Ⅰ型与Ⅱ型子宫内膜癌细胞抗氧化能力的比较

 目的 比较Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞对氧化应激的抵抗并探讨其机制。  方法  ① H₂O₂处理Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞,噻唑蓝（MTT）法检测两型细胞的增殖水平;② 120μmol H₂O₂和800μmol H₂O₂分别处理Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平,酶标仪检测细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性 结果 在不进行处理的情况下,Ⅰ型子宫内膜癌细胞较Ⅱ型子宫内膜癌细胞ROS水平及CAT活性较低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GPx活性较高（P＜0.01）。在氧化应激条件下,Ⅰ型子宫内膜癌细胞GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD和CAT活性降低（P＜0.01）;Ⅱ型子宫内膜癌细胞GSH、GSSG水平明显升高,GSH/GSSG比值略有升高,SOD、CAT和GPx活性升高（P＜0.01）。  结论  Ⅱ型子宫内膜癌细胞与Ⅰ型子宫内膜癌细胞相比较,其本身ROS水平较高,细胞内抗氧化系统及抗氧化酶系统对氧化刺激可进行有效应答,细胞不易受到氧化损伤。     

子宫颈鳞癌及腺癌细胞抗氧化能力的比较

目的比较子宫颈鳞癌及腺癌细胞对氧化应激的抵抗并探讨其机制。方法①H2O2处理子宫颈鳞癌(Siha、SW756)及腺癌(Hela、GH329)细胞,噻唑蓝(MTT)法检测两型细胞的增殖水平;②用250、250、650及800μmol/L H2O2分别处理子宫颈鳞癌(Siha、SW756)及腺癌(Hela、GH329)细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶标仪检测细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性。结果在不进行处理的情况下,子宫颈鳞癌(Siha、SW756)细胞较子宫颈腺癌(Hela、GH329)细胞有较低的ROS水平、GSH含量及GSH/GSSG比值,较高的GSSG水平及SOD和GPx活性。在氧化应激条件下,子宫颈鳞癌(Siha、SW756)细胞的GSH水平及GSH/GSSG比值明显下降,SOD、CAT和GPx活性升高;子宫颈腺癌(Hela、GH329)细胞的GSH水平及GSH/GSSG比值略有下降,SOD、CAT和GPx活性升高。结论子宫颈鳞癌及腺癌细胞处于不同的氧化还原状态,子宫颈鳞癌细胞较子宫颈腺癌细胞抗氧化能力弱,这可能与H2O2处理后鳞癌细胞ROS较腺癌细胞增多明显及两型细胞抗氧化系统有不同的应答有关。     

酸枣仁皂苷A对脂多糖诱导星形胶质细胞C6氧化损伤的保护作用

目的 采用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导星形胶质细胞C6的氧化应激模型,以研究酸枣仁皂苷A（Jujuboside A,JuA）的抗氧化活性。方法 体外培养大鼠星形胶质细胞C6。采用MTT法检测各组细胞的存活率,采用Western blot法检测星形胶质细胞标记蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的活化情况,采用Griess还原法测定细胞上清液中一氧化氮（nitric oxide,NO）水平,采用流式细胞术检测各组细胞中活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平,采用ELISA测定各组细胞内丙二醛（malondialdehyde,MDA）和谷胱甘肽（L-glutathione,GSH）水平以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性。结果 0.125～50 μmol/L JuA对C6细胞存活率无明显影响（P＞0.05）;1 μg/mL LPS可以明显升高C6细胞GFAP蛋白表达水平,显著升高细胞上清液中NO和细胞内ROS、MDA水平,降低细胞内GSH水平和SOD活性,差异均有统计学意义（P＜0.05）。与LPS组比较,12.5、25、50 μmol/L JuA可以明显抑制LPS诱导的GFAP表达,降低细胞上清液中NO水平,降低细胞内ROS、MDA水平,升高细胞内GSH水平和SOD活性,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 JuA对LPS诱导的星形胶质细胞氧化损伤具有一定的保护作用。     

