基于TCGA数据库分析肝细胞肝癌组织中HMMR表达与患者临床特征及预后的相关性

目的:研究透明质酸介导的运动受体（hyaluronan-mediated motility receptor,HMMR）的表达与肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的发生发展以及预后的关系。方法:在本研究中,我们通过从癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库中下载HCC有关的数据进行生物信息学分析,探讨HMMR表达在HCC发生、发展和预后中的价值。根据HMMR mRNA表达的中位值将患者分为两组(HMMR高表达组和HMMR低表达组),应用Kruskal-Wallis检验和Logistic回归分析HMMR表达与患者临床特征之间的关系,利用Kaplan-Meier和Cox分析观察HMMR表达对HCC患者生存的影响,并进行PPI蛋白互作网络、GO富集和KEGG通路分析。最后通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)验证HMMR mRNA在HCC组织样本中的表达。结果:HCC组织中HMMR的高表达与组织学分级(G3 vs G1,OR=2.675)、癌组织阶段(Ⅲ vs Ⅰ,OR=2.509）、T分期(T4 vs T1,OR=3.568)相关(P均<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,HMMR高表达的HCC预后比HMMR低表达的患者差(P=6.858E-05)。Cox分析显示HMMR高表达是总体生存（overall survival,OS）的危险因素（HR:1.166,95%CI:1.027~1.324,P=0.018）。PPI蛋白互作、GO富集和KEGG通路分析鉴定了与HMMR存在相互作用的10个基因,分别为:FAM83D、CD44、TPX2、PLK4、AURKA、PLK1、NEK2、CDK1、BUB1及DLGAP5,它们主要富集在有丝分裂细胞周期相变的调控、细胞周期过程、ECM-受体相互作用、FoxO信号通路、EB病毒感染等。qRT-PCR结果显示,HMMR mRNA在HCC癌组织中高表达（P＜0.05）。结论:HMMR mRNA的高表达与HCC的发生发展密切相关,是HCC预后不良的独立危险因素。     

特利加压素在治疗肝癌合并肝硬化术后腹腔积液的疗效观察

目的：观察特利加压素控制肝癌切除术后腹腔积液形成的临床疗效。方法回顾性分析2010年12月至2012年12月该院行肝癌切除术治疗的合并肝硬化的肝癌患者42例,其中,经特利加压素治疗的观察组22例,传统利尿剂治疗的对照组20例。比较两组患者的术后腹腔积液引流量、术后尿量、肾功能变化及术后恢复情况（引流管拔管时间、术后住院时间等）。结果观察组患者术后经特利加压素治疗后,第1、2、3天的腹腔积液量均明显低于对照组,两组比较差异有统计学意义（t ＝4．259、6．398、8．658,P ＜0．05）。观察组治疗后第1、3天的尿量均多于对照组,两组比较差异有统计学意义（t＝6．818、6．850,P ＜0．05）。观察组有9．1％（2／22）的患者出现电解质紊乱,对照组为20％（4／20）,两组比较差异无统计学意义（χ2＝0．322,P ＞0．05）。观察组术后引流管拔管时间（109±25）h 和住院时间（25±2）d,明显短于对照组的（163±26）h 和（27±4）d,两组比较差异有统计学意义（t＝6．791、2．674,P ＜0．05）。结论特利加压素较传统利尿剂能更有效控制肝癌切除术后患者腹腔积液的形成,并且有利于术后恢复。     

GPC3真核表达载体的构建及其对肝癌细胞功能的影响

目的：通过构建GPC3增强型绿色荧光蛋白真核表达载体，研究磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（Glypican-3，GPC3）促细胞增殖效应的影响，探讨GPC3基因对肝癌细胞侵袭和转移能力的影响。方法：应用基因重组技术及限制性内切酶酶切构建并鉴定pEGFP-IRES-N1-GPC3增强型绿色荧光蛋白真核表达载体，经脂质体Lipofectamine^TM 2000介导转染BEL-7404后，通过G418筛选出抗性克隆，应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测GPC3 mRNA在真核细胞中的表达，并在激光共聚焦显微镜下观察目的蛋白在真核细胞内的表达情况，采用免疫荧光法和流式细胞仪检测GPC3对细胞增殖效应的影响。Transwell小室实验检测BEL-7404肝癌细胞的侵袭能力。结果：限制性内切酶酶切分析、重组质粒测序鉴定表明为正确重组子，荧光显微镜下可见转染的真核细胞胞膜区发出强绿色荧光，RT-PCR法表明GPC3在真核细胞中成功表达，转GPC3的BED7404肝癌细胞与对照组相比有促细胞增殖及侵袭和转移效应。结论：构建完成真核表达重组质粒pEGFP—IRES-N1-GPC3；GPC3基因在BEL-7404中成功表达；GPC3可促进肝癌细胞的增殖，其通过增加细胞的侵袭能力而促进肝癌的转移。     

