六味地黄汤对慢性肾衰大鼠肾组织中HIF-1α、CTGF表达的影响

目的 探讨HIF-1α、CTGF在慢性肾衰大鼠肾组织中的表达及作用,观察六味地黄汤对其表达的影响.方法 用5/6肾切除法制作慢性肾衰模型,分假手术组、模型组和六味地黄汤组.造模后12周,检测各组肾功能指标;HE染色观察肾组织病理变化,Masson染色观察肾组织胶原的沉积;免疫组化法和RT-PCR法分别检测HIF-1α、CTGF在肾组织中的蛋白水平和基因表达.结果 与假手术组比较,模型组肾组织中HIF-1α、CTGF蛋白水平和基因表达均明显升高(P＜0.01).与模型组比较,六味地黄汤组肾组织中HIF-1α、CTGF蛋白水平和基因表达均明显降低(P＜0.01).结论 HIF-1α上调CTGF的表达促进肾间质纤维化,六味地黄汤可下调HIF-1α的表达,从而抑制肾间质纤维化.     

六味地黄汤对慢性肾衰模型大鼠PHD2和HIF-1α表达的影响

目的观察六味地黄汤对慢性肾衰模型大鼠肾组织中脯氨酸羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨慢性肾衰的发病机制以及六味地黄汤防治慢性肾脏病的分子机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组。5/6肾切除法复制慢性肾衰模型。六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组分别给予3.38 g/(kg·d)、6.75 g/(kg·d)、13.5 g/(kg·d)六味地黄汤灌胃。假手术组和模型组给予10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃12周。造模12周后,检测各组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐,HE染色观察各组大鼠肾组织形态学变化,免疫组化法和RT-PCR法分别检测各组大鼠肾组织中PHD2、HIF-1α蛋白水平和基因表达。结果模型组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐较假手术组明显升高(P0.05),六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组较模型组明显降低(P0.05)。HE染色假手术组大鼠肾组织肾间质纤维化不明显,模型组肾间质纤维化明显,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组较模型组肾间质纤维化程度明显减轻。与假手术组比较,模型组大鼠肾组织PHD2蛋白水平和mRNA表达均明显降低(P0.05),HIF-1α蛋白水平和mRNA表达均明显升高(P0.05)。与模型组比较,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组大鼠肾组织中PHD2蛋白水平和mRNA表达均明显升高(P0.05),HIF-1α蛋白水平和mRNA表达均明显降低(P0.05),且PHD2与HIF-1αmRNA的表达呈负相关(r=-0.653,P=0.00)。结论 PHD2/HIF-1α信号途径参与肾间质纤维化,六味地黄汤可有效防治慢性肾脏病,其作用机制可能与上调PHD2、降低HIF-1α表达有关。     

六味地黄汤通过缺氧诱导因子1α途径对5/6肾切除大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的 探讨六味地黄汤对缺氧诱导因子1α(HIF-1α)在慢性肾间质纤维化中的表达及作用.方法 选择清洁级雄性SD大鼠30只,随机分为分假手术组、模型组和六味地黄汤组各10只.假手术组打开腹腔暴露肾脏,但不切除肾脏.模型组、六味地黄汤组大鼠均在无菌条件下进行5/6肾切除术复制慢性肾间质纤维化模型,术后8周,比较3组肾脏组织病理变化,HIF-1α、结缔组织生长因子(CTGF)在肾组织中的蛋白表达水平.结果 与六味地黄汤组比较,模型组肾组织中HIF-1α、CTGF蛋白表达水平均明显升高(P＜0.05).结论 HIF-1α通过调节CTGF的表达促进肾间质纤维化,而六味地黄汤可降低HIF-1α的表达,从而减轻肾间质纤维化.     

