VEGF治疗退变性膝关节炎的动物实验研究

目的 通过观察血管内皮生长因子(VEGF)对动物膝骨关节炎(OA)软骨的影响,探讨OA的发病机制及VEGF不同给药方式对其治疗作用.方法 20只新西兰大白兔随机分为4组:正常对照组(A组),模型对照组(B组), VEGF膝关节腔注射组(C组), VEGF腹腔注射组(D组).手术建立OA模型,第8天开始D组腹腔注射VEGF 每天1次,C组关节腔每7 d注射VEGF 1次,给药12周后处死动物,切取胫骨平台关节软骨大体观察,行苏木精-伊红染色及甲苯胺蓝染色检查,检测血清、关节液及滑膜中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO).结果 A组动物模型关节软骨正常;B、D两组动物模型关节软骨缺损部分修复;C组动物模型关节软骨缺损完全修复.与B组比较,C组关节软骨形态学上明显改善,血清及关节液中SOD明显升高(F=11.43,P<0.01),NO、MDA均明显降低(F=16.23,P<0.01),而D组则未见明显改善.结论 VEGF能有效防治实验性OA;关节腔注射VEGF治疗OA的疗效明显优于腹腔注射.     

关节腔注射三氧对兔膝骨性关节炎病理改变的影响

目的通过建立兔膝骨性关节炎的模型,了解膝关节腔注射三氧对骨性关节炎软骨病理改变的影响。方法成年新西兰兔40只随机分为5组,每组8只,即正常对照组（A组）,模型对照组（B组）,20μg／ml三氧治疗组（c组）,40μg／ml三氧治疗组（D组）,60μg／ml三氧治疗组（E组）。采用Videman法对B、c、D、E组家兔进行兔膝骨关节炎模型复制。造模6周后将空气1ml注入B组家兔左膝关节腔内作为对照,将20、40、60μg／ml浓度的三氧1ml分别注入C、D、E组兔左膝关节腔内,每3d1次,治疗2次后,处死动物,观察兔膝关节软骨形态学变化及进行病理积分统计。结果B组肉眼外观及病理显示关节软骨有明显破坏,病理积分较A组明显升高（P〈0．01）,C、D两组病理改变较B组显示关节软骨有所修复,病理积分较B组降低（P〈0．05）,E组与B组比较病理改变无明显变化,病理积分的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论20、40μg／ml浓度的三氧关节腔注射可促进早期兔膝骨性关节炎关节软骨的修复,有利于减轻及阻止骨性关节炎的发展;而60μg／ml浓度三氧关节腔内注射对已损伤的软骨无修复作用。     

关节腔内注射医用臭氧对兔膝骨性关节炎的影响

目的观察膝关节腔内注射医用臭氧对兔膝骨性关节炎的影响,研究不同浓度医用臭氧对骨性关节炎的治疗效果。方法将健康家兔32只随机分为A组（空气组）、B组（25μg/ml医用臭氧组）、C组（40μg/ml医用臭氧组）、D组（80μg/ml医用臭氧组）,每组兔右膝关节均使用Hulth法复制出膝骨性关节炎（OA）模型,造模成功后,每组每周1次给予膝关节腔内注射医用臭氧,每次2ml,共4周。末次注射后3d处死实验兔,取股骨内侧髁附近软骨组织行病理学观察及Mankin评分;取关节液行NO检测;分别在造模前、造模成功时和处死前测定兔膝关节活动度。结果各组造模成功时右膝关节活动度较造模前降低,处死前B、组C组和D组右膝关节活动度较造模成功时升高,B组处死前即刻右膝关节活动度较C组和D组明显升高（P〈0.05）;各组右膝关节软骨病理检查均出现关节软骨损害改变,B组关节软骨退变程度轻,Mankin评分较左膝差异无统计学意义（P〉0.05）,C组和D组关节软骨退变明显,Mankin评分较左膝差异有统计学意义（P〈0.05）;各组右膝关节关节液中NO含量升高,B组关节液中NO含量相对于C组和D组降低程度最大。结论三种浓度的医用臭氧均能够减轻骨性关节炎的炎症反应,而40μg/ml和80μg/ml的医用臭氧会导致关节软骨组织结构破坏,臭氧浓度越高损害越重。     