吡咯里西啶生物碱Jacoline对人正常肝L-02细胞内谷胱甘肽含量及还原酶活性的影响

目的：探讨吡咯里西啶生物碱Jacoline对人正常肝L-02细胞内谷胱甘肽含量及谷胱甘肽还原酶（Glutathione Reductase，GR）活性的影响。方法：①采用DTNB法检测100μmol／L Jacoline与L-02细胞孵育24、48、72h后以及不同浓度Jacoline与L-02细胞孵育72h后对L-02细胞内谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽（GSH）、氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量及其GSH／GSSG的影响。②采用NADPH法检测100μmol，L Jacoline作用24、48、72h后对L-02细胞内GR活性的影响。结果：①DTNB比色法显示，100μmol，L Jacoline与L-02细胞孵育不同时间，谷胱甘肽和GSH含量随着时间的增加而减少，GSH／GSSG的比例也随时间的延长而减少；不同浓度的Jacoline与L-02细胞作用72h后，谷胱甘肽和GSH含量以及GSH／GSSG随浓度的增加而减少；②100μmol／L Jacoline与L-02孵育不同时间，GR的活性随着时间的增加而升高。结论：Jacoline对L-02细胞内谷胱甘肽和GSH含量、GSH／GSSG以及GR还原酶的活性有明显影响。     

eNOS谷胱甘肽化在缺氧预适应保护人脐静脉内皮细胞缺氧复氧损伤中的作用及机制

目的：研究缺氧预适应（hypoxic preconditioning,HPC）保护人脐静脉内皮细胞（human umbilical veinous endothelial cells,HUVECs）缺氧/复氧损伤的可能机制。方法：将培养的HUVECs分为5组：对照（Control）组、缺氧复氧（hypoxia/reoxygena－tion,HR）组、HPC组、HR+自由基清除组（HR+EUK134组）、HPC组+自由基处理组（HPC+H2O2组）。先将Control组和HR组、HR+EUK134组放在常规孵育箱中,而HPC组和HPC+ H2O2组放入三气低氧箱中进行3个10 min的缺氧/复氧小循环,即缺氧预适应,再将HR组、HR+EUK134组与HPC组、HPC+H2O2组一起放入三气低氧箱中进行1 h大缺氧。1 h后,向HPC+H2O2组加入H2O2（100 mmol/L）、HR+EUK134组加入EUK134（10 mmol/L）,然后将4组同时放入常规孵育箱复氧2 h。复氧后检测细胞存活率,测定细胞内还原型谷胱甘肽（reductive glutathione,GSH）和氧化型谷胱甘肽（oxidative glutathione,GSSG）内皮型一氧化氮合成酶（endothelial nitric oxide synthetase,eNOS）谷胱甘肽化水平、超氧化物阴离子（superoxide anion,O2.）和一氧化氮（nitric oxide,NO）水平以及抗氧化酶过氧化氢酶（catalase,CAT）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的活性。结果：与对照组相比,HR组O2.增加（P=0.004）,抗氧化酶活性降低（P=0.000）,细胞内氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽比例（GSSG/GSH）和eNOS谷胱甘肽化水平（P=0.000）均增加,而NO生成减少（P=0.003）。自由基清除剂EUK134和HPC（P=0.028）均可减少O2.生成,增加SOD（P=0.002）和CAT活性（P=0.003）,降低GSSG/GSH和eNOS谷胱甘肽化水平（P=0.001）,NO生成增加（P=0.042）,高浓度H2O2可消除HPC的作用。结论：HPC可提高细胞存活率,恢复内皮细胞eNOS功能活性,其机制可能是通过减轻氧化应激,降低细胞内GSSG/GSH和eNOS谷胱甘肽化水平,促进NO生成而实现。     