六味地黄汤对大鼠单侧输尿管结扎后肾小管间质ColⅣ及TIMP-1表达的影响

目的观察六味地黄汤对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型中胶原Ⅳ（ColⅣ）及基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）表达的影响。方法将输尿管梗阻大鼠随机分为模型组，依那普利组，六味地黄汤组，假手术组，14d后采用免疫组织化学检测ColⅣ和TIMP-1的表达水平。结果与假手术组比较，其余3组ColⅣ和TIMP-1表达均明显高于假手术组（P〈0．01），六味地黄汤组ColⅣ和TIMP-1表达明显低于模型组（P〈0．01），高于依那普利组（P〈0．05）。结论六味地黄汤可下调TIMP-1和ColⅣ的表达，减缓UUO大鼠肾小管间质损害，可作为梗阻性肾病辅助用药。     

山药多糖预处理对缺血再灌注损伤大鼠肾脏缺氧诱导因子1α的影响

目的探讨山药多糖预处理对肾缺血再灌注损伤大鼠肾脏缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、山药多糖预处理组,制备大鼠肾缺血再灌注损伤模型。术前1周,山药多糖预处理组每日予以山药多糖（200mg·kg^-1）灌胃,假手术组和模型组每日予以生理盐水（10mL·kg^-1）灌胃,再灌注6h后检测各组大鼠血尿素氮（BUN）和血清肌酐（Scr）的含量,Westernblot和RT—PCR法分别检测各组肾组织HIF-1α蛋白及mRNA、HO-1蛋白的表达水平。结果山药多糖预处理组BUN、Scr含量明显低于模型组（P〈0．01）,肾组织HIF-1αmRNA及蛋白、HO-1蛋白的表达明显高于模型组（P〈0．01）。结论山药多糖预处理对。肾缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机制可能为通过上调肾组织中HIF-1α的表达进而诱导HO-1的表达。     

六味地黄汤对5/6肾切除大鼠NF-κB、MCP-1、Col-Ⅲ表达的影响

目的 观察六味地黄汤对5/6肾切除大鼠残肾转录因子-核因子κB (NF-κB)、单核细胞趋化因子(MCP-1)及Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)表达的影响,探讨六味地黄汤抑制肾间质纤维化进展的作用机制.方法 按照随机数字表法将60只SD雄性大鼠分为5组:空白组、假手术组、模型组、依那普利组、六味地黄汤组,每组12只,后三组行5/6肾切除术诱导大鼠肾衰模型,假手术组同期手术,但不损及肾脏.、造模术后3d进行灌胃干预.灌胃8周后处死各组大鼠,观察各组大鼠残肾组织形态学变化并用免疫组化法检测大鼠残肾NF-κB 、MCP-1 、Col-Ⅲ的表达.结果 (1)观察5/6肾切除大鼠残肾组织细胞形态学,与模型组相比六味地黄汤、依那普利组可减轻大鼠肾间质损害及纤维化程度;(2)免疫组化半定量分析显示六味地黄汤组肾皮质的NF-κB、MCP-1及Col-Ⅲ表达均明显低于模型组(P＜0.05),与依那普利组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 六味地黄汤可能通过下调NF-κB 、MCP-1及Col-Ⅲ的表达,减少细胞外基质的积聚,减轻炎症反应和纤维化程度,抑制5/6肾切除大鼠肾间质纤维化进展,可作为慢性肾衰竭的辅助用药、     

六味地黄汤对5/6肾切除大鼠MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的观察六味地黄汤对5/6肾切除大鼠残肾基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织型抑制物基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)表达的影响,探讨六味地黄汤保护肾功能,延缓肾损害的作用机制。方法按照随机数字表法将72只SD雄性大鼠分为5组:正常组、假手术组、模型组、依那普利组、六味地黄汤组。模型组、依那普利组、六味地黄汤组采用5/6肾切除术诱导大鼠肾衰模型,假手术组同期手术,但不损伤肾脏。造模术后3 d,对大鼠进行灌胃干预,灌胃第8周后处死大鼠,观察残肾组织形态学变化并用免疫组织化学分析法检测大鼠肾脏MMP-2,TIMP-2的表达情况。结果 (1)通过大鼠生物形态学观察、5/6肾切除大鼠残肾组织细胞形态学的改变,与模型组相比,使用六味地黄汤、依那普利灌胃可减轻大鼠肾间质损害及纤维化程度;(2)免疫组化半定量分析显示六味地黄汤组肾皮质的MMP-2表达高于模型组(P<0.05),TIMP-2表达弱于模型组(P<0.05)。结论六味地黄汤可能通过上调MMP-2的表达、下调TIMP-2的表达,促进细胞外基质成分降解,从而减少细胞外基质的积聚,减轻炎症反应和纤维化程度,达到防止肾间质纤维化、保护肾脏的作用。     

