miRNA-221在EMS组织及间质细胞中的表达及对细胞增殖的影响

目的 探讨microRNA-221（miRNA）在子宫内膜异位症（endometriosis,EMS）患者组织及细胞中的表达及对EMS间质细胞增殖的影响。 方法 收集非EMS患者在位内膜（正常子宫内膜）及EMS患者卵巢异位内膜,分离培养及鉴定子宫内膜间质细胞,采用茎环法实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测在位、异位内膜组织及间质细胞中miRNA-221的表达;雌激素（17β-E₂,终浓度为10-8mol/L）刺激间质细胞48 h后检测miR-221-3p表达变化;异位间质细胞转染miR-221-3p inhibitor和inhibitor阴性对照（NC）后,观察其对miR-221-3p、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因（PTEN）表达和增殖的影响。 结果 miR-221-3p在EMS组织中的表达为正常子宫内膜组织的4.2倍（P=0.039）,在EMS间质细胞中的表达为正常子宫内膜间质细胞的2.66倍（P=0.029）。与正常子宫内膜组织及间质细胞相比,miR-221-5p在EMS组织及间质细胞中表达差异均无统计学意义（P>0.05）。雌激素处理正常及异位间质细胞48 h后miR-221-3p表达差异无统计学意义。抑制miR-221-3p功能后,异位间质细胞增殖抑制（P=0.018）,PTEN基因表达上调（P=0.021）。 结论 miRNA-221在EMS组织及间质细胞中表达上调,抑制miR-221-3p功能可促进PTEN表达从而抑制EMS间质细胞增殖。     

沉默miR-6771-3p通过靶向AXIN2/Wnt信号通路调控异位子宫内膜间质细胞增殖和迁移实验研究

目的:探讨微小RNA(miRNA)miR-6771-3p在子宫内膜异位组织中的表达及其通过靶向调控AXIN2对异位子宫内膜间质细胞增殖和迁移的影响。方法:收集因子宫内膜异位症行手术治疗的患者子宫在位内膜组织和异位内膜组织34例，采用实时聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测组织中miR-6771-3p的表达水平。将异位子宫内膜间质细胞分为沉默组(转染靶向沉默miR-6771-3p的短发夹RNA载体)和空载体组(转染对照载体)。噻唑蓝(MTT)法分析转染后各组异位子宫内膜间质细胞的增殖能力，细胞划痕愈合实验分析转染后各组异位子宫内膜间质细胞的迁移能力，生物信息学技术和双荧光素酶报告基因实验验证miR-6771-3p和轴抑制蛋白2(AXIN2)的靶向关系，RT-qPCR检测转染后各组细胞AXIN2 mRNA表达水平。Western blot检测转染后各组细胞AXIN2蛋白和Wnt信号通路蛋白的表达水平。结果:子宫异位内膜组织中miR-6771-3p表达显著高于子宫在位内膜组织(P<0.01)。与空载体组异位子宫内膜间质细胞比较，沉默组异位子宫内膜间质细胞增殖能力显著降低(P<0....     

miR-200c-3p靶向CCNE2抑制肾母细胞瘤细胞增殖

目的 预测和验证miR-200c-3p的靶基因并探讨其对肾母细胞瘤增殖的抑制作用。方法 应用生物信息学软件对miR-200c-3p在肾母细胞瘤中的靶基因进行预测,建立SK-NEP-1及G401的miR-200c-3p过表达及抑制表达的稳定细胞系。实验设未转染组（Blank）、模拟物阴性对照组（mimic NC）、miR-200c-3p模拟物组（miR-200c-3p mimic）、抑制剂阴性对照组（inhibitor NC）及miR-200c-3p抑制剂组（miR-200c-3p inhibitor）。采用 RT-PCR及Western blot方法检测CCNE2在SK-NEP-1及G401不同组中的表达水平,荧光素酶报告基因检测miR-200c-3p 和CCNE2的靶向关系,细胞计数盒（CCK-8）和软琼脂克隆形成实验检测miR-200c-3p对SK-NEP-1及G401细胞增殖的抑制作用。结果 生物信息学方法预测CCNE2为miR-200c-3p的靶基因之一。RT-PCR实验结果示肾母细胞瘤细胞中miR-200c-3p模拟物组的CCNE2的表达水平低于模拟物阴性对照组（P<0.05）;荧光素酶报告基因检测证实CCNE2是miR-200c-3p的靶基因（P<0.01）。Western blot示在肾母细胞瘤细胞中miR-200c-3p模拟物组的CCNE2蛋白的表达水平低于模拟物阴性对照组（P<0.05）;CCK-8和软琼脂克隆形成实验证实miR-200c-3p对肾母细胞瘤细胞的增殖能力有明显抑制作用（P<0.01）;而miR-200c-3p抑制剂组结果相反。结论 miR-200c-3p通过靶基因 CCNE2抑制肾母细胞瘤细胞的增殖。     