齐墩果酸对oxLDL诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的探讨齐墩果酸对氧化性低密度脂蛋白（oxLDL）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤的保护作用。方法体外培养HUVEC,以维生素E（200μmol/L）或齐墩果酸（5-40μmol/L）预处理细胞24h,再加入200mg/L oxLDL继续培养24h造成细胞损伤。采用MTT法检测各组细胞存活率,同时检测细胞丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、还原型谷胱甘肽（GSH）含量,采用DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧（ROS）含量。结果与正常组比较,200mg/L oxLDL组细胞存活率、SOD活性、GSH含量明显降低,MDA、ROS含量明显增加,差异均有统计学意义（F=67.72-173.25,q=11.46-30.86,P〈0.01）;与200mg/L oxLDL组比较,齐墩果酸在5-20μmol/L浓度范围内,可剂量依赖性提高细胞存活率、减少MDA含量及ROS形成、增加GSH含量及SOD活性（q=4.26-22.35,P〈0.05）。结论齐墩果酸能抑制ox-LDL诱导的HUVEC氧化损伤,其机制可能与维持SOD活性,减少ROS释放、MDA生成及GSH消耗有关。     

基于双重类酶活性钯负载氧化石墨烯纳米酶对脑胶质细胞凋亡的影响

目的：构建钯负载氧化石墨烯（GO@Pd）纳米酶，探究其类酶活性对脑胶质细胞凋亡的影响。方法：通过原位生长法合成GO@Pd纳米酶并进行表征；体外检测GO@Pd的类超氧化物歧化酶（SOD）活性、类过氧化物酶（POD）活性和消耗谷胱甘肽（GSH）的能力；并利用亚甲基蓝检测其羟基自由基（·OH-）的生成；通过细胞增殖试剂盒评价GO@Pd的体外生物安全性；分别将Pd、GO和GO@Pd与人脑星形胶质母细胞瘤（U-118MG）细胞共同孵育,利用DCFH-DA荧光探针检测各组细胞内活性氧（ROS）水平；通过线粒体膜电位染色检测各组细胞内线粒体膜电位变化。结果：经一系列材料表征表明成功制备了大小均一、分散性良好的GO@Pd纳米酶；类酶活性检测结果显示，GO@Pd同时拥有类SOD和类POD双重类酶活性，并且可以催化H2O2生成·OH-和消耗GSH；当GO@Pd浓度在0～100μg/mL之间，C8-D1A细胞活力保持在90%以上；与空白对照组相比，GO@Pd组的U-118MG细胞内ROS水平显著升高（P<0.001），并且其线粒体膜电位染色结果红色/绿色荧光强度比值显著降低（P<0.000 1）...     

金诺芬对卵巢癌细胞活性的影响及其分子机制

目的 探讨金诺芬对卵巢癌细胞活性的影响及其可能的分子机制。方法 细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定金诺芬处理卵巢癌细胞系SKOV3、Caov3和SW626细胞和永生化的正常人胚肾HEK-293T细胞的剂量反应存活率曲线和半抑制剂量(IC₅₀)。流式细胞术测定细胞周期。酶标仪测定细胞内总谷胱甘肽(GSH)、还原型GSH和氧化型谷胱甘肽(GSSG)的水平、硫氧还蛋白还原酶(TrxR)和活性氧自由基(ROS)的水平，并计算还原型GSH/GSSG的比值。Western blot测定细胞内细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、CDK6、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和P53、p-P53、啮齿类双分蛋白2(MDM2)的表达情况。结果 与HEK-293T细胞相比，卵巢癌SKOV3、Caov3和SW626细胞的剂量反应存活率曲线和IC₅₀值显示卵巢癌细胞对金诺芬的敏感性更高(P<0.05)。与未处理组相比，经各自IC₅₀浓度金诺芬处理的SKOV3、Caov3细胞内总GSH、还原型GSH/GSSG的比值和TrxR的活性均降...     