益肾活血方对UUO大鼠肾脏HIF-1α、PDGF-B、ICAM-1及VCAM-1表达的影响

目的：观察益。肾活血方对单侧输尿管结扎（UUO）大鼠中低氧诱导因子（HIF-1α）、血小板源性生长因子（PDGF—BB）、细胞间黏附因子1（ICAM．1）以及血管细胞黏附分子1（VCAM-1）表达的影响。方法：实验采用UUO大鼠造成肾纤维化动物模型,并以益肾活血方、氯沙坦灌胃治疗。分别在术后第7天、第14天、第21天采集肾脏标本,运用免疫组化法检测HIF—-1α、PDGF—BB、ICAM-1、VCAM-1在肾脏中的表达。结果：假手术组大鼠各时间点内,肾组织HIF-1仅、PDGF—BB、ICAM-1、VCAM．1蛋白表达均在正常范围内;模型组大鼠随时间延长,肾组织HIF—-1α、PDGF-BB、VCAM-1蛋白表达逐渐增加,给药组大鼠肾组织HIF-1α、PDGF—BB、ICAM-1、VCAM-1蛋白的表达有所降低（P〈0．01或P〈0．05）,益肾活血方组降低优于氯沙坦组。结论：益肾活血方能明显改善。肾纤维化过程中的内源性低氧状态、减轻大鼠肾间质的炎症反应,从而达到延缓肾间质纤维进展的作用。     

活性维生素D3抑制UUO模型大鼠肾间质纤维化作用的研究及其对TGF-β1，α—SMA表达的影响

目的：探讨活性维生素D3对单侧输尿管梗阻模型（UUO）大鼠肾小管间质纤维化的抑制作用,研究该病理过程中转化生长因子β1（TGF—β1）,α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达变化。方法：36只雄性Wistar大鼠,随机分为三组,活性维生素D。组、假手术组、模型组,每组12只。造模后活性维生素D。组给予罗盖全（骨化三醇）灌胃（3ng／100g）,假手术组及UUO模型组给予等量生理盐水灌胃。三组大鼠于给药后第14天,28d分批（n=6）处死,留取造模侧肾脏。用HE染色及Masson染色法观察肾小管间质纤维化程度,用免疫组化法测定TGF-β1,α-SMA在各组大鼠造模侧肾脏的表达情况。结果：免疫组织化学显示：UUO模型组大鼠的肾脏组织中TGF—β1及α—SMA的表达显著高于假手术组（P〈0．05）,而在活性维生素D3治疗组中,TGF—β1及的n—SMA表达低于UUO模型组（P〈0．05）,肾脏组织形态学显示：模型组肾间质纤维化程度明显高于假手术组,活性维生素D3组肾间质纤维化程度明显小于模型组（P〈0．05）。结论：活性维生素D3能有效抑制UUo大鼠肾间质中TGF—β1及Ⅱ-SMA的表达,从而减轻UU0大鼠肾间质纤维化程度。     