ZEB1在卵巢子宫内膜异位症中的表达及功能研究

目的 研究E盒增强子结合蛋白1(ZEB1)在卵巢子宫内膜异位症(ovarian endometriosis, OEMs)中的表达情况,初步探索ZEB1在子宫内膜异位症发生、发展中的作用。方法 收集30例OEMs患者的卵巢囊壁组织及30例同期行手术治疗的其他妇科良性疾病患者的正常子宫内膜,分别采用实时定量PCR(qRT-PCR)及免疫组化检测ZEB1mRNA及蛋白表达水平;分别向正常子宫内膜间质细胞转染空白质粒pCI-neo(空白质粒组)及重组质粒pCI-neo-ZEB1(重组质粒组),通过CCK-8比色法测定内膜间质细胞体外增殖能力, Transwell实验检测间质细胞迁移、侵袭能力。结果 ZEB1在OEMs的异位内膜间质细胞及腺体胞核中的表达较正常子宫内膜明显升高,且分泌期的表达高于增生期,差异有统计学意义(P<0.05)。应用CCK-8法及Transwell分别检测细胞增殖及侵袭能力,发现转染ZEB1表达载体后,间质细胞的增殖、侵袭能力明显增强。结论 ZEB1表达上调促进异位内膜细胞的增殖能力,并增强了间质细胞的迁移、侵袭能力。     

自噬基因 LC3在卵巢子宫内膜异位症中的表达及意义

目的：研究自噬基因LC3在卵巢子宫内膜异位症患者中的表达情况,探讨其与卵巢子宫内膜异位症发生、发展的相关性及意义。方法用Real-time PCR方法,对正常子宫内膜组织以及卵巢子宫内膜异位症患者的在位内膜组织、异位内膜组织进行LC3 mRNA定量分析,探讨其与临床分期的关系。结果 LC3 mRNA在卵巢子宫内膜异位症患者在位内膜组、异位内膜组和正常子宫内膜组中的表达存在显著差异（ P＜0.05）。异位内膜组表达显著低于正常内膜组,异位内膜组与在位内膜组相比表达明显下调（ P＜0.05） ,在位内膜组和正常内膜组间比较无明显差异（ P＞0.05）。 LC3 mRNA 在卵巢子宫内膜异位症不同临床分期中,异位内膜组Ⅲ～Ⅳ期LC3 mRNA表达显著低于Ⅰ～Ⅱ期（ P＜0.05）。在月经周期不同时相,正常内膜组增殖期的LC3 mRNA表达明显高于分泌期（ P＜0.05） ,卵巢子宫内膜异位症在位内膜组、异位内膜组增殖期与分泌期比较,差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论自噬参与了卵巢子宫内膜异位症的发病,自噬活性的改变可能与子宫内膜异位症的发展及病损程度相关。     