茯苓酸抑制H2O2诱导的脑微血管内皮细胞凋亡及促进细胞存活

【摘要】目的 探讨茯苓酸（PA）对过氧化氢（H2O2）诱导的脑微血管内皮细胞凋亡及增殖的影响。方法 体外培养小鼠脑微血管内皮细胞株bEnd.3,随机分为NC组（正常培养细胞）、H2O2组（H2O2浓度为100 μmol/L）、H2O2+PA 10 μmol/L组（H2O2浓度为100 μmol/L,PA浓度为10 μmol/L）、H2O2+PA 20 μmol/L组（H2O2浓度为100 μmol/L,PA浓度为20 μmol/L）、H2O2+PA 40 μmol/L组（H2O2浓度为100 μmol/L,PA浓度为40 μmol/L）。采用甲基噻唑基四唑（MTT）法检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡率;检测乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH Px）、活性氧（ROS）的水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved caspase 3）的表达量。结果 与NC组比较,H2O2组细胞存活率及CAT、SOD、GSH Px的水平显著降低（P＜005）,LDH、MDA、ROS的水平显著升高（P＜005）,细胞凋亡率与Cleaved caspase 3蛋白水平显著升高（P＜005）;与H2O2组比较,H2O2+PA 10 μmol/L组、H2O2+PA 20 μmol/L组、H2O2+PA 40 μmol/L组细胞存活率及CAT、SOD、GSH Px的水平显著升高（P＜0.05）,LDH、MDA、ROS的水平显著降低（P＜005）,细胞凋亡率与Cleaved caspase 3蛋白水平显著降低（P＜005）。结论 茯苓酸可抑制H2O2诱导的脑微血管内皮细胞凋亡及促进细胞存活。     

不同麻醉方案对颅内动脉瘤介入手术患者氧化应激反应的影响

目的：比较不同麻醉方案对颅内动脉瘤介入手术患者氧化应激反应的影响。方法行介入手术的120例患者，分为异丙酚组（60例）和七氟烷组（60例）。记录心率和平均动脉压，检测麻醉前（T0）、术后6h（T1）、24h（T2）、48h（T3）、72h（T4）的过氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH‐Px）与术后3个月格拉斯哥预后评分（GOS）。结果（1）两组患者在T2和T3的SOD、CAT、GSH‐Px活性显著低于术前（P＜0．05）。（2）异丙酚组SOD在T1～T4显著高于七氟烷组（P＜0．05），CAT在T1、T2上高于七氟烷组（P＜0．05），GSH‐Px活性在T1～T3显著高于七氟烷组（P＜0．05）。（3）两组的预后差异无统计学意义（P＞0．05）。结论与七氟烷相比，异丙酚麻醉能更好地对抗颅内动脉瘤介入手术患者的氧化应激反应。     

谷胱甘肽过氧化物酶4在雷公藤内酯酮激活结肠癌细胞铁死亡中的作用

目的探讨谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）在雷公藤内酯酮（TN）激活结肠癌细胞铁死亡中的作用。方法将体外培养结肠癌细胞株HCT116分为5组,即对照组、TN组、铁死亡抑制剂Feroptosis-1（Fer-1）组、阴性载体组、GPX4过表达组。对照组细胞不作任何处理,其余4组细胞均加入15.0nmol/L的TN处理48h,其中Fer-1组用2滋mol/LFer-1预处理2h,阴性载体组、GPX4过表达组细胞分别用阴性慢病毒载体和GPX4过表达载体转染48h。比较5组HCT116死亡细胞比例,细胞内谷胱甘肽（GSH）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）含量以及GPX4蛋白表达水平。结果5组HCT116死亡细胞比例,细胞内GSH、ROS、MDA含量以及GPX4蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。与对照组比较,TN组死亡细胞比例及细胞内ROS、MDA含量均明显增加（均P＜0.05）,GSH含量及GPX4蛋白表达水平均明显减少（均P＜0.05）;与TN组比较,Fer-1组死亡细胞比例及细胞内ROS、MDA含量均明显减少（均P＜0.05）,GSH含量及GPX4蛋白表达水平均明显增加（均P＜0.05）;与阴性载体组比较,GPX4过表达组死亡细胞比例及细胞内ROS、MDA含量均明显减少（均P＜0.05）,GSH含量及GPX4蛋白表达水平均明显增加（均P＜0.05）。结论TN通过抑制GPX4激活结肠癌细胞铁死亡,从而抑制癌细胞增殖。     

