DC联合SEA激活TIL体外杀伤小鼠肝癌细胞活性研究

目的探讨H22细胞全细胞性抗原致敏的DC联合SEA激活的TIL体外抗小鼠肝癌活性作用。方法从荷瘤小鼠四肢长骨骨髓中获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和H22细胞全细胞性抗原致敏DC,然后用已致敏的DC联合SEA激活从荷瘤小鼠中提取的TIL和脾淋巴细胞,观察受激活后的TIL和脾淋巴细胞作为效应细胞在体外对H22细胞的杀伤活性,并与对照组进行比较。结果TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(50.63±2.52)%]高于脾淋巴细胞对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(12.26±1.28)%],用不同方式激活的TIL对H22细胞的杀伤活性均高于各自对应方式激活的脾淋巴细胞对H22细胞的杀伤活性;SEA激活的TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(64.35±2.82)%]高于TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(50.63±2.52)%],已致敏DC激活的TIL对H22细胞的杀伤活性更高[杀伤率为(75.23±3.21)%],而已致敏DC联合SEA激活的TIL对H22细胞的杀伤活性最高[杀伤率为(86.29±3.83)%]。结论用H22细胞全细胞性抗原致敏的DC联合SEA能显著激活TIL产生高效的对H22细胞的杀伤活性。     

树突状细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞体外对自体肝癌细胞杀伤活性的研究

目的探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对自体肝癌细胞杀伤活性.方法从肝癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC来激活TIL,观察TIL在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性.结果DC激活的TIL具有很高的对自体肝癌细胞杀伤活性,杀伤率为(89.39±3.05)%,明显高于未经DC激活的TIL、CD激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率.结论肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫.     

IL-2激活的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性及其与LAK细胞活性的比较

肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)经白细胞介素2(IL-2)体外培养后具有很强的体内外抗肿瘤作用,且有一定的靶细胞特异性,其抗肿瘤效果强于淋巴因子激活的杀伤细胞即LAK细胞(P<0.01)。从瘤体中新鲜分离到的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性极低,经IL-2体外培养后,其杀伤活性逐渐增高,以培养至7～25d的杀伤活性最强,这与IL-2使TIL分泌3种抗癌淋巴因子包括IL-2、IFN-γ、淋巴毒素(LT)增加有关。体外培养25d后,TIL的抗肿瘤活性下降,实验表明这与培养过程中TIL的Lyt-2~+细胞(Tc)减少而L3T4~+细胞(T_H)增多有关。TIL经冻存复苏和IL-2体外培养后仍保持很强的抗肿瘤活性,冻存前后比较未见显著差异(P>0.05),这为间断地运用TIL治疗复发性、晚期肿瘤提供了一条可行的途径。     

癌性胸水中肿瘤浸润淋巴细胞对自身肿瘤细胞的杀伤作用2例报告

肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）是继淋巴因子激活杀伤细胞（LAK）后被认为具有更强抗肿瘤活性的免疫活性细胞。癌性胸水中TIL是TIL的特殊类型,其分离简单、体外扩增及杀伤活性的诱导较实体瘤TIL快,是TIL的较佳来源“’。我们在应用癌性胸水中TIL治疗癌性胸水取得较好效果的基础上,探讨TIL对自身肿瘤的体外杀伤作用,并以LAK细胞比较,现报告如下：1材料与方法1·1临床资料2例患者诊断肺鳞状细胞癌,并发胸膜转移,癌性胸水。1．2方法1．2．ITIL分离制备按文献［‘例备。1·2·2LAK细胞制备无菌抽取患者外周抗凝血10～20ml,分离…     

DC联合香菇多糖激活TIL体外抗小鼠肝癌研究

目的:探讨H22细胞全细胞性抗原致敏的树突状细胞(dendritic cell,DC)联合香菇多糖激活的TIL体外抗小鼠肝癌活性作用。方法:从荷瘤小鼠四肢长骨骨髓中获取DC,体外致敏DC,然后用已致敏的DC联合香菇多糖激活从荷瘤小鼠中提取的TIL和脾淋巴细胞,观察受激活后的TIL和脾淋巴细胞作为效应细胞在体外对H22细胞和S180细胞的杀伤活性。结果:各组效应细胞对H22细胞的杀伤活性均高于各自对应的效应细胞对S180细胞的杀伤活性;TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(42.56±2.52)%]高于脾淋巴细胞对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(9.89±1.28)%];香菇多糖激活的TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(62.46±2.82)%]高于TIL对H22细胞的杀伤活性[杀伤率为(42.56±2.52)%],已致敏DC激活的TIL对H22细胞的杀伤活性更高[杀伤率为(72.35±3.21)%],而已致敏DC联合香菇多糖激活的TIL对H22细胞的杀伤活性最高[杀伤率为(82.32±3.83)%],它们之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:用H22细胞全细胞性抗原致敏的DC联合香菇多糖能显...     