反义VEGF 165基因关节腔注射抑制大鼠胶原性关节炎形成的病理观察

目的:观察反义血管内皮生长因子(VEGF)165基因体内转染对大鼠类风湿关节炎形成的影响.方法:Wistard大鼠30只,关节炎诱导2周后随机等分为3组,并分别给予相应处理:A组(关节腔注射100 μl生理盐水)、B组(关节腔注射100 μl空病毒载体)和C组(关节腔注射100 μl反义VEGF165重组腺病毒); 4周后处死大鼠,对关节炎的发病情况、病理评分、X线放射学评分结果进行对比研究.结果:给药4周后,C组大鼠的关节肿胀程度明显轻于A、B组; C组的病理评分低于A、B组;藏红花红染色显示C组关节软骨多糖破坏轻于A、B组.结论:腺病毒介导的反义VEGF基因转染可以有效地减轻胶原性关节炎的症状,减轻滑膜血管翳对关节软骨的破坏和病理改变.     

杜灵注射液治疗骨性关节炎的实验研究

目的探讨杜灵注射液治疗膝骨性关节炎(OA)的作用机理。方法40只健康成年家兔随机分为5组。每组8只,A空白组,B模型组,C对照组,D杜灵Ⅰ组,E杜灵Ⅱ组。除空白组外均采用改良Hulth法建立OA模型,模型组膝关节腔注射生理盐水0.5ml,每周1次;对照组膝关节腔注射海诺特0.5ml,每周1次;杜灵Ⅰ组膝关节腔注射杜灵注射液0.5ml,每周1次;杜灵Ⅱ组膝关节腔注射杜灵注射液0.5ml,每周2次。治疗8周后进行血清和关节滑液TNF—а含量检测,同时大体标本观察及滑膜软骨的光镜下病理变化。结果杜灵注射液能够降低骨关节炎模型动物血清和滑液TNF—а的水平,并能减轻滑膜及软骨的病理改变。结论杜灵注射液对兔早期膝骨性关节炎滑膜炎症及软骨退变有防治作用,有可能是部分通过减少血清和滑液中的TNF—а水平并抑制滑膜和软骨分泌TNF—а而实现的。     

透明质酸钠对兔骨关节炎软骨VEGF及其受体-2mRNA表达的影响

目的:观察透明质酸钠(HA)关节腔注射对创伤性骨关节炎(OA)模型关节软骨VEGF及受体-2(VEGFR-2)mRNA表达的影响。方法:24只大耳白兔随机分为A、B、C 3组,A组为正常对照组,B、C两组行单膝前交叉韧带切断术,4周后B组关节腔内注射0.3ml生理盐水药物;C组关节腔注射等量的高分子量1%透明质酸钠(HA),每周1次,连续5周。术后11周处死动物,比较各组股骨内髁关节软骨的大体变化,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和实时定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)方法检测软骨VEGF及受体-2mRNA的表达水平。结果:大体评分显示生理盐水注射组软骨退变明显重于HA注射组;VEGF及VEGFR-2mRNA的表达量较正常对照组明显升高(P<0.05),B、C两组VEGF mRNA的表达没有差别,C组VEGFR-2mRNA水平较B组显著下降(P<0.05)。结论:VEGF及VEGFR-2mRNA表达在OA软骨中表达明显升高,关节腔注射HA对软骨VEGFmRNA表达没有抑制作用,但可以通过抑制VEGFR-2mRNA表达来减轻软骨退变的程度。     

刺五加关节腔注射治疗兔膝关节骨性关节炎的病理学观察

目的：观察关节软骨和滑膜的病理改变,探讨刺五加治疗原发性膝关节骨性关节炎的疗效及其作用机制。方法：将64只新西兰白兔随机分为4组：正常组、刺五加组、透明质酸钠组、模型组。正常组既不造模也不给药,其余用内侧半月板部分切除的方法造模。刺五加组关节腔注射刺五加注射液,透明质酸钠组关节腔注射透明质酸钠注射液。术后2周开始用药干预,直到处死前1周。分6周和10周两个时相点处死动物取材,制备软骨及滑膜石蜡切片后进行HE及AB-PAS染色,分别在光镜下进行病理评分。结果：滑膜Mankins评分,在两个时相点刺五加组均比模型组低（均P〈0.05）;与6周相比,刺五加组10周时评分较高（P〈0.05）。关节软骨OARSI评分,在两个时相点,刺五加组均比模型组低（均P〈0.05）;与6周相比,刺五加组10周评分无显著差异（P〉0.05）。结论：刺五加注射液可以减缓甚至阻断实验性兔膝关节骨性关节炎的病变进展。     