佛甲草对S180荷瘤小鼠氧化应激和肿瘤免疫的影响

目的：探讨佛甲草（SLT）提取物对S180荷瘤小鼠的抗肿瘤生长、外周血白细胞分类、血清超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH‐Px）的活性及丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）水平的影响。方法采用小鼠右前肢腋部皮下接种S180细胞建立移植瘤模型,观察SLT提取物4、8g／kg体质量连续给药14d。观察小鼠体质量变化,计算肿瘤、胸腺及脾脏指数,检测小鼠外周血中白细胞分类,测定小鼠血清SOD、GSH‐Px的活性及MDA、NO的水平。结果经SLT治疗后,S180荷瘤小鼠体质量明显高于环磷酰胺（CTX）组,肿瘤指数明显低于模型组和CTX组,差异均有统计学意义（P＜0．05）,且能有效的调节荷瘤小鼠的胸腺指数及脾脏指数;外周血中性粒细胞数／白细胞总数（GR％）和单核细胞／白细胞总数（MO％）明显低于模型组,差异均有统计学意义（P＜0．05）,而淋巴细胞／白细胞总数（LY％）明显高于模型组（P＜0．05）,血清SOD、GSH‐Px活性明显高于模型组（P＜0．05）,血清MDA水平明显低于模型组和CTX组（P＜0．05）,血清中NO水平明显高于模型组和CTX组（P＜0．05）。结论     

还原型谷胱甘肽对微囊藻毒素-LR染毒小鼠肝脏抗氧化功能的影响

目的：探讨抗氧化剂还原型谷胱甘肽（GSH）对微囊藻毒素‐LR（MC‐LR）染毒小鼠肝脏抗氧化功能的影响。方法选择健康清洁级5周龄昆明种小鼠40只,通过随机抽样的方法分为5组,生理盐水对照组、GSH对照组、MC‐LR染毒组、MC‐LR染毒＋ GSH低剂量组（GSH低剂量干预组）、MC‐LR染毒＋GSH高剂量组（GSH高剂量干预组）,每组8只,雌雄各半,经腹腔注射持续染毒15 d ,检测肝脏组织病理变化情况及肝脏组织 GSH水平、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH‐Px）活力和丙二醛（MDA）水平。结果与生理盐水对照组比较,MC‐LR染毒组肝细胞GSH水平及SOD、GSH‐Px活力明显降低（P＜0．05）,MDA水平明显增高（P＜0．05）。与MC‐LR染毒组比较,GSH低、高剂量干预组GSH水平及SOD、GSH‐Px活力均增高（P＜0．05）,MDA水平均降低（P＜0．05）。结论 GSH干预后可减轻MC‐LR所致小鼠肝脏氧化毒性,对肝脏具有一定的保护作用。     

α-晶体蛋白干预大鼠RGCs过氧化损伤作用实验研究

目的 观察α-晶体蛋白（α-crystallin）在过氧化氢（H2O2）损伤大鼠视网膜神经节细胞（retina ganglion cells,RGCs）中的影响并探讨其机制.方法 原代培养大鼠RGCs并用Thy1.1鉴定,α-crystallin组加入α-晶体蛋白（10^-4、10^-5、10^-6g/L）预处理2h,然后加入H2O2（终浓度为0.5mmol/L）进行损伤实验,观察3、12、24h细胞形态学变化、轴突长度和突起数目的变化及细胞凋亡发生,检测RGCs培养上清液中相关酶（超氧化物歧化酶/SOD、谷胱甘肽过氧化物酶/GSH Px和过氧化氢酶/CAT、乳酸脱氢酶/LDH）活性及丙二醛/MDA水平的变化.Fluo-3/AM荧光比值成像技术测定RGCs胞浆游离钙离子水平.结果 单纯损伤组RGCs存活率与SOD、CAT、GSH Px活性随损伤时间延长显著降低,LDH活性和MDA含量升高;α-crystallin组RGCs存活率与SOD、CAT、GSH Px活性升高,LDH、MDA生成减少,其变化呈浓度依赖性.α-crystallin组RGCs突起断裂程度明显少于单纯损伤组.单纯损伤组24h DNA电泳出现明显凋亡梯形带,α-crystallin低浓度组出现较弱凋亡带.单纯损伤组RGCs钙离子荧光强度急剧升高,12h达平台期.α-crystallin组钙离子变化随α-crystallin浓度增高而减弱.结论 α-晶体蛋白能够减轻H2O2介导的RGCs自由基损伤效应,其机制与抑制RGCs钙离子内流、升高RGCs抗氧化酶活性有关.     