E-cadherin和β-catenin在肝细胞癌中的表达及意义

[目的]探讨上皮型钙黏素（E-cadherin）和β-连环素（β-catenin）在肝细胞癌（HCC）中的表达及其与临床病理特征的关系。[方法]采用免疫组织化学方法检测61例HCC组织及其癌旁肝组织中E-cadherin和β-catenin蛋白的表达,分析其表达与HCC临床病理特征的关系。[结果]E-cadherin和β-catenin蛋白在癌组织中的异常表达率分别为34.43%和67.21%,而在癌旁肝组织中的异常表达率分别为14.75%和26.23%,癌组织与癌旁组织比较差异有显著性（P〈0.05）。E-cadherin表达与门脉癌栓、术后复发、肿瘤大小、肿瘤分化、肿瘤个数有关。β-catenin异常表达在不同肿瘤个数及不同肿瘤分化状况下差异有显著性。[结论]E-cadherin和β-catenin的异常表达可能与HCC的发生及术后的复发及转移有关,可能作为监测HCC恶性程度和判断预后的指标。     

水蛭素对肝细胞癌HepG2细胞抑制作用机制探讨

目的 研究水蛭素对肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC,简称肝癌）HepG2细胞抑制作用及其抗肝癌的分子机制。方法 将含不同浓度（1 U/mL、2 U/mL、4 U/mL和8 U/mL）水蛭素的培养液作用于肝癌HepG2细胞,采用MTT法检测水蛭素对肝癌HepG2细胞增殖的影响,流式细胞仪检测水蛭素对肝癌HepG2细胞凋亡的影响,Transwell法检测水蛭素对肝癌HepG2细胞迁移、侵袭的影响,荧光定量PCR检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因的mRNA表达水平,Western blot检测VEGF基因的蛋白表达水平。结果 与空白对照组比较,肝癌HepG2细胞增殖抑制率随水蛭素浓度（1 U/mL、2　U/mL、4 U/mL和8 U/mL）增加及作用时间（24　h、48　h、72　h）延长而增加,呈剂量-时间依赖效应（P<0.05）。不同浓度（2 U/mL、4 U/mL和8 U/mL）水蛭素作用48 h后,肝癌HepG2细胞凋亡率分别为（28.37±1.16）%、（40.27±0.97）%、（76.17±1.5）%,细胞侵袭个数分别为（204±9）个、（163±6）个、（94±4）个,细胞迁移个数分别为（86±5）个、（54±7）个、（20±5）个,细胞凋亡率、侵袭及迁移个数随水蛭素浓度增加而增加,呈浓度依赖性（P<0.05）。VEGF mRNA、蛋白的表达量随水蛭素浓度增加而明显下调（P<0.05）。结论 水蛭素能抑制肝癌HepG2细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭,其机制可能是通过下调VEGF表达。     

肝细胞性肝癌组织中凝血酶的表达及其与微血管密度的相关性研究

目的检测凝血酶在肝细胞性肝癌（HCC）组织和癌旁组织中的表达,分析其与微血管密度（MVD）的关系,以探讨其在HCC发生发展中的作用。方法 HCC组织和癌旁组织42例,采用免疫组化染色法检测其凝血酶及血管内皮细胞表面抗原（CD34）表达,分析它们之间及各自与HCC临床病理特征之间的关系。结果 HCC组织中凝血酶阳性表达率显著高于癌旁组织（P〈0.05）;凝血酶的表达与患者术后有无复发密切相关（P〈0.05）。凝血酶的表达与MVD呈正相关（P〈0.05）。结论凝血酶在HCC组织中高表达并与术后复发有关,且与MVD呈正相关,提示凝血酶可能通过促进HCC血管的生成从而影响HCC的进展及预后。     