miR-15b通过靶向LPAR3抑制子宫内膜癌细胞PI3K/AKT信号通路活化

【摘要】 目的 探讨miR-15b靶向溶血磷脂酸受体3（LPAR3）调控PI3K/AKT信号通路对子宫内膜癌细胞（HEC-1B）增殖的影响。方法 生物信息学分析预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-15b与LPAR3之间的靶向结合作用;将HEC-1B细胞分为NC组、miR-15b mimic组、miR-15b inhibitor组、siRNA-LPAR3组和miR-15b inhibitor+ siRNA-LPAR3组,实时荧光定量PCR和Western blot检测miR 15b、LPAR3和PI3K/AKT信号通路相关因子磷脂酰肌醇 3 激酶（PI3K）、苏氨酸激酶（AKT）在HEC 1B和人子宫内膜上皮细胞（HEEC）中的表达水平;噻唑蓝（MTT）法检测HEC-1B的细胞活力;流式细胞术检测HEC-1B的细胞周期分布;Transwell测定法检测HEC-1B的细胞迁移和侵袭能力。结果 LPAR3为miR-15b的靶基因;与HEEC组相比,HEC-1B组中LPAR3、PI3K和AKT mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）,而miR-15b表达显著降低（P＜0.05）;与NC组相比,siRNA-LPAR3组细胞PI3K/AKT信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）,miR-15b mimic组细胞LPAR3和PI3K/AKT信号通路相关因子mRNA和蛋白表达水平明显降低（P＜0.05）;与NC组相比,siRNA-LPAR3组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力均明显降低（P＜0.05）,miR-15b mimic组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力均明显降低（P＜0.05）,抑制miR-15b的表达后,上述现象被逆转(P＜0.05)。与miR-15b inhibitor组相比,miR-15b inhibitor+ siRNA-LPAR3组HEC-1B的细胞活力、S期细胞比例、迁移和侵袭能力均显著下降（P＜0.05）。结论 miR-15b可能通过靶向LPAR3抑制HEC-1B的PI3K/AKT信号通路活化,从而抑制HEC-1B细胞的增殖。     

microRNA-22-3p低表达上调幼年哮喘气道重塑大鼠的NK1R表达

【摘要】 目的 探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p（miR-22-3p）表达水平和神经激肽受体1（NK1R）表达水平的相关性。 方法 将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor NC组。对照组注射生理盐水并吸入空气;模型组应用卵白蛋白(OVA)雾化吸入法建立哮喘大鼠模型;模型+mimic组、模型+mimic NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor NC组,在大鼠每次激发前1 h内分别尾静脉注射1 mL的mimic、mimic NC、inhibitor、inhibitor NC。H&E染色法观察小鼠气道重塑变化,RT-qPCR检测miR-22-3p的水平变化。荧光素酶基因报告检测方法在大鼠气道平滑肌细胞RASMCs中验证miR-22-3p靶向NK1R。使用Western blot 和免疫组织化学法检测NK1R的表达水平。结果 与对照组比较,模型组发生明显的气道重塑现象,且气道组织中miR-22-3p水平降低（P＜0.05）。在RASMCs细胞中,NK1R的3′UTR和miR-22-3p的直接结合,导致荧光素酶活性强度降低（P＜0.05）。与对照组相比,模型组的NK1R的mRNA和蛋白的表达水平明显上调（P＜0.01）。与模型+mimic NC组比较,模型+mimic组 miR-22-3p的水平上调,而NK1R的表达下调（均P＜0.05）。与模型+inhibitor NC组比较,模型+ inhibitor组miR-22-3p的水平下调,而NK1R水平上调（均P＜0.05）。结论 哮喘诱发大鼠气道NK1R的表达增加,miR-22-3p直接靶向调节抑制哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平,下调miR-22-3p解除对NK1R的抑制从而上调NK1R水平。     

抑制miR-93-5p表达对人卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨miR-93-5p对人卵巢癌细胞增殖和迁移的影响,并初步探究其作用机制。方法qRT-PCR检测人正常卵巢上皮细胞（IOSE80）与卵巢癌细胞（SKOV3、A2780、ES2）中miR-93-5p的相对表达量;将SKOV3细胞分成抑制物组（inhibitor组）和阴性对照组（NC组）;MTT法检测inhibitor组和NC组细胞的相对存活率;细胞划痕实验检测inhibitor组和NC组细胞的相对迁移率;Westernblot法检测inhibitor组和NC组细胞中RBM24蛋白的相对表达量;生物信息学方法对miR-93-5p进行靶基因预测,并通过荧光素酶报告基因检测验证。结果miR-93-5p在卵巢癌细胞SKOV3、A2780、ES2中的表达水平均明显高于正常卵巢上皮细胞IOSE80（均P＜0.05）。Inhibitor组细胞在48和72h的相对存活率较NC组均显著降低（均P＜0.05）。Inhibitor组细胞在12h时的相对迁移率为（40.67±4.21）%,在24h时的相对迁移率为（33.76±3.42）%,与NC组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）。与NC组比较,inhibitor组细胞中RBM24蛋白相对表达量明显升高（P＜0.05）。荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组（miR-NC组）比较,过表达组（miR-93-5pmimics组）中RBM24-MUT表达差异无统计学意义（P＞0.05）,而RBM24-WT表达则显著下调（P＜0.05）。结论miR-93-5p在卵巢癌细胞中呈现高表达,可以通过靶向调控RBM24的表达量进而促进卵巢癌细胞的增殖和迁移。     