雷公藤甲素抑制未分化甲状腺癌细胞增殖

目的研究雷公藤甲素对人未分化甲状腺癌FRO细胞株增殖抑制作用。方法以雷公藤甲素处理FRO细胞,采用WST-1法检测细胞增殖的抑制率、Western blot方法分析雷公藤甲素对FRO细胞的activated Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响;荧光探针-2’,7’-二氯氢化荧光素-二乙酸酯测定雷公藤甲素对胞内活性氧(ROS)水平的影响,酶标仪检测胞内谷胱甘肽(GSH)和氧化性谷胱甘肽(GSSG)含量的变化。结果与空白对照组相比,雷公藤甲素呈浓度、时间依赖性抑制FRO细胞增殖,IC50为22.8 nmol/L;Western blot检测发现雷公藤甲素给药处理12 h后,其activated Caspase-3和Caspase-9蛋白表达明显增加。雷公藤甲素作用2 h后,能显著增加FRO细胞ROS水平(P0.01);雷公藤甲素能显著降低FRO细胞内GSH水平,作用48 h胞内GSH降为对照组的(21.07±1.29)%(P0.05),而氧化型谷胱甘肽GSSG含量的变化无统计学意义(P0.05)。结论雷公藤甲素对人未分化甲状腺癌FRO细胞株的生长有抑制作用,诱导细胞凋亡,胞内氧化还原稳态失衡在其中起了重要作用。     

海滩牵牛有效部位的免疫调节和抗氧化活性研究

目的研究海滩牵牛有效部位（EFIS）的免疫调节和抗氧化活性。方法提取海滩牵牛有效部位（EFIS）,选取雄性昆明小鼠,随机分组,分别喂服不同剂量的EFIS5d后,测定廓清指数K值。另外连续喂服EFIS25d,各组小鼠断头取血,测定小鼠血液过氧化氢酶（CAT）活性、谷胱甘肽氧化物酶（GsH—Px）、红细胞丙二醛（MDA）以及血清总SOD活性。结果100、300mg／kg EFIS可降低廓清指数K,使小鼠血红悦蛋白中CAT活性扣全血GSH—Px活性及血清总SOD活性均有显著的提高,而能显著地下降小鼠红细胞MDA值。结论中、低剂量的EFIS对小鼠非特异性免疫功能有较强的抑制作用,提高血中CAT和GSH—Px活性,发挥抗氧化能力。     

睾酮对去势大鼠血管平滑肌细胞线粒体损伤的影响

目的：研究生理剂量睾酮对去势大鼠主动脉血管平滑肌细胞线粒体损伤的保护作用,并探讨其可能机制。方法选取8周龄雄性 SD 大鼠30只,随机分为假手术组,去势组和去势﹢睾酮组,每组10只。去势组行睾丸切除术,去势﹢睾酮组在去势后每天给予丙酸睾酮5.0 mg/ kg 肌肉注射。12周后测定各组血清睾酮浓度,并取大鼠胸主动脉,免疫印迹法检测血管平滑肌组织线粒体融合素2蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察线粒体形态变化;JC -1检测线粒体膜电位;测定细胞总三磷酸腺苷（ATP）含量,超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH - Px）活性以及丙二醛（MDA）水平。结果与假手术组比较,去势组大鼠血清睾酮水平降低（ P ＜0.05）,线粒体融合素2表达降低（P ＜0.05）,线粒体聚集呈团块状,线粒体膜电位减低（P ＜0.05）,ATP 含量、SOD 和GSH - Px 活性降低（P ＜0.05）,MDA 水平增加（P ＜0.05）。与去势组相比,去势﹢睾酮组大鼠血清睾酮水平升高（P ＜0.05）,线粒体融合素2表达增加（P ＜0.05）,线粒体呈管状分布,线粒体膜电位增高（P ＜0.05）,ATP 含量、SOD 和 GSH - Px 活性增加（P ＜0.05）,MDA 水平降低（P ＜0.05）,与假手术组比较差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论生理剂量睾酮可维持去势大鼠血管平滑肌细胞的线粒体形态和膜电位水平,增加细胞 ATP 含量,降低氧化应激水平,对线粒体损伤具有保护作用,上调线粒体融合素2表达是其可能机制之一。     