丹参注射液对肿瘤浸润淋巴细胞的体外扩增及抗肿瘤作用

目的观察丹参注射液对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的体外扩增及抗肿瘤免疫作用,为扩大该药的临床应用范围提供依据.方法从癌症患者恶性胸水中分离获取TIL和自体瘤细胞,观察丹参注射液对TIL体外长期存活、扩增及抗肿瘤作用的影响.结果(1)丹参注射液可使TIL体外长期存活(>17d).(2)丹参注射液可使TIL在10d内持续扩增并在11～15d保持较高水平.TIL在完全培养剂内则在1周内死亡.(3)扩增后的TIL在体内外的抗肿瘤活性均明显增强,作用类似IL2.结论丹参注射液可明显促进TIL的体外扩增及抗肿瘤作用,可作为TIL的中药促进剂来替代IL2.     

树突状细胞激活的肿瘤浸润性淋巴细胞体外对自体肝癌细胞杀伤活性的研究

目的:探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对自体肝癌细胞杀伤活性.方法:从肝癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC来激活TIL,观察TIL在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性.结果:DC激活的TIL具有很高的对自体肝癌细胞杀伤活性,杀伤率为(89.39±3.05)%,明显高于未经DC激活的TIL、CD激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体肝癌细胞的杀伤率.结论:肝癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗肝癌免疫.     

树突状细胞激活的肿瘤浸润淋巴细胞体外抗小鼠乳腺癌活性的研究

目的:探讨致敏的树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)体外抗小鼠乳腺癌活性.方法:从小鼠四肢长骨骨髓中获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和肿瘤全细胞性抗原致敏DC,然后用DC激活TIL,观察TIL在体外对小鼠C127乳腺癌细胞、小鼠MA782乳腺癌细胞和小鼠B16黑色素瘤细胞的杀伤活性.结果:经C127细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL具有很强的对C127细胞的杀伤活性[杀伤活性为(70.21±2.86)%],明显高于其对MA782和B16细胞的杀伤活性[杀伤活性分别为(51.31±3.25)%,(31.41±2.65)%],也明显高于未经DC激活的TIL、C127-DC-小鼠脾淋巴细胞和未经DC激活的小鼠脾淋巴细胞对C127细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(48.30±2.97)%,(47.76±3.43)%和(17.23±2.56)%]和对MA782细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(38.52±2.87)%,(36.62±2.75)%和(18.07±2.40)%]以及对B16细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(25.38±2.63)%,(24.82±2.81)%和(17.34±2.81)%],同时B16细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL(TIL来源于C127瘤体)也可诱导相对较低的对B16细胞的特异性细胞杀伤活性.结论:经C127细胞全细胞性抗原致敏的DC能诱导TIL产生高效而特异的体外抗小鼠乳腺癌免疫.     

原代培养的肺癌细胞对TIL的反杀伤作用

目的探讨肺癌细胞对TIL细胞是否具有反杀伤作用及意义。方法用MTT法检测8例人原发性肺癌的原代培养肿瘤细胞被Fas配体(Fasligand.FasL)抗体封闭前后对肿瘤浸润淋巴细胞(TumorInfiltratingLymphocytes,TIL)的杀伤活性。结果发现原代培养的肺癌细胞被FasL抗体封闭前后对T1L均有不同程度的杀伤作用,但经FasL抗体封闭后的肿瘤细胞对TIL的杀伤活性均有所下降,两组之间存在显著差异(p<0.05)。结论提示肺癌细胞对TIL细胞的反杀伤作用可能是其逃避免疫攻击的机制之一。     

香菇多糖与IL-2合用对肺癌浸润淋巴细胞抗瘤活性的影响

目的探讨香菇多糖与IL-2合用对肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)抗瘤活性的影响。方法将TIL分别置于含IL-2或IL-2加香菇多糖培养液中培养30d,观察TIL的扩增能力、抗瘤活性的变化。结果IL-2加香菇多糖培养的Til平均扩增倍数和抗瘤活性均明显高于IL-2培养的TIL。IL-2加香菇多糖培养的TIL对自体瘤细胞,K562和Raji细胞的最大杀伤活性分别为67.18±14.73％,71.25±15.86％和66.15±15.07％;而单纯IL-2培养的TIL对各种靶细胞的最大杀伤活性分别为43.81±12.17％,50.83±13.56％和45.41±13.76％。两组相比,差异显著(P＜0.05)。结论香菇多糖与IL-2合用具有促进TIL扩增,增强其抗瘤活性的作用。     

