乙型肝炎与肝炎后肝硬化血清HBVM和HBV DNA测定分析

目的：探讨乙型肝炎与肝炎后肝硬化患者中血清乙型肝炎标志物HBVM与HBV DNA的阳性表现及其对临床诊断及治疗的意义。方法：对我院收治的214例有乙型肝炎及肝炎后肝硬化患者同时进行HBVM与HBV DNA检测,对HBVM用ELISA方法进行定性分析。结果：HBV DNA定性检测结果表明,急慢性肝炎患者中HBV DNA阳性率与肝炎后肝硬化患者血清中HBV DNA阳性率比较有显著性差异（P〈0.01）;乙型肝炎和肝炎后肝硬化患者HBsAg、HBeAg,抗HBc阳性患者中,HBV DNA阳性率为94.16%,HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性患者中HBV DNA阳性率为61.64%,两者比较有显著性差异（P〈0.01）。其中,3例HBV DNA阳性,但HBVM全阴性,7例抗HBsAb、抗HBe、抗HBc阳性,1例HBV DNA呈阳性。肝功能检测提示患者有肝细胞损伤。结论：HBVM的检测不能作为HBV感染及HBV活动的唯一指标;HBV DNA能准确地反映HBV感染及HBV活动的情况。     

巢式聚合酶链反应检测不同人群隐匿性乙型肝炎病毒感染

目的：探讨不同人群隐匿性乙型肝炎病毒（HBV）感染情况。方法：采用巢式聚合酶链反应（PER）检测268例健康献血员、386例健康体检自然人群、73例不明原因肝炎患者、26例丙型肝炎患者、38例肝硬化患者和36例肝癌患者血清HBV DNA。结果：隐匿性乙型肝炎病毒感染率分别为0．37％、4．92％、35．62％、19．23％、10．53％和16．67％。隐匿性HBV感染者中,抗HBc或抗HBc和抗HBe阳性者占51．29％。结论：隐匿性HBV感染在不同人群中广泛存在,其与抗HBc存在高度相关。     

荧光定量PCR检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的临床意义

目的检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的含量,了解其与免疫学指标的关系。方法采用荧光定量PCR技术和ELISA法,分别检测287例乙型肝炎患者血清中HBVDNA含量和免疫学指标。结果287例乙型肝炎患者血清中检出HBVDNA199例,阳性率为69.34%(199/287);144例HBsAg、HBeAg、抗HBc三项阳性的血清,其血清中HBVDNA也全部阳性;而HBsAg、抗HBe、抗HBc三项阳性和HBsAg、抗HBc二项阳性的标本,HBVDNA的检出率分别38.9%(42/108)和37.1%(13/35)。结论乙型肝炎患者血清中HBVDNA的拷贝数与HBeAg密切相关,但系统转换不能说明HBV停止复制,而只是复制水平的降低而已。     

不明原因肝炎患者隐匿性乙型肝炎病毒感染检测分析

目的探讨不明原因肝炎患者隐匿性乙型肝炎病毒（HBV）感染情况及隐匿性感染的机制。方法采用巢式聚合酶链反应（PCR）检测103例不明原因肝炎患者血清HBVDNA。用电化学发光免疫技术对检测出的隐匿性HBV感染者血清HBsAg进行定量测定。结果隐匿性乙型肝炎病毒感染率为17．5％。电化学发光免疫技术检测隐匿匿性HBV感染者血清HBsAg,未检出有3例,在0．05～0．1ng／ml有8例,0．1～0．5ng／ml有6例,3．5ng／ml有1例。隐匿性HBV感染者血清HBVDNA水平为10^3～10^6copies／ml。结论隐匿性HBV感染是不明原因肝炎的病因之一。隐匿性HBV感染者血清HBsAg阴性的机制主要是HBV复制和基因表达的严重抑制,以及HBV基因突变。     