lncRNA SNHG14通过miR-181c-5p/SOX6信号轴调控缺血性脑卒中神经元细胞凋亡

目的 通过IS体外模型探究lncRNA SNHG14在神经元细胞凋亡中的作用机制。方法 通过氧葡萄糖剥夺（OGD）诱导的神经元细胞损伤来模拟IS。实时荧光定量聚合酶链反应检测SNHG14、miR-181c-5p、SOX6基因表达,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Caspase-3检测试剂盒测定Caspase-3活性,RNA免疫沉淀实验和萤光素酶报告分析实验验证miR-181c-5p与SNHG14、SOX6的相互作用。结果sh-SNHG14组SNHG14 mRNA相对表达量低于sh-NC组（P <0.05）,OGD+sh-SNHG14组SNHG14 mRNA相对表达量低于OGD+sh-NC组低（P <0.05）。OGD+sh-SNHG14组细胞活性率较OGD+sh-NC组高（P <0.05）。OGD+sh-SNHG14组细胞凋亡率、Caspase-3相对表达量较OGD+sh-NC组低（P <0.05）。miR-NC组miR-181c-5p相对表达量较miR-181c-5p mimics组低（P <0.05）,inhibitor NC组较mi...     

miR-454-3p对鼻咽癌CNE-2细胞上皮-间质转化的调控机制

目的探讨miR-454-3p对鼻咽癌CNE-2细胞上皮-间质转化（EMT）的调控机制。方法收集2017年1月至2018年12月柳州市中医医院就诊的95例鼻咽癌患者的血清和鼻咽癌组织标本及健康体检者30例的血清,采用RT-qPCR检测miR-454-3p和E-盒结合锌指蛋白2（ZEB2）血清水平和mRNA的表达,对鼻咽癌组织中miR-454-3p和ZEB2mRNA的表达进行相关性分析。将CNE-2细胞随机分为Control组、miR-454-3pmimic组、Mimic-NC组、miR-454-3pmimic+ZEB2plasmid组和miR-454-3pmimic+vector组,采用Transwell实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Westernblot检测ZEB2、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达。双荧光素酶实验验证miR-454-3p与ZEB2的靶向关系。结果鼻咽癌患者血清miR-454-3p水平低于健康体检者,差异有统计学意义（P＜0.05）。鼻咽癌Ⅲ、Ⅳ期患者鼻咽癌组织miR-454-3p相对表达水平低于Ⅰ、Ⅱ期患者,ZEB2mRNA相对表达水平则升高,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。miR-454-3p与ZEB2mRNA的表达呈负相关（r=-0.734,P＜0.01）;与Mimic-NC组比较,miR-454-3pmimic组ZEB2、N-cadherin、Vimentin表达水平均降低,E-cadherin表达水平升高,侵袭细胞数及迁移率均降低,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,过表达ZEB2可逆转miR-454-3pmimie对EMT的抑制作用。双荧光素酶实验显示miR-454-3p可靶向ZEB23''UTR。结论miR-454-3p在鼻咽癌患者血清及癌组织中呈低表达,可通过靶向调控ZEB2的表达水平进而抑制鼻咽癌细胞EMT。     