动态观察依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1,CTGF,Smad7和α-SMA的影响

目的：动态观察血管紧张素转换酶抑制剂依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织转化生长因子（transforming growth factor-β,TGF-β1)、结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）、Smad7和平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin, α-SMA)表达的影响,探讨依那普利对肾小管上皮细胞转分化的影响。方法：雄性SD大鼠64只,采用单侧输尿管梗阻模型,将实验大鼠分为假手术组（16只）、模型组（24只）和治疗组（24只）,治疗组从造模前24 h开始以依那普利10 mg/（kg·d）灌胃。分别于造模后3,7,14,21 d取梗阻侧肾组织进行HE染色,观察肾脏组织病理结构变化,并进行肾间质损伤指数评分;应用real-time PCR法检测肾组织TGF-β1和CTGF mRNA的表达,应用Western 免疫印迹检测肾组织α-SMA,Smad7和CTGF蛋白的表达。结果：随着梗阻时间的延长,单侧输尿管梗阻模型鼠肾间质损伤指数评分逐渐增加。TGF-β1和CTGF mRNA以及α-SMA和CTGF蛋白表达逐渐增加,Smad7蛋白表达逐渐减少。依那普利治疗后,肾间质损伤指数下降,TGF-β1和CTGF mRNA以及α-SMA和CTGF蛋白表达较模型组降低,Smad7蛋白表达较模型组增加,依那普利对各时间点 TGF-β1 mRNA的表达均有明显的下调作用,对 CTGF mRNA,α-SMA,CTGF和Smad7蛋白对以单侧输尿管梗阻术后3,7,14 d作用最明显。结论：依那普利可减轻梗阻肾间质纤维化, 以单侧输尿管梗阻后14 d内效果最好,这一作用可能与抑制肾组织TGF-β1,CTGF和α-SMA的表达,增加肾组织Smad7的表达有关。     

缺氧诱导因子-1α在实验性大鼠肾间质纤维化过程中的作用

目的：观察单侧输尿管梗阻（ulilateral ureteral obstruction,UUO）大鼠模型。肾组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达,探讨HIF-1α表达水平与肾小管间质纤维化的关系。方法：40只雌性SD大鼠随机分为2组,假手术组,UUO组（每组20只）。制备UUO大鼠模型,术后第7天、第14天处死大鼠,肾组织行HE和Masson染色,免疫组织化学和实时荧光定量PCR（RT—PCR）检测HIF-1α,Ⅰ型胶原（collagenⅠ,ColⅠ）及α-平滑肌肌动蛋白（α—smooth muscle actin,α—SMA）在肾组织中的表达。结果：假手术组与UUO组各时间点肾小管间质纤维化评分比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。术后HIF-lαmRNA水平随梗阻时间延长而递增。UU0组HIF-1α蛋白表达量随着肾间质损害加重而增加,HIF-1α蛋白主要分布在肾小管,其中以近曲小管表达最明显。HIF—1α表达水平与肾小管间质纤维化评分,α-SMA和ColⅠ的表达水平均存在正相关（R值分别为0．71,0．68,0．82,P均〈0．05）。结论：HIF-1α在肾小管上皮细胞内高表达可能参与了肾间质纤维化发生和发展的过程。     

六味地黄汤对大鼠单侧输尿管结扎后肾小管间质ColIV及TIMP-1表达的影响

目的观察六味地黄汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型中胶原IV(ColIV)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响。方法将输尿管梗阻大鼠随机分为模型组,依那普利组,六味地黄汤组,假手术组,14d后采用免疫组织化学检测ColIV和TIMP-1的表达水平。结果与假手术组比较,其余3组ColIV和TIMP-1表达均明显高于假手术组(P<0.01),六味地黄汤组ColIV和TIMP-1表达明显低于模型组(P<0.01),高于依那普利组(P<0.05)。结论六味地黄汤可下调TIMP-1和ColIV的表达,减缓UUO大鼠肾小管间质损害,可作为梗阻性肾病辅助用药。     