HB-VM模式与定量PCR关系

目的 :探讨血清HBVDNA水平与HBV标志物 (HBV M)表现模式的关系。方法 :对 12 0 7例慢性乙型肝炎患者进行血清HBVDNA荧光定量PCR分析 ,HBVM检测采用ELISA法。结果 :血清HBVDNA水平与HBVM表现模式有关 ,HBsAg与HBeAg的存在影响HBVDNA水平变化。结论 :HBeAg和HBVDNA有明显的相关 ,抗 HBe、抗HBc阳性者病毒未完全停止复制 ,只是复制水平降低     

HBV DNA测定对HBsAg阴性慢性乙型肝炎的临床意义

目的探讨HBV DNA对测定对HBsAg阴性慢性乙型肝炎（隐匿性乙型肝炎）的临床意义。方法对83例HBsAg阴性的慢性乙型肝炎HBV感染患者用酶联免疫检测法检测HBVM（HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc）,同时采用PCR技术对血清HBV DNA进行定量分析。对照组为同期经典的慢性乙型肝炎患者。结果83例HBsAg阴性慢性乙型肝炎患者中,HBV DNA阳性率为28.9%,单独抗-HBs阳性的慢性肝炎组HBV DNA阳性率为27.3%,抗-HBe,抗-HBc并存者HBV DNA阳性率为24%,抗-HBs、抗-HBe及抗-HBc三者阳性的慢性乙型肝炎患者HBV DNA阳性率为35%。单一的抗-HBc阳性的慢性乙型肝炎组HBV DNA阳性率为25%,HBeAg、抗-HBc阳性者HBV DNA阳性率为66.7%。结论HBsAg阴性HBV感染仍是我国原因不明肝病的主要原因之一,也是乙型肝炎疫苗接种无应答的原因之一,临床应重视这种低水平的HBV复制,以免造成宫内输血及肝移植后HBV感染。     

PCR-微流芯片法检测HBV感染者外周血HBV cccDNA和HBV DNA

目的：探讨HBV感染的肝病患者血中HBV cccDNA、HBV DNA的临床意义。方法：采用PCR-微流芯片法检测105例HBV感染者血清HBV DNA、HBVccc DNA、白细胞中HBV cccDNA（3例进行肝组织HBV cc-cDNA检测）,以6例非乙型肝炎患者作为对照。结果：6例非乙型肝炎患者HBVM、HBV DNA、HBV cccDNA均阴性;HBV感染者中41.9%（44/105）白细胞HBVccc DNA阳性,其中2例阳性PCR产物经基因测序得到验证;HBVDNA≥105copy/ml中HBV cccDNA阳性率57.4%（35/61）显著高于HBV DNA〈105copy/ml者20.5%（9/44,P〈0.01）;18.9%HB VDNA〈103copy/mlHBV感染者HBV cccDNA阳性;抗病毒治疗的慢性肝病患者HBV cccDNA阳性率显著低于未抗病毒治疗者（5/25 VS 34/65,P〈0.01）。结论：HBV感染的患者外周血中存在HBV cccDNA;HBV DNA高浓度者HBV cccDNA检出率高;外周血白细胞HBV cccDNA、血清HBVDNA联合检测更能准确判断抗病毒治疗效果及提高HBV复制检出率。     

乙肝病毒标志阴性慢性病毒性肝炎患者HBV-DNA及肝组织中HBsAg、HBcAg检测的临床意义

目的:探讨HDVM阴性慢性肝炎患者血清HBV-DNA及组织中HBsAg、HBcAg检测的临床意义。方法:对24例原因不明的慢性肝炎患者应用酶联免疫,吸附试验(ELISA法)检测血清HBV-M(HBsAG、抗HBS、HBcAg、抗HBc、抗HBc),抗HAV-IGM,抗HCV-IgMI、gG,抗HDV-IgMI、GG,抗HEV-IGMI、GG,抗EBV-IGM,抗CMV-IgM,抗TTV-IgM:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对患者进行血清中乙型肝炎病毒基因(HBVDNA)定量检测;应用免疫组化法,通过肝组织活检测定患者肝组织中HBsAg、HBcAg的表达情况。结果:24例HBVM阴性肝病患者中,6例可检测到HBV-DNA,其中5例肝组织中HBsAG、HBcAg同时阳性,1例HBsAg(+)、HBcAg(-);18例血清HBV-DNA阴性患者中用肝组织活检者3例,其中1例肝组织中HBsAg、HBcAg同时阳性。结论:HBVM阴性不能排除乙型肝炎病毒感染,应结合血清HBV-DNA测定及肝组织中HBcAg、HBcAg的检测,以防漏诊、误诊。     