索拉非尼治疗肝细胞性肝癌45例疗效评价

目的：评价索拉非尼治疗肝细胞性肝癌的疗效及安全性。方法：总结2008年1月至2009年12月应用索拉非尼治疗的45例肝细胞性肝癌患者的临床资料。结果：33例接受过1次以上实体瘤治疗疗效评价标准（RECIST）评价者中,服药后6周RECIST评价时27例肿瘤稳定,5例肿瘤进展,1例肿瘤出现病灶缩小,10例美国东部肿瘤协作组（ECOG）体力状况评分改善;不良反应一般在服药后1～2周左右出现,在所有接受治疗的患者中,共14例发生较严重（3～4级）的不良反应,不能耐受不良反应而减少药物剂量者11例,3例停药。药物不良反应在减少剂量并予一定对症支持治疗后大多可以缓解。结论：索拉非尼可延长晚期肝细胞性肝癌患者的肿瘤无进展生存时间,且耐受性良好,是治疗晚期原发性肝癌的新选择。     

肝细胞癌切除术前应用肝动脉化疗栓塞术疗效的Meta分析

目的旨在评价肝动脉化疗栓塞术(TACE)在肝细胞癌(HCC)切除术前应用的疗效。方法计算机检索PubMed、Embase、Cochrane library、CNKI、VIP、万方数据库,截止日期到2013年3月12日。收集公开发表的关于HCC切除术前TACE治疗与单纯手术治疗比较的随机对照试验,对纳入的文献进行资料提取和质量评价,采用ReMan5.2软件进行统计分析。结果共纳入4个随机对照试验,共342例患者。Meta分析结果显示:术前TACE组与单用手术切除治疗HCC组相比,术后1、3、5年无瘤生存率的相对危险度(RR)[95%可信区间(CI)]分别为1.07(0.92~1.25)(P=0.38)、1.05(0.79~1.41)(P=0.72)、0.95(0.64~1.42)(P=0.81);1、3、5年总生存率的RR(95%CI)分别为1.01(0.92~1.10)(P=0.85)、1.14(0.97~1.34)(P=0.11)、0.95(0.75~1.21)(P=0.68);术后并发症发生率及病死率合并分析其相对危险度的RR(95%CI)分别为0.89(0.45~1.75)(P=0.73)、0.77(0.25~2.37)(P=0.65)。2组的术后1、3、5年无瘤生存率、总生存率及术后并发症发生率及病死率比较差异无统计学意义。结论HCC术前应用TACE不能提高术后无瘤生存率及总生存率。但是本研究中纳入的文献数及病例数均较少,尚需更多高质量的大样本临床随机对照试验进一步验证。     

胰腺癌、壶腹周围癌60例诊治体会

目的探讨胰腺癌及壶腹周围癌的诊断治疗方法。方法回顾性分析60例胰腺癌和壶腹周围癌患者的临床资料。结果胰头癌及壶腹周围癌的切除率分别为14.8%（4/27）和65.3%（18/26）,手术组死亡1例,死因为上消化道出血。术后并发症有：胰瘘（1例次）、胆瘘（2例次）、肠梗阻（2例次）、切口裂开（2例次）、上消化道出血（1例次）。未切除组死亡2例,死因均为多器官衰竭。结论早期诊断,提高手术技巧及改进手术方式,积极预防及处理术后并发症能改善胰腺癌及壶腹周围癌的生存质量及预后。     

热消融联合消融灶周边注射CpG ODN抑制小鼠肝癌生长的研究

目的 探讨热消融联合消融灶周边注射CpG ODN治疗对小鼠肝癌的影响及继发免疫效应的抗肿瘤效果.方法 建立Hepa1-6小鼠皮下肝癌动物模型32只,随机分为热消融治疗组、热消融联合CpG ODN治疗组、CpG ODN治疗组和对照组,每组8只.每组各6只接种肿瘤细胞后第7天、第14天给予治疗,测量小鼠肿瘤体积,观察荷瘤小鼠存活率及消融灶内淋巴细胞和HSP70变化,另8只第7天给予治疗,30 d后对侧接种等量肿瘤细胞,1个月后处死,观察小鼠生存状况及对侧肿瘤生长情况.结果 （1）各实验组小鼠观察期内死亡率均低于对照组（P＜0.05）,各实验组对侧均无肿瘤生长,对照组再接种肿瘤生长率为100%（3/3）,两者相比差异有统计学意义（P＜0.05）;（2）各实验组小鼠与对照组相比,肿瘤体积显著缩小（P＜0.05）,联合治疗组肿瘤缩小更显著;（3）各实验组较对照组有较多淋巴细胞浸润（P＜0.05）,联合治疗组数量最多;（4）各实验组与对照组相比有更多HSP70表达（P＜0.05）,联合治疗组HSP70表达最多,与其余实验组相比差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 CpG ODN对荷瘤小鼠具有明显的免疫增强作用,CpG ODN联合热消融治疗小鼠肝癌有效,且能减少复发.