肺腺癌恶性胸水中肿瘤浸润T淋巴细胞成分及其对自体肿瘤细胞的杀伤活性

目的：分析恶性胸水中的肿瘤浸润T淋巴细胞(tumor infiltrating T lymphocyte,TIL)的细胞成分,探究其对 自体肿瘤细胞的杀伤活性。方法：收集17例肺腺癌患者的胸水,采用Ficoll密度梯度离心法分离恶性胸水中的单个 核细胞,流式细胞检测仪分析TIL细胞成分,贴壁培养法分离肿瘤细胞和TIL,裸鼠成瘤实验明确贴壁细胞为肿瘤 细胞,MTT法检测培养的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性。结果：恶性胸水TIL中T细胞占60.6%~79.3%,辅助性T细 胞占比显著高于细胞毒性T细胞(36.63%±1.90% vs 24.64%±2.32%,P<0.001),同时还含有少量自然杀伤(natural killer, NK)细胞和NK T细胞;采用贴壁培养法成功分离培养肿瘤细胞,体外培养增殖的TIL对自体肿瘤细胞杀伤活性为 39.14%±12.04%,且体外高增殖组的TIL对自体肿瘤细胞的杀伤活性高于低增殖组(50.51%±3.80% vs 29.04%±5.77%, P<0.001)。结论：肺腺癌恶性胸水中TIL主要以T细胞为主,辅助性T细胞多于细胞毒性T细胞,体外增殖能力强的TIL 对自体肿瘤细胞的杀伤活性高于增殖能力弱者,恶性胸水可能为肿瘤细胞免疫治疗提供细胞来源。     

原发性肝癌患者浸润淋巴细胞及其功能状态与预后的关系

目的评价浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）对原发性肝癌患者预后的影响。方法应用真彩色图像分析、免疫组织化学、３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验和乳酸脱氢酶释放测定等方法，检测新鲜手术标本ＴＩＬ细胞的组织密度、活化增殖和细胞毒功能，并进行临床随访。结果按癌灶内ＴＩＬ浸润程度本组患者分为无浸润、低度浸润和大量浸润三类。肿瘤临床类型不同，ＴＩＬ浸润程度亦各异；无ＴＩＬ浸润组患者，术后生存时间较有浸润组短，术后肝癌复发率也高于后者。新鲜分离的ＴＩＬ细胞的活化增殖和杀伤活性均低于自体淋巴细胞（ＰＢＬ），激活后对自体肝癌细胞产生高效杀伤作用。结论原发性肝癌患者ＴＩＬ细胞与预后有关，但在癌灶内其活化增殖和杀伤功能受到损伤或被抑制     

用重组人白细胞介素2诱导人肺癌浸润淋巴细胞的LAK样活性

淋巴细胞浸润肿瘤组织的现象已被广泛注意,但对TIL的抗肿瘤作用进行研究只是近二三年才开始。这主要是由于基因工程技术的进步,使人们可以获得大量纯一的重组白细胞介素2(rIL-2),从而可进行TIL的活化,增殖,扩增的研究。我们用人rIL-2对     

Immune effect of tumor-infiltrating lymphocytes and its relation to the survival rate of patients with ovarian malignancies

Summary Tumor-infiltrating lymphocytes (TIL) in histological sections from 94 patients with ovarian malignancies were quantitated for their relation to the prognosis of the patients. It was found that the degree of lymphocyte infiltration directly affected the patients’ survival rate and also related to clinical staging of the patients, as well as grading and histologic typing of the tumor. T lymphocytes characterized by alpha-naphthyl acetate (ANAE) staining were the major cells in the stroma of ovarian malignancies. Ultrastructural study of TIL and cancer cells suggested that tumor cell degeneration is related to the effect of TIL.     