Taqman技术检测儿童HBV DNA载量的临床应用

目的：研究儿童HBV DNA及血清学标志物与乙肝病毒复制的关系,探讨其应用于儿童乙型肝炎患者的临床价值。方法：对190例儿童乙型肝炎患者血清分别采用Taqman技术测定HBV DNA,ELISA法（酶免疫吸附法）检测血清标志物,速率法检测丙氨酸转氨酶（ALT）,综合分析并评价其相互关系及临床联合检测的价值。结果：190例患儿HBsAg＋、HBeAg＋、抗HBc＋阳性组125例,HBV DNA检出125例,检出率100%;ALT增高35例,占28%。HBsAg＋、抗HBe＋、抗HBc＋阳性组55例,HBV DNA检出15例,检出率27.3%;ALT增高10例,占18%。HBsAg＋、抗HBc＋阳性组10例,HBV DNA检出1例,检出率10%。结论：抗HBe阳性组复制水平相对较低,与成人无显著差异,HBVDNA载量与ALT水平高低无相关性,乙肝病毒含量的高低与肝功能受损程度不呈正相关。     

乙型肝炎患者HBV-DNA与HBV-M及HBV-DNA前C/C区变异的对比研究

目的:探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒血清学标志(HBVM)与HBVDNA及HBVDNA前C/C区变异检测结果的相关性与临床意义。方法:对359例乙型肝炎患者血清的HBVM和HBVDNA及HBVDNA前C区1896/1814位变异检测结果进行比较;HBVM用ELISA定性分析法检测;HBVDNA用PCR荧光定量法检测;HBVDNA前C/C区用基因芯片显色法检测。结果:急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化HBVDNA检出率分别为81.8%、62.4%、44.7%,三组进行组间比较,差异均有显著性(P<0.01);HBsAg与HBeAg均阳性组HBVDNA检出率显著高于HBsAg与抗HBe均阳性组(P<0.01);HBsAg与抗HBe均阳性组的变异率高达50.7%,显著高于HBsAg与HBeAg均阳性组(P<0.01)。结论:HBVDNA是评价HBV活动最理想的标志;HBVDNA前C/C区变异在我国乙型肝炎患者中普遍存在,对抗HBe阳性患者的临床意义更大;抗HBe的出现不能作为HBV复制停止的指标;HBVDNA量的变化可作为临床评价病毒复制和抗病毒疗效的参考指标。     

晚期原发性肝癌患者血清PCR－HBV DNA的意义

目的：为进一步研究ＨＢＶ感染与原发性肝细胞癌的关系．方法：ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ和抗－ＨＢｓ；ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ．结果：３７例晚期原发性肝癌患者血清ＨＢ－ｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ阳性者分别为１７例（４５．９５％），４例（１０．８１％），１６例（４３．２４％）和９例（２４．３２％），而抗－ＨＢｓ全部阴性．聚合酶链式反应检测ＨＢＶＤＮＡ，１８例（４８．６９％）阳性，非常显著地高于ＨＢｅＡｇ检出率（Ｐ＜０．０１）．抗－ＨＢｅ阳性中有７例ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ阳性．ＨＢＶ总感染率８９．１９％．结论：提示原发性肝癌发生与ＨＢＶ感染有关．     

乙型肝炎病毒基因定量检测及临床应用

目的：了解乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒基因(HBVDNA)水平与乙型肝炎病毒(HBV)感染的临床关系及HBVDNA定量分析在拉米夫定治疗中的应用；方法：用聚合酶链反应(PCR)技术测定109例HBV感染者血清中HBVDNA水平及观察35例乙型肝炎患者拉米夫定治疗效果；结果：109例HBV感染者血清中HBVDNA水平与乙型肝炎病毒五项指标(HBV—M)的阳性模式有一定相关性，在HBsAg、HBeAg阳性模式中约有93％以上病例HBVDNA阳性，其含量最高，而在HBsAg，抗—HBe，抗—HBc阳性模式中其HBVDNA阳性检出率仅为67．7％，其含量不高。HBVDNA水平与乙型肝炎临床分型的相关性不显著(P＞0．05)。拉米夫定治疗前后血清HBVDNA含量有显著性差别(P＜0．01)；结论：应用PCR技术定量检测血清HBVDNA含量是诊断乙型肝炎和了解病毒复制与临床关系的重要指标，是指导乙型肝炎抗病毒治疗的重要手段。     