关节腔注射褪黑素对大鼠骨性关节炎的影响

目的通过观察关节腔注射褪黑素治疗后骨性关节炎大鼠关节软骨中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和白细胞介素-1β（IL—lβ）的表达,探讨褪黑素对关节软骨损伤的修复作用。方法将大鼠随机分为4组,每组10只。A组为正常对照组,B组为骨性关节炎组,C组为骨性关节炎＋去松果体模型组,D组在C组基础上给予关节腔注射褪黑素治疗（大鼠成功建模1周后,每周4次给予左膝关节腔注射浓度为20g／L褪黑素溶液O．2mL,共4周）。最后1次注射褪黑素后,采集A、B、C组大鼠心尖处血液,应用酶联免疫吸附法检测血清褪黑素水平。然后处死全部大鼠,取左膝股骨髁软骨行大体观察、组织学及免疫组织化学染色观察。结果A组软骨表面光滑有弹性,边缘规整,软骨细胞排列整齐;B组软骨表面粗糙无光泽,存在软骨软化及软骨下骨外露现象,软骨细胞排列及结构紊乱;C组较B组严重;D组软骨软化及软骨剥脱现象较B、C组减轻,软骨下骨外露减少,软骨细胞排列及结构较为整齐。D组大鼠关节软骨中IL-1β的表达显著低于C组和B组,bFGF的表达显著高于C组和B组（F-225．73、285．25,P＜O．05）。结论关节腔注射褪黑素能够延缓大鼠骨性关节炎的进一步发展,其作用机制可能与上调软骨生长因子bFGF及下调炎性因子IL-1β表达有关。     

黄芪多糖对大鼠骨关节炎的影响

目的:探讨黄芪多糖对大鼠骨关节炎(OA)的影响。方法:4%木瓜蛋白酶关节腔注射建立大鼠OA模型,1周后50只大鼠分成5组:正常组、模型组、0.10,0.25,0.50 g/L的黄芪多糖治疗组,分组后即开始用不同浓度的黄芪多糖关节腔注射治疗,每3 d 1次,每次双膝各注射0.2 ml,对照组注射生理盐水。6周后处死动物,抽取血液、取关节滑膜检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),切取关节,进行大体及组织学观察,用免疫组织化学方法检测基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)在关节软骨中的表达。结果:黄芪多糖在高浓度可明显修复关节软骨的退变(P<0.01),降低关节滑膜、血清的MDA水平(均P<0.01),增加SOD活性(P<0.01);在低浓度时对关节软骨的修复作用并不明显(P>0.05),也不能显著降低关节滑膜、血清的MDA水平(均P>0.05)和增加SOD活性(P>0.05)。黄芪多糖可以抑制MMP-3在关节软骨中的表达(P<0.01),黄芪多糖在高浓度时可明显增加关节软骨中葡糖氨基聚糖(GAG)含量(P<0.01)。结论:黄芪多糖关节腔注射治疗大鼠OA可促进退变软骨的修复。     

当归多糖对大鼠骨性关节炎形态改变的影响

目的:探讨当归多糖对大鼠骨性关节炎(OA)滑膜和软骨形态学改变的影响。方法:4%木瓜蛋白酶关节腔注射建立大鼠OA模型,1周后,56只大鼠分成正常对照组、当归多糖对照组、模型对照组、小剂量组、中剂量组、大剂量组、阳性对照组。分组后即开始给予不同浓度的当归多糖关节腔注射,每3d1次,每次双膝各注射0.1ml,正常对照组和模型对照组注射等量生理盐水,阳性对照组给予硫酸氨基葡萄糖100mg/kg灌胃,每天1次。5周后处死动物,取关节滑膜行组织学观察并评分,切取关节软骨行大体及组织学观察,HE染色和番红O染色,并行Mankin's评分;用透射电镜观察软骨细胞和亚细胞形态变化。结果:中、大剂量组较模型对照组Mankin's评分降低(均为P<0.01),滑膜评分降低(均为P<0.01);较阳性对照组Mankin's评分增高(均为P<0.01),滑膜评分无明显差别(P>0.05)。小剂量组也有相同的作用,但较中、大剂量组作用弱(P<0.01)。透射电镜显示小、中、大剂量组均能抑制OA软骨细胞粗面内质网和高尔基体改变,且中、大剂量组作用较小剂量组明显。结论:当归多糖关节腔注射治疗大鼠OA可促进退变软骨修复,降低滑膜炎症和纤维化程度。