CCN5在子宫内膜异位症患者组织的表达及其作用机制

目的 分析CCN5在卵巢子宫内膜异位囊肿组织中的表达情况,探究其对子宫内膜基质细胞（HESCs）增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 收集并比较卵巢子宫内膜异位症患者组织与正常对照组在位子宫内膜组织中CCN5的表达水平;利用重组腺病毒Ad-CCN5构建过表达CCN5的人子宫内膜基质细胞;采用si-RNA构建敲低CCN5的人子宫内膜基质细胞。利用CCK-8实验检测不同表达水平CCN5对HESCs细胞增殖能力的影响;划痕实验、Transwell小室侵袭实验检测不同表达水平CCN5对HESCs细胞迁移与侵袭能力的影响;Western blot检测不同处理组 HESCs中上皮-间充质转化（EMT）标记物 E-cadherin、N-cadherin,snail-1和vimentin的表达水平。结果 卵巢子宫内膜异位组织中CCN5的表达水平较正常对照组在位子宫内膜显著降低（P<0.01）;过表达CCN5可以抑制HESCs的增殖、迁徙及侵袭能力;EMT标记物E-cadherin表达升高,N-cadherin、Snail-1 和Vimentin表达降低,EMT受到显著抑制（P<0.01）。而敲低CCN5的表达可以显著增强HESCs的增殖、迁移及侵袭（P<0.01）,降低E-cadherin表达,升高N-cadherin、Snail-1和Vimentin表达,促进HESCs发生EMT转化。结论 CCN5在卵巢子宫内膜异位组织中的表达水平显著降低,可能通过调控HESCs的增殖、迁移与侵袭能力及影响EMT,在卵巢子宫内膜异位症的发生发展中发挥重要作用。     

miR-200C-3p靶向调控ZEB2抑制前列腺癌细胞增殖和迁移的实验研究

  目的  前列腺癌的进展与多种因素有关,本研究旨在探索miR-200C-3p对前列腺癌细胞系的影响,并分析miR-200C-3p与ZEB2的潜在机制。  方法  通过qRT-PCR检测miR-200C-3p在前列腺癌细胞系PC-3、DU145、前列腺上皮细胞RWPE-1的表达量。DU145转染miR-200C-3p后,通过CCK-8、划痕修复实验以及Transwell实验探究增殖与迁移能力。沉默ZEB2后分析DU145增殖和迁移能力的变化,采用双荧光素酶报告法蛋白免疫印迹实验测定miR-200C-3p与E盒结合锌指蛋白2(zinc finger E-box binding homeobox 2,ZEB2)的潜在关系。  结果  qRT-PCR结果显示RWPE-1中miR-200C-3p表达量是DU145的2.5倍左右。DU145转染miR-200C-3p mimics后CCK-8实验组的增殖能力明显弱于对照组,划痕修复实验实验组[(20.33±1.45)%]与对照组[(46.67±2.40)%]相比愈合能力明显减弱(P < 0.001),Transwell实验结果表明实验组(114.30±5.21)与对照组(212.00±6.49)相比迁移能力显著下降(P < 0.001)。沉默ZEB2可抑制DU145细胞的增殖和迁移能力(P < 0.05),双荧光素酶报告和蛋白免疫印迹实验证实miR-200C-3p在DU145中过表达降低了ZEB2的蛋白表达(P < 0.05)。  结论  miR-200C-3p通过介导ZEB2抑制DU145的增殖和迁移。      

VEGF、MMP-7在子宫内膜异位症中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、基质金属蛋白酶-7（mauixmet-alloproteinases-7,MMP-7）在在正常人及子宫内膜异位症（endometriosis,EMT）患者内膜组织中的表达,探讨VEGF、MMP-7在EMT发生发展中的作用。方法通过免疫组化S-P法分别检测MMP-7及VEGF在EMT患者在位子宫内膜及异位内膜和正常子宫内膜中的表达。结果异位内膜MMP-7表达与在位内膜无差异,但高于正常内膜（P〈0.05）,在位内膜与正常子宫内膜相比,差异有显著性（P〈0.05）;卵巢异位内膜VEGF表达与同期在位内膜相比,表达增高,差异有显著性（P〈0.05）,且明显高于正常内膜（P〈0.005）;在位内膜与正常子宫内膜相比,VEGF表达差异无显著性（P〉0.05）。结论 EMT在位内膜、异位内膜中VEGF及MMP-7与异位内膜的高侵袭性和高血管新生能力有关,在EMs的发生发展中起重要作用。     