HBsAg无症状携带者血清HBV DNA与Pre S_2关系初探

应用Dig-HBV DNA探针点杂交检测96例HBsAg无症状携带者血清HBV DNA,同时检测其HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc及Pre S_2。结果表明,HBV DNA与HBeAg及Pre S_2有着极为密切的平行关系。Pre S_2与HBV DNA阳性强度基本符合,Pre S_2可作为HBV复制的敏感指标。HBVDNA与抗HBc无直接关系,说明抗HBc仅能作为HBV感染的一项指标。抗HBe阳性,患者传染性低,但不排除其具有传染性的可能。     

HIV-1感染者中HCV感染对于隐匿性HBV感染的影响

目的探讨在人免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)感染者中丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染对于隐匿性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染的影响。方法研究对象为河南某艾滋病治疗示范区中178例乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)阴性的经有偿献血感染HIV-1未经抗病毒治疗的患者,检测项目包括肝功能,HBV及HCV血清标志物,HBV DNA和HCV RNA。分析HIV-1阳性,抗HCV阳性、抗HCV阴性组及HIV-1/HCV感染组中不同HCV RNA载量组HBV病原学检测结果方面的差异。结果 178例HBsAg阴性的HIV-1感染者中,HBV-M全阴性35例;单独抗HBs阳性25例;单独抗HBc阳性51例;HBsAb及HBcAb均阳性34例。抗HCV阳性HIV-1感染者与抗HCV阴性HIV-1感染者的年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05);丙氨酸转移酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)浓度比较差异有统计学意义(P<0.05);总胆红素(total bilirubin,TBIL)浓度比较差异无统计学意义(P>0.05);乙肝标志物(HBV marker,HBV-M)阴性、单独乙肝表面抗体(hepatitis B surface antibody,HBsAb)阳性、单独乙肝核心抗体(hepatitis B core antibody,HBcAb)阳性、HBsAb及HBcAb均阳性及HBV DNA阳性例数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。不同HCV RNA载量患者HBV DNA检测结果比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论经有偿献血感染HIV-1人群中,HCV感染及HCV RNA载量高低与隐匿性HBV感染的发生无关;但合并HCV感染可加重HIV-1感染者的肝功能损害。     

探讨Pre-S1与PCR-HBV-DNA拷贝数的关系

目的进一步探讨Pre-S1抗原与HBV-DNA拷贝数在临床上的应用。方法2007年10月至2008年3月所有住院和门诊的HBV感染者共680人，其中同时检测PCR-HBV-DNA检查的共200人。Pre-S1抗原用双抗体夹心酶联免疫吸附实验（ELISA），HBV-DNA拷贝数用实时荧光监测。结果HBe Ag阳性的．HBV-DNA几乎全阳性。HBeAb阳性的．HBV-DNA拷贝数阳性率比较低。大三阳患者（1．3．5阳性），Pre-S1抗原和HBV-DNA同时阳性的比率为97．8％。小三阳患者（1．4．5阳性）Pre-S1抗原和HBV-DNA同时阳性的比率为32．0％，1．5阳性Pre-S1抗原和HBV-DNA同时阳性的比率为35．0％。结论虽然Pre-S1抗原与HBV-DNA的复制相关，可作为早期诊断．疗效．评估等的指标，但在临床上和HBV-DNA同时监测是很有必要的。     

胰腺癌和原发性肝癌组织中HBVDNA原位杂交的研究

目的研究胰腺癌和肝癌组织HBVDNA状况及其病因学意义.方法51例胰腺癌和37例肝癌手术切除标本经10.0%福尔马林固定后常规制作石蜡包埋切片,HBVDNA染色方法为原位杂交法.结果16例胰腺癌(31.4%)HBVDNA阳性,阳性病例血清HBsAg均阳性;28例肝癌(75.6%)HBVDNA阳性,阳性病例AFP值阳性率及肝硬化程度明显地高于阴性病例,HBVDNA与胰腺癌和肝癌其他临床病理特征无明显关系.结论HBV感染除与肝癌发生密切相关外,也可能是胰腺癌发生的一个重要致癌因素.     

慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA与HBV标志的关系

目的：探讨慢性乙肝患者血清乙肝病毒脱氧核糖核酸（ＨＢＶＤＮＡ）与ＨＢＶ标志的关系。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１２６例慢性乙肝患者的血清ＨＢＶＤＮＡ进行检测。结果：ＨＢｅＡｇ阳性患者血血清ＨＢＶＤＮＡ检出率为７３．３％,ＨＢｓＡｇ阳性和抗－ＨＢｅ阳性患者血清ＨＢＶＤＮＡ检出率分别为５５．０％和４０．８％。结论：ＨＢＶＤＮＡ反映乙肝病毒复制方面比ｅ系统更敏感,是反映乙肝病毒复制的重要指标之一。     

聚合人血清白蛋白受体在乙肝病毒感染中临床意义的研究

对191例各类HBV感染者检测了PHSA受体、HBVDNA、e系统以及其它HBV的血清学标志,其中28例做了肝穿活检,25例进行了1～10个月的追踪观察。结果表明:PHSA受体与HBVDNA密切相关,随着PHSA受体滴度的升高,HBVDNA的水平也相应增高。PHSA受体主要存在于HBeAg阳性血清中,但18例抗一HBe阳性者亦为PHSA受体阳性,并且7例为HBVDNA阳性。PHSA受体的平均几何滴度以慢性肝病为高(ASC、CPH和CAH),急肝较低(AVH)。9例PHSA受体阳性的急肝病人,其中4例在发病时,其PHSA受体滴度<2~(10),6个月后,肝功能恢复正常,PHSA受体转阴。而5例发病时PHSA受体滴度≥2~(10)的病人,除1例外,均转为CPH,并且PHSA受体未见转阴。     

慢性丙型、乙型肝炎合并感染者血清标志物检测及干扰素治疗的临床观察

目的探讨慢性丙型、乙型肝炎合并感染者体内病毒间的相互关系，以及对干扰素治疗效果的影响。方法采用ELISA法进行血清肝炎免疫检测，用荧光定量法进行丙型肝炎病毒基因（HCVRNA）和乙型肝炎病毒基因（HBVDNA）检测，并观察比较HCV、HBV合并感染与单独HCV感染者接受干扰素治疗的效果。结果HBV、HCV合并感染者血清HCVRNA和HBVDNA阳性率明显低于单独HCV、HBV感染者（46．43％和3．57％／71．43％和66．73％），且合并感染者体内HBVDNA阳性率明显低于HCVRNA（3．57％／46．43％）。HCV、HBV合并感染者接受干扰素治疗后ALT复常率、治疗结束时病毒学应答（ETVR）率，持续病毒应答（SVR）率与单独HCV感染者无明显差异（P〉0．05）。结论在慢性HCV、HBV合并感染者中，体内HCV和HBV间存在相互抑制作用，且以HCV对HBV的抑制占优势。HBV的合并感染对慢性丙型肝炎干扰素治疗效果影响不大。     

在慢性无症状乙肝病毒感染者中检测各类核心抗体的意义

总抗-HBc均阳性的慢性无症状乙肝病毒感染者108例,在肝活检的同时,作了血清学检测。结果表明:在血清HBV DNA阴性和肝内HBcAg阴性病例中,与阳性病例相比IgA与IgM抗-HBc检出率较高,但相差不显著;总抗-HBc滴度在肝HBcAg阴性病例中显著增高.总抗-HBc滴度与肝组织炎症活动程度平行,但相差不显著;IgA与IgM抗-HBc检出率则与之密切相关,在IgA与IgM抗-HBc阳性的病例中,肝组织常有肝炎病变。