金匮肾气汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾纤维化缺氧的影响及作用机制

目的探讨金匮肾气汤对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化缺氧的影响及作用机制。方法雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组、模型组、金匮肾气汤组、依那普利组,每组6只,采用左侧输尿管结扎术造模,UUO术后第1天开始灌胃,金匮肾气汤1.8 g/kg,依那普利10 mg/kg,每日1次。第21天处死大鼠,取梗阻肾组织,HE和Masson染色观察肾组织病理改变,免疫荧光检测Tomato Lectin、Hypoxyprobe-1和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肾组织的表达, Western Blot检测转化生长因子-β1 (TGF-β1)、骨形态发生蛋白(BMP-7)和HIF-1α在肾组织的表达。结果与模型组比较,金匮肾气汤治疗后,HE和Masson染色结果提示梗阻肾肾盂扩张减轻、肾实质变厚,间质胶原阳性面积减少,Western Blot检测梗阻肾组织中TGF-β1蛋白表达下调、BMP-7蛋白表达上调(P0.05);免疫荧光检测显示梗阻肾组织中血管密度增加、缺氧改善,HIF-1α表达下调(P0.05)。结论金匮肾气汤可以减轻UUO大鼠梗阻肾组织纤维化,其作用机制可能与其改善肾间质缺氧有关。     

依那普利对大鼠肾间质纤维化中TGF-β1,p-Smad2/3及Smad7的作用

目的:观察依那普利对肾间质纤维化大鼠肾组织中TGF-β1,p-Smad2/3及Smad7的影响,探讨依那普利抗肾间质纤维化的作用机制.方法:将30只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和依那普利治疗组.对治疗组和模型组大鼠行左侧输尿管结扎术建立单侧输尿管梗阻的动物模型.术后14 d处死大鼠,留取梗阻侧肾组织行HE和Masson染色以观察各组大鼠肾组织病理改变,用免疫组织化学方法检测Col Ⅰ,TGF-β1,P-Smad2/3和Smad7的蛋白水平表达,用RT-PCR方法检测TGF-β1,和Smad7mRNA水平表达.结果:模型组肾间质损伤指数、胶原相对面积及间质内Col Ⅰ表达均较假手术组增高(P<0.01),依那普利治疗后好转.假手术组肾组织TGF-β1蛋白及mRNA表达、p-Smad2/3蛋白表达较低,模型组表达明显增强(P<0.01),依那普利治疗后明显减弱(P<0.01).假手术组肾组织可见较多的Smad7蛋白及mRNA表达,模型组肾组织Smad7表达明显减弱(P<0.01),依那普利治疗后Smad7表达较模型组增强(P<0.01).结论:依那普利可以通过影响单侧输尿管梗阻大鼠肾组织中TGF-β/Smads信号通路中的TGF-β1,p-Smad2/3和Smad7而起到抑制纤维化的作用.     

六味地黄汤含药血清对HK-2细胞PHD2/HIF-1α信号途径的影响

目的以缺氧诱导的HK-2细胞为研究对象,探讨脯氨酸羟化酶2/缺氧诱导因子1α(PHD2/HIF-1α)信号途径对肾间质纤维化的影响,以及六味地黄汤含药血清干预作用。方法 40只SPF级雄性SD大鼠分为空白组和给药组,每组20只,空白组以10 m L/(kg·d)生理盐水,给药组以67.5 g/(kg·d)六味地黄汤灌胃连续1周,腹主动脉取血,离心后分离血清。体外培养HK-2细胞,将实验分为空白对照组(10%胎牛血清)、正常血清组(10%正常大鼠血清)、氯化钴(Co Cl2)处理组(150μmol/LCo Cl2+10%正常大鼠血清)和含药血清组(150μmol/LCo Cl2+10%六味地黄汤含药血清)。体外培养HK-2,分组处理24 h后,用Western Blot法和RT-PCR法分别检测六味地黄汤含药血清对缺氧诱导的HK-2细胞中PHD2、HIF-1α、结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白水平和mRNA表达的影响。结果与正常血清组比较,Co Cl2处理组HK-2细胞中PHD2的蛋白水平和mRNA表达均降低(P0.05),而HIF-1α、CTGF的蛋白水平和mRNA表达均升高(P0.05);与Co Cl2处理组比较,含药血清组HK-2细胞中PHD2的蛋白水平和mRNA表达均升高(P0.05),而HIF-1α、CTGF的蛋白水平和mRNA表达均降低(P0.05)。结论 PHD2/HIF-1α信号途径参与肾间质纤维化,六味地黄汤可能通过上调PHD2的表达,促进HIF-1α的降解,后者下调CTGF的表达,从而抑制肾间质纤维化。     