miR-let-7c-5p通过靶向HMGA2抑制膀胱癌细胞侵袭和迁移

目的 探讨miR-let-7c-5p能否调控HMGA2抑制膀胱癌细胞侵袭和迁移。方法 生物信息学方法确定miR-let-7c-5p的关键基因;RT-qPCR和Western blot检测膀胱癌和癌旁组织中miR-let-7c-5p mRNA和HMGA2 蛋白相对表达量。以人正常膀胱细胞SV-HUC-1作为对照,RT-qPCR和Western blot检测膀胱癌细胞系T24,UM-UC-3,5637细胞中miR-let-7c-5p mRNA和HMGA2蛋白的相对表达量。对UM-UC-3细胞中miR-let-7c-5p分别进行上调和下调,上调实验设模拟物阴性对照组（mimic-NC）、miR-let-7c-5p模拟物组（mimicmiR-let-7c-5p）、下调实验设阴性对照组（inhibitor NC）及miR-let-7c-5p抑制剂组（si-miR-let-7c-5p）,双荧光素酶实验、RT-qPCR和Western blot法共同验证miR-let-7c-5p和HMGA2的靶向关系;Transwell小室检测单独上调或下调miR-let-7c-5p表达及同时下调miR-let-7c-5p和HMGA2表达UM-UC-3细胞侵袭和迁移的变化;Western blot检测上皮间质转化（EMT）相关蛋白（E-cadherin, N-cadherin, vimentin, Snail）相对表达量。结果 HMGA2为miR-let-7c-5p的靶基因之一;与癌旁组织相比,膀胱癌组织中miR-let-7c-5pmRNA相对表达量降低（P<0.05）,HMGA2蛋白相对表达量增加（P< 0.05）;与SV-HUC-1细胞相比,UM-UC-3细胞中miR-let-7c-5p相对表达量显著降低,HMGA2显著增加（P=0.01）。上调miR-let-7c-5p表达,UM-UC-3细胞侵袭和迁移能力均显著下降（P<0.05）;下调miR-let-7c-5p表达,UM-UC-3细胞侵袭和迁移能力均显著增加（P<0.05）;当同时下调miR-let-7c-5p和HMGA2表达UM-UC-3细胞侵袭和迁移能力显著下降（P<0.05）。Western blot结果显示,上调miR-let-7c-5p表达,E-cadherin表达增加,N-cadherin,vimentin,Snail蛋白表达下降;下调miR-let-7c-5p表达,E-cadherin表达下降,N-cadherin,vimentin,Snail蛋白表达增加;同时下调miR-let-7c-5p和HMGA2表达能够抑制UM-UC-3细胞EMT（P<0.05）。结论 miR-let-7c-5p通过靶向HMGA2抑制EMT进而抑制UM-UC-3细胞侵袭和迁移。     

环氧合酶-2在子宫内膜异位症子宫内膜组织中的表达

目的：研究环氧合酶-2（COX-2）在子宫内膜异位症（内异症）在位子宫内膜组织和异位子宫内膜组织中的表达及意义。方法：采用免疫组织化学方法检测30例卵巢内异症在位内膜、10例卵巢巧克力囊肿壁异位内膜及27例正常子宫内膜中COX-2的分布和表达。结果：COX-2在3组子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞中均可见表达。COX-2在正常对照组内膜和卵巢内异症组在位内膜腺上皮细胞中的表达均是分泌期高于增生期（P<0.05)，而在间质细胞中的表达分泌期与增生期比较无统计学差异（P>0.05)。COX-2在卵巢内异症组在位和异位内膜中的表达均高于对照组（P<0.05），而内异症患者在位和异位内膜中COX-2的表达则无统计学意义（P>0.05）。结论：COX-2在卵巢内异症在位和异位内膜中表达增高，可能与卵巢内异症的病理异常有关。     

血管内皮生长因子在子宫内膜异位症和子宫腺肌病中的表达

目的 探讨子宫内膜异位症(EMT)和子宫腺肌病(AMS)患者异位及在位子宫内膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其在血管生成调控机制中的作用.方法 采用免疫组织化学SABC方法检测16例异位内膜组织、10例腺肌瘤组织、20例在位内膜组织中VEGF的表达,并和20例正常子宫内膜组织作对照.结果 VEGF在异位内膜组织(EMT,E)中阳性表达率为93.75%(15/16),强阳性表达8例;在腺肌瘤组织(AMS,A)中阳性表达率为80.00%(8/10),强阳性表达4例;于在位内膜组织(eutopic,e)中阳性表达率为55.00%(11/20),强阳性表达3例;对照组子宫内膜组织(control,C)中阳性表达率为20.00%(4/20),无强阳性表达.E A与e阳性表达比较差异有极显著性意义(P＜0.01);E A与C阳性表达比较差异有极显著性意义(P＜0.01);e与C阳性表达比较差异有显著性意义(P＜0.05).E A与e强阳性表达比较差异有显著性意义(P＜0.05);E A与C强阳性表达比较差异有极显著性意义(P＜0.01).结论 EMT、AMS异位及在位内膜组织高表达VEGF可能与EMT和AMS发生密切相关.     