黄芪甲苷对脂多糖诱导的 MC3T3-E1细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的 探讨黄芪甲苷（AS-Ⅳ）对脂多糖（LPS）诱导的成骨细胞前体细胞MC3T3-E1氧化损伤的保护作用,阐明其相关机制。 方法 将对数生长期MC3T3-E1细胞分为对照组、LPS组和不同浓度（10、25、50及100 mg·L^－1） AS-Ⅳ组,采用CCK-8法检测各组细胞活性。将对数生长期MC3T3-E1细胞分为对照组、LPS组、AS-Ⅳ组和AS-Ⅳ+LY294002［磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路抑制剂］组,采用流式细胞术检测各组细胞中活性氧（ROS）水平,采用相关试剂盒检测各组细胞中丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性,采用实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中血红素加氧酶1（HO-1）mRNA表达水平,采用Western blotting法检测各组细胞中HO-1、PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）、核因E2相关因子2（Nrf2）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。 结果 CCK-8法检测,与对照组比较,LPS组细胞活性明显降低（P<0.01）;与LPS组比较,50和100 mg?L^－1AS-Ⅳ组细胞活性明显升高（P<0.01）。与对照组比较,LPS组细胞中ROS和MDA水平明显升高（P<0.01）,GSH水平和SOD活性明显降低（P<0.01）;与LPS组比较,AS-Ⅳ组细胞中ROS和MDA水平明显降低（P<0.01）,GSH水平和SOD活性明显升高（P<0.01）;与AS-Ⅳ组比较,AS-Ⅳ+LY294002组细胞中ROS和MDA水平明显升高（P<0.01）,GSH水平和SOD活性明显降低（P<0.01）。与对照组比较,LPS组细胞中HO-1 mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01）;与LPS组比较,AS-Ⅳ组细胞中HO-1 mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）,Bax蛋白表达水平明显降低（P<0.01）;与AS-Ⅳ组比较,AS-Ⅳ+LY294002组细胞中和HO-1 mRNA表达水平和HO-1、p-Akt、Nrf2及Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）,Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。 结论 AS-Ⅳ可以通过介导PI3K/Akt/Nrf2信号通路对LPS诱导的成骨细胞氧化损伤起到保护作用。     

槲寄生提取物的抗衰老实验研究

目的：观察槲寄生Viscum coloratum Nakai,提取液抗衰老作用。方法：槲寄生提取液按10g/kg,20g/kg给老年大鼠连续灌胃30d后,测血清过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）和下丘脑超氧化物岐化酶（SOD）活性,脑组织丙二醛（MDA）、脑组织和肝脏脂褐质（Lf）含量。结果：槲寄生两剂量组均能明显提高老年大鼠血清CAT、GSH－Px活性,降低老年大鼠脑组织MDA含量、脑和肝组织Lf含量,并可提高老年大鼠下丘脑SOD活性。结论：槲寄生提取液可通过改善自由基代谢而发挥抗衰老作用。     

糖尿病大鼠肾脏抗氧化防御机能的变化

目的：探讨糖尿病对肾脏抗氧化防御机能的影响。方法：观察12周糖尿病大鼠肾皮质丙二醛（MDA）及谷胱甘肽（GSH）水平,以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－PX）、谷胱甘肽S－转移酶（GSH－ST）和过氧化氢酶（CAT）活性的变化。结果：糖尿病大鼠肾组织中SOD、GSH－ST及CAT活性下降,GSH含量显降低;MDA没有变化;GSH－PX活性却明显增强。结论：糖尿病大鼠肾组织抗氧化防御机能明显下降。