川芎嗪、苯那普利对5/6肾切除大鼠肾小管间质低氧及微血管生成的作用

目的研究川芎嗪及苯那普利对慢性肾衰大鼠肾脏肾小管间质低氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法建立5／6肾大部切除模型，随机分为A：川芎嗪治疗组[150mg／（kg&#183;d）]，B2苯那普利治疗组E10mg／（kg&#183;d）]，C2模型对照组，D2假手术组。在造模成功后第1、4、8、16周分别杀检，留取血、尿及肾组织标本送检。检测①24h尿蛋白定量；②血肌酐（Scr）及尿素氮（BUN）水平；③免疫组化法检测肾组织HIF-1α、VEGF及CD34表达，计数肾小管间质微血管密度（MVD），④RT-PCR法及Westernblot法分别检测肾组织HIF-1α、VEGF的mRNA及蛋白质表达。结果①川芎嗪及苯那普利均可明显降低尿蛋白排泄量，但用药组尿蛋白排泄仍高于假手术组。②川芎嗪及苯那普利组BUN及Scr低于模型对照组。③从第1周起，苯那普利组HIF-1αmRNA及VEGFmRNA表达即高于其他3组；川芎嗪组HIF-1αmRNA表达略低于模型对照组，但是其VEGFmRNA的表达却高于模型对照组。④川芎嗪及苯那普利组第8周起MVD值大于模型对照组，但低于假手术组。结论苯那普利可通过上调5／6肾切除大鼠肾组织HIF-1α的表达，刺激小管间质VEGF的表达。从而促进小管间质微血管的保留来保护肾脏。HIF-1α-VEGF-血管内皮细胞途径在川芎嗪对慢性肾衰的早期治疗中可能起作用，在后期可能还有其他机制的参与。     

糖毒清对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1mRNA及PAI-1表达的影响

目的通过检测正常及以不同药物治疗的各组糖尿病肾病肾功能不全(DRI)大鼠肾组织转化生长因子-β,mRNA(TGF-β1mRNA)和纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)的表达情况,探讨糖毒清治疗DRI的可能机制。方法采用5/6肾切除合中等剂量的STZ腹腔注射方法建立DRI大鼠模型,将造模成功的50只大鼠随机分为五组:模型组(生理盐水2ml/d灌胃);糖毒清高剂量组(糖毒清6.75g/(kg·d)灌胃);糖毒清中剂量组(糖毒清4.5g/(kg·d)灌胃);糖毒清低剂量组(糖毒清2.25g/(kg·d)灌胃);尿毒清组(尿毒清2.25g/(kg·d)灌胃)。另外10只正常对照组大鼠予生理盐水2ml/d灌胃;治疗10周后,通过原位杂交和免疫组化的方法检测各组大鼠肾组织TGF-β1mRNA和PAI-1的表达情况。结果模型组大鼠肾组织TGF-β1mRNA和PAI-1呈高表达,而糖毒清各治疗组的表达明显减少。结论糖毒清可以减少DRI大鼠肾组织TGF-β1mRNA和PAI-1的过度表达,从而达到控制或延缓糖尿病肾病肾功能恶化的作用。     