ezrin和细胞骨架在子宫内膜异位症中的表达与定位

目的 通过检测子宫内膜异位症中的ezrin、微丝及微管的表达及定位,探讨子宫内膜异位症中ezrin与细胞骨架的改变及关系。 方法 利用免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜检测13例非子宫内膜异位症中正常子宫内膜、11例子宫内膜异位症中在位及异位内膜组织中ezrin、微丝及微管的表达及定位;用荧光强度代表表达强度,通过对荧光强度的半定量测定,比较各组间ezrin、微丝及微管的表达。其中,荧光强度分析采用SPSS 11.5 for windows软件进行统计分析,配对的2组之间的均数分析采用t检验。 结果 ezrin在异位子宫内膜间质内呈弥散分布,失去正常细胞极性,ezrin蛋白在异位子宫内膜间质中的表达(47.88±6.75)显著高于正常子宫内膜间质(8.64±1.61)及在位子宫内膜间质(7.97±0.93)的表达水平(P＜0.05);微丝在异位子宫内膜间质及腺上皮组织中表达极性均不明显,微丝在异位子宫内膜间质(71.36±4.27)中的表达显著高于在位子宫内膜间质(35.98±5.76)及正常子宫内膜间质(40.68±6.12)的表达水平(P＜0.05),而在腺上皮组织中的表达(上述3组中表达分别为21.74±2.28,37.99±6.60,41.54±2.14)则相反(P＜0.05);各组间微管表达差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 子宫内膜异位症的细胞迁徙、种植过程中伴随了细胞骨架的重构;ezrin与子宫内膜异位症的形成及细胞骨架重构有关;间质细胞在子宫内膜异位症中细胞迁徙与侵袭过程中扮演了主要角色。      

子宫内膜异位症原代细胞培养及纤维化相关蛋白检测

目的 检测在位子宫内膜组织、子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）异位病灶组织及正常人子宫内膜组织分离提纯子宫内膜间质细胞及相应间质细胞中纤维化相关蛋白表达水平及差异。方法 在严格无菌条件下,刮勺刮取新鲜子宫内膜组织,冰盒运输,采用改良EMs原代细胞培养方法分离培养。并通过细胞爬片免疫组织化学方法,对分离提纯的细胞进行鉴定。蛋白免疫印迹方法检测对比分离提纯的细胞与相应组织纤维化相关蛋白表达的差异。结果 EMs在位内膜组织间质细胞原代分离12例均成功,成功率100%（成功指标：指细胞在培养瓶中贴壁生长并稳定传代）。EMs异位组织分离培养12例成功11例,成功率为91.7%。正常人子宫内膜组织分离9例成功8例,成功率为88.9%。人子宫内膜异位症异位间质细胞（human ectopic endometrial stromal cells,HEcESCs）与人子宫内膜异位症在位间质细胞（human eutopic endometrial stromal cells,HEuESCs）及正常人在位子宫内膜间质细胞（human normal endometrial stromal cells,HEnESCs）普通光镜观察无明显差异。但免疫组织化学、蛋白免疫印迹结果表明：HEcESCs纤维化相关蛋白的表达水平明显高于HEuESCs及HEnESCs两者纤维化相关蛋白表达水平（P<0.01）,而HEuESCs与HEnESCs纤维化相关蛋白的表达差异无统计学意义（P>0.05）,各间质细胞纤维化相关蛋白的表达与其相应组织水平相一致。结论 采用改良EMs间质细胞原代培养方法,可以降低EMs子宫内膜间质细胞培养难度,并保持较高的细胞培养成功率。HEcESCs较HEuESCs及HEnESCs纤维化相关蛋白表达明显增高,即子宫内膜异位症患者,异位病灶在组织水平出现了明确的纤维化。