肿瘤浸润淋巴细胞的免疫效应及其与卵巢恶性肿瘤预后的关系

本文观察94例卵巢恶性肿瘤组织切片中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)与卵巢恶性肿瘤预后的关系。结果表明淋巴细胞浸润程度直接影响患者的预后,并与肿瘤的临床分期,细胞分级和组织类型密切相关。α-醋酸萘酯酶染色显示T淋巴细胞是肿瘤间质中的主要效应细胞。在电镜水平上分析TIL与肿瘤细胞的超微结构,进一步证实肿瘤细胞退化溶解与TIL有关。     

肝癌瘤苗激活的TIL在体外抗肿瘤活性的研究

目的：为了提高肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）的抗瘤活性。方法：使用肝癌瘤苗来激活ＴＩＬ，观察其抗瘤活性的改变。结果：经瘤苗激活的ＴＩＬ在培养护增１０、２０、３０和４０ｄ的体外对自体肝癌细胞的杀伤率均有明显提高，其中以培养扩增３０ｄ时为最高。结果：经肝癌瘤苗激活的ＴＩＬ具有更高的体外杀伤自体肝癌细胞的能力。     

Induction of antitumor activity and experimental expansion of human lung cancer-infiltrating lymphocytes.

In order to look for effector cells which are more efficient and less toxic than LAK cells induced from PBL for use in adoptive immunotherapy, we studied the antitumor activity and in vitro expansion of tumor infiltrating lymphocytes (TIL) from human lung cancers and compared their cytological properties with those of autologous PBL. The results showed: 1) Large numbers of TIL could be obtained from lung cancer tissue, approximately 1-5 x 10(8)/g tumor tissue, with an average TIL to tumor cell ratio of 2.3:1 (21 samples). 2) Fresh TIL were not cytotoxic against either NK-sensitive or -resistant tumor targets. After culturing for 6 to 8 d in the presence of rIL-2, TIL showed significant cytotoxicity and were able to kill autologous and allogeneic tumor targets and fresh solid tumor targets. 3) When maintained in the presence of rIL-2, TIL were able to continue proliferating and expanding for more than 2 mon, with expansion indices of 4-512. TIL stopped proliferating following the disappearance of autologous tumor cells in the culture. 4) Chronological studies revealed that the cytotoxicity appeared after 4 days in culture and reached a peak on the 14th day, and cultured TIL remained cytotoxic for at least 4 wk.     

葡萄球菌肠毒素A脂质体激活肿瘤浸润淋巴细胞抗肿瘤活性的实验研究

目的　研究葡萄球菌肠毒素 A(SEA)脂质体 (L- SEA)体外激活肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)抗肿瘤的活性。方法　从 5例原发性肝癌患者癌组织中分离培养 TIL,分别以 L- SEA、SEA和 IL- 2刺激后 ,观察 TIL 的增殖曲线 ,EL ISA法检测细胞因子的分泌 ,流式细胞仪检测细胞亚群的变化 ,MTT法检测 TIL 的肿瘤杀伤活性。结果　L- SEA、SEA及 IL- 2均能有效刺激 TIL 的增殖 ,最高增殖倍数分别为 4 2 .5、5 1、12 .5倍。除第 4 d L- SEA组 TIL 的IFN- γ水平低于游离 SEA组外 ,此两组的细胞因子分泌没有显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,且都高于 IL- 2组。 L- SEA刺激后 ,TIL 的 CD8+细胞亚群增殖更快 ,CD4 +细胞 / CD8+细胞出现倒置。经过 L- SEA培养后的 TIL 能有效杀伤Hep G- 2肿瘤细胞。结论　 L- SEA仍然具有游离 SEA的刺激 TIL 增殖、分泌细胞因子、杀伤肿瘤细胞的活性。     

肝癌瘤苗激活的TIL对K562细胞杀伤活性的研究

目的：为也提高ＴＩＬ的抗肿瘤细胞活性。方法；使用冷冻方法制成肝癌瘤苗。用于激活ＴＩＬ，观察基杀伤Ｋ５６２细胞活性的改变。结果：经瘤苗激活的ＴＩＬ在培养扩增１０天，２０天，３０天和４０天对Ｋ５６２细胞的杀伤率均有明显提高，其中以培养扩增３０天时为最高。     

肿瘤浸润淋巴细胞免疫治疗胃癌的疗效

目的 对胃癌患者实施肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）免疫治疗。方法 培养收获ＴＩＬ细胞,并回输患者。结果 ＴＩＬ治疗能使部分患者瘤体缩小,生存期延长,一般症状显著改善,治疗前后免疫学参数（ＣＤ３／ＣＤ４,自体ＬＡＫ活性,血清ＳＩＬ－２Ｒ水平）表明,ＴＩＬ治疗可以提高患者机体免疫功能,增强抗癌抑癌能力。结论对胃癌患者综合治疗,ＴＩＬ免疫治疗值得临床进一步扩大应用。