自发性高血压大鼠Klotho与MMP-9,TIMP-1和PAI-1基因的表达及福辛普利和缬沙坦对其的干预作用（英文）

目的：观察自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHR）肾脏组织中Klotho、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inhibitor of metallo-proteinase-1,TIMP-1）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor,PAI-1）基因的表达状况,探讨其在高血压肾间质纤维化中的作用及福辛普利和缬沙坦的肾保护作用机制。方法：22周龄雄性SHR20只随机分为4组（每组5只）：高血压组（SHR组）、fosinopril组[Fos组,10mg/（kg.d）灌胃],Valsartan组[Val组,50mg/（kg·d）灌胃]和fosinopril＋valsartan组[Fos＋Val组,fosinopril10mg/（kg·d）＋valsartan50mg/（kg·d）灌胃]。22周龄雄性Wistar Kyoto大鼠（WKY组）5只作为对照组。用药物干预连续喂养8周,分别用RT-PCR和Western印迹检测肾脏组织中Klotho,MMP-9,TIMP-1和PAI-1mRNA和蛋白的表达水平。结果：SHR组肾脏组织Klotho mRNA和蛋白表达较WKY组明显下调（P〈0.01）,而MMP-9,TIMP-1和PAI-1mRNA和蛋白的表达较WKY组均明显上调（P〈0.01）;用fosinopril和/或valsar-tan干预后,可上调Klotho mRNA在Fos,Fos＋Val组（P〈0.01）和Val组（P〈0.05）的表达,上调Klotho蛋白在Val,Fos＋Val组（P〈0.01）和Fos组（P〈0.05）的表达。同时下调MMP-9,TIMP-1,PAI-1mRNA和蛋白在Fos,Val,Fos＋Val组的表达（P〈0.01）。相关分析表明：Klotho mRNA和蛋白的表达与MMP-9,TIMP-1,PAI-1mRNA（r值分别为-0.864,-0.725和-0.785,P〈0.01）和蛋白（r值分别为-0.614,-0.579和-0.552,P〈0.05）的表达均呈负相关。结论：高血压肾损害与抗衰老基因Klotho和基质降解相关基因MMP-9,TIMP-1,PAI-1关系密切;Klotho基因与MMP-9,TIMP-1和PAI-1基因的表达呈负相关。上调抗衰老基因Klotho表达的药物fosinopril和/或valsartan可改善Klotho-MMPs/TIMPs-PAI-1的表达,这可能是其抗肾纤维化的重要机制。     

腺嘌呤诱导慢性肾病大鼠模型中HIF-1α、RhoA、SOX9的表达及意义

目的 观察腺嘌呤诱导大鼠慢性肾病模型中HIF-1α、RhoA和SOX9的表达及其与肾间质纤维化的关系.方法 将20只大鼠随机分为对照组(Con组)和模型组(腺嘌呤诱导的CKD大鼠模型).分别于第3、6周处死大鼠.观察肾形态改变;分别检测大鼠肾功及24 h尿蛋白水平;HE染色观察肾病理变化;天狼星红染色观察肾小管间质纤维...     

氯化钴干预条件下糖尿病大鼠肾组织HIF-1α的表达及意义

目的研究氯化钴（CoCl2）干预条件下糖尿病（diabetes mellitus,DM）大鼠肾组织缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）的表达及意义。方法按数字随机化原则取8只为正常对照组（CTL组）,16只为模型组,建立糖尿病肾病大鼠模型,并随机均分为糖尿病组（DM组）和CoCl2治疗组（CoCl2组）。检测相关生化指标,免疫组化学检测实验大鼠HIF-1α表达和分布,蛋白免疫印迹法（Western Blotting）检测肾脏组织HIF-1α蛋白表达。结果CTL组肾脏组织无HIF-1α表达,DM组HIF-1α主要分布于肾小管上皮细胞的胞浆和胞核;CoCl2组HIF-1α平均光密度显著高于DM组（P〈0.05）,其HIF-1α蛋白表达水平较DM组显著增加（P〈0.05）。结论缺氧参与糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）早期肾小管间质损伤,化学性低氧模拟剂CoCl2可通过上调HIF-α减轻蛋白尿和肾小管间质损伤,延缓DKD进展。