别、年龄、浸润直肠壁深度和肿瘤组织类型无明显相关性（P〉0．05）;与远处转移、肿瘤分化程度和临床病理分期具有相关性（P〈0．05）。结论：直肠癌中HSP27、60、70的表达水平明显高于癌旁组织、直肠炎组织和正常组织,提示与直肠癌发生、发展密切相关;而且与病人性别、年龄、浸润直肠壁深度和肿瘤组织娄型无明显相关性;与远处转夥、肿瘤分化程度和临床病理分期具有相关性;HSP27、60、70之间具有关联性．     

Ki67、p53、Survivin在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎中的表达及临床意义

目的探讨Ki67、p53、Survivin在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测28例宫颈癌、32例宫颈上皮内瘤变及34例宫颈炎、30例健康体检者宫颈黏膜组织中Ki67、p53、Survivin的阳性表达情况,并分析Ki67、p53、Survivin三者在宫颈癌组织中表达的相关性。结果Ki67、p53、Survivin在正常宫颈黏膜组织中均无阳性表达,但在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变及宫颈炎黏膜组织中均有阳性表达;Ki67、p53、Sunrivin在宫颈癌中的阳性表达显著高于慢性宫颈炎组（P〈0．01）,在CIN组织中阳性表达显著高于慢性宫颈炎组（P〈0．01）;Ki67与p53、Survivin在宫颈癌组织中的表达呈正相关（r=0．69、0．72,P〈0．05）。结论Ki67、p53、Survivin均参与宫颈癌的发生和发展过程,三者联合检测具有重要的临床应用价值。     

热休克蛋白70和热休克蛋白27在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白70(HSP70)和热休克蛋白27(HSP27)在宫颈鳞癌中的表达及其相关性。方法应用免疫组织化学方法检测HSP70、HSP27在60例宫颈鳞癌,18例宫颈上皮内瘤变(C IN),7例正常宫颈组织中的表达。结果宫颈鳞癌组织中HSP70,HSP27阳性表达率与正常宫颈组织相比差异有统计学意义(P<0.05);宫颈鳞癌中HSP70的阳性表达与病理分级、临床分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),HSP27的阳性表达与病理分级密切相关(P<0.05);HSP70与HSP27在宫颈鳞癌中的表达无相关关系(P>0.05)。结论HSP70、HSP27均在宫颈鳞癌发生和发展中起重要作用,HSP70可能作为判断宫颈癌预后的重要指标。     

热休克蛋白27与P53在宫颈癌中的表达及临床意义

目的 探讨热休克蛋白27（HSP27）在宫颈鳞癌发生、发展中的表达及其与抑癌基因P53蛋白表达的关系。方法 应用免疫组化SP法观察80例宫颈鳞癌和30例宫颈上皮肉瘤样病变（CIN）组织中HSP27蛋白、P53的表达，并分析其相互关系。结果 HSP27蛋白在宫颈鳞癌、CIN组织、正常宫颈组织的阳性表达率分别为69．5％、84．7％和10．0％，HSP27蛋白的表达与宫颈鳞癌病理分级和临床分期负相关（P〈0．05），并与P53的表达呈正相关。结论 HSP27参与宫颈鳞癌早期的发生发展，并与P53蛋白的表达密切相关。     

胰腺癌组织中HSP60、HSP70和P53的表达及意义

[目的]了解HSP60、HSP70及P53在慢性胰腺炎组织及胰腺癌组织中的表达及其意义。[方法]应用免疫组织化学ABC法检测HSP60、HSP70及P53在慢性胰腺炎12例、癌旁组织及胰腺癌63例（其中高、中、低分化各为14、23、26例）中的表达，结果进行卡方检验及相关性分析。[结果]在慢性胰腺炎、癌旁组织及胰腺癌中，HSP60的过表达率17％、10％、70％（P〈0．01）；HSP70的过表达率25％、13％、75％（P〈0．01）。在高、中、低分化胰腺癌中，HSP60的过表达率43％、70％、85％（P〉0．05〉；HSP70的过表达率36％、78％、92％（P〈0、01）。HSP70的过表达率与是否发生淋巴结转移有显著关系（P〈0．05）；P53在胰腺癌中的表达率59％，与HSP60、HSP70在胰腺癌中的表达呈正相关（P〈0．01）。[结论]胰腺癌是HSP60、HSP70高表达肿瘤，HSP70与胰腺癌临床病理特征和生物学行为有更密切的关系。P53与HSP60、HSP70在肿瘤中的表达密切相关。     

抑制热休克蛋白70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂化疗的敏感性

目的 探讨抑制宫颈癌Hela229细胞内热休克蛋白(HSP)70表达对顺铂(DDP)化疗敏感性的影响.方法 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)及集落克隆法测定各因素对Hela229细胞的抑制作用;溴化丙啶(PI)单染法及DAPI检测细胞的凋亡率;JC-1染色法测定线粒体膜电位(△Ψm)的变化;Western blotting测定相关蛋白的表达;建立裸鼠动物模型测定各因素体内的抑瘤作用.结果 宫颈癌细胞较正常宫颈细胞高表达HSP70;当HSP70抑制剂与顺铂合用,细胞的存活率较单用顺铂显著下降(P<0.01);PI与DAPI染色实验表明HSP70抑制剂能增加顺铂诱导的细胞凋亡率;JC-1染色结果显示,HSP70抑制剂处理后顺铂组细胞线粒体膜电位发生了明显的降低.Western blotting实验结果显示HSP70蛋白表达抑制剂与顺铂合用较单用顺铂显著增加促凋亡蛋Bax/caspase-3表达及caspase-3活化;明显降低抑制凋亡相关蛋白Bcl-2表达.裸鼠移植肿瘤模型结果表明HSP70抑制剂与顺铂合用能增强顺铂对模型小鼠肿瘤的抑制作用(P<0.01).结论 抑制HSP70表达可增强宫颈癌细胞对顺铂的敏感性,机制可能是通过抑制HSP70,进而调节凋亡相关蛋白的表达,促进宫颈癌细胞凋亡.HSP70有望成为宫颈癌基因治疗的一个新靶点.