肺细胞色素氧化酶体视学测量法与高压氧研究

采用超微结构细胞化学方法,用计算机图象分析仪测量计算了小鼠肺毛细血管和Ⅱ型肺泡线粒体、线粒体膜和嵴上细胞色素氧化酶活性变化的二维形态学、三维立体学定量参数.结果表明,毛细血管线粒体面积较Ⅱ型肺泡细胞小,但体密度大;毛细血管线粒体细胞色素氧化酶阳性反应面积比Ⅱ型肺泡细胞小,但酶反应体密度大.暴露于高压氧(0.5MPa)后小鼠Ⅱ型肺泡细胞线粒体细胞色素氧化酶活性降低.     

睾酮对雌性小鼠肾脏酶细胞化学的影响

目的观察大剂量睾酮对雌性小鼠肾脏酶细胞化学的影响。②方法应用电镜细胞化学方法，观察了大剂量睾酮对雌性小鼠肾小管上皮细胞线粒体标志酶（细胞色素Ｃ氧化酶）和质膜标志酶（Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶）活性的影响。③结果对照组小鼠近端和远端小管上皮细胞内细胞色素Ｃ氧化酶活性呈高电子密度，睾酮组小鼠近端及远端小管上皮细胞内线粒体的细胞色素Ｃ氧化酶活性明显减弱，电子密度降低，其远端和近端小管上皮细胞的质膜内褶处Ｎａ＋，Ｋ＋－ＡＴＰ酶活性明显减弱。④结论大剂量睾酮可引起肾小管上皮细胞超微结构的改变，以及与能量代谢等功能有关的酶活性减弱     

大鼠心肌细胞色素氧化酶电镜细胞化学方法的改良

细胞色素氧化酶是线粒体氧化磷酸化链的最后一个酶环节,在电子传递过程中起重要作用。用电镜细胞化学方法研究心肌细胞色素氧化酶活性产物定位,对了解细胞超微结构及功     

衰老大鼠肝线粒体质与量的改变

目的：探究大鼠衰老时肝组织细胞线粒体的变化规律。方法：分别从４月龄和２４月龄大鼠的肝组织分离出线粒体，并用双缩脲法测定单位组织的线粒体蛋白；用Ｃｌａｒｋ氧电极极谱法分别测定线粒体呼吸链３个氧化酶活性：ＮＡＤＨ氧化酶、琥珀酸氧化酶和细胞色素氧化酶；用差光谱法（连二亚硫酸还原的消光值减去正铁氰化钾氧化的消光值）获得细胞色素ａ，ｂ，ｃ和ｃ１（Ｃｙｔａ，ｂ，ｃ和ｃ１）含量。结果：与４月龄大鼠相比，２４月龄大鼠的肝组织细胞线粒体含量有一定的下降，而３个氧化酶活性显著增强，同时细胞色素含量尤其是Ｃｙｔｂ和ｃ１也显著升高。结论：衰老大鼠肝组织线粒体呼吸链氧化功能增强可能是通过某种反馈机制使残存尚好的线粒体代偿性功能增强。     

马桑内酯腹腔点燃性癫痫大鼠脑的酶组织化学和超微结构的观察

作者用酶组化方法观察大鼠马桑内酯(CL)腹腔点燃各阶段大脑皮质、海马及小脑乙酰胆碱酯酶、辅酶I黄递酶、细胞色素氧化酶、乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶、酸性非特异性酯酶、酸性磷酸酶及碱性磷酸酶等8种酶活性变化,结果提示:CL引起点燃发作机理可能与其抑制脑内乙酰胆碱酯酶活性有关。电镜观察发现点燃大鼠的海马神经元有变性改变,该损伤可能是由CL毒性所致。     

941方对衰老大鼠肝线粒体酶活性的影响

目的：通过检测衰老大鼠肝组织细胞线粒体呼吸链氧化功能。探讨大鼠衰老时肝组织细胞线粒体呼吸甸氧化功能的变化规律及941方延缓衰老的作用机制。方法：分别从4月龄（青年组）、24月龄（老龄组）和941方组大鼠的肝组织分离出线粒体,并用双缩脲法测定单位组织的线粒体蛋白,用Clark氧电极极谱法分别测定线粒体呼吸链3个氧化酶活性：NADH氧化酶（NADHOX）、琥珀酸氧化酶（SUCOX）和细胞色素氧化酶（CYTOX）。用差光谱法（联二亚硫酸钠还原减正铁氢化钾氧化的消化值）获得细胞色素a、b、c和c1含量（Cyta、Cytb、Cytc和Cytc1)。结果：与青年组大鼠比较,老年组大鼠的肝组织细胞线粒体含理有一定下和,百3个氧化酶活性却显增加,同时细胞色素含量尤其是Cytb和Cytc显升高,941方组大鼠肝组织细胞线粒体上述指标皆显高于青年组和老年组。结论：衰老大鼠肝组织线粒体酶活性与青年组有显不同,表明衰老过程中肝细胞通过某种反馈机制使残存完好的线粒体氧功能代偿性增强;９４１方使这种作用进一步增强。     

鹿石合剂对缺氧缺血脑损伤新生大鼠海马神经元超微结构的影响

目的 探讨中药鹿石合剂对缺氧缺血脑损伤新生大鼠海马CA1区神经元超微结构的影响.方法 结扎右侧颈总动脉及缺氧2 h,建立缺氧缺血新生大鼠模型,以西药"洛斯宝"为阳性对照,鹿石合剂灌胃,分别以透射电镜和光镜尼氏染色观察海马CA1区神经元超微结构及尼氏小体的变化.结果 大鼠海马CA1区神经元核膜不清晰,染色质边集,大部分线粒体膜损伤,线粒体肿胀、空泡变性,线粒体嵴断裂、模糊或消失,粗面内质网数量减少、排列紊乱;鹿石合剂高剂量组粗面内质网丰富,细胞器结构接近假手术组,尼氏小体呈块状或颗粒状,染色比假手术组浓密.鹿石合剂高剂量组疗效优于"洛斯宝"组.结论 鹿石合剂可改善缺氧缺血脑损伤大鼠海马CA1区神经元超微结构的变化.     

草苁蓉提取物对亚急性衰老大鼠的抗衰老作用

[目的 ]探讨草苁蓉提取物对D 半乳糖所致衰老大鼠的保护作用 .[方法 ]用比色分析法测定各组大鼠大脑皮质超氧化物歧化酶、单胺氧化酶的活性及丙二醛的含量 ,同步观察电子显微镜下的组织学变化 .[结果 ]草苁蓉提取物可提高D 半乳糖所致而下降的大鼠脑组织超氧化物歧化酶活性 ,降低丙二醛含量 ,抑制单胺氧化酶活性 .在电子显微镜下观察到草苁蓉提取物可以减轻D 半乳糖所致的线粒体等超微结构的改变 .[结论 ]草苁蓉提取物对D 半乳糖所致衰老大鼠具有保护作用     

氯霉素处理对急性缺氧大鼠脑线粒体氧化呼吸功能变化研究

目的通过观察氯霉素处理大鼠急性缺氧暴露后脑线粒体呼吸功能和细胞色素氧化酶(COX)活性变化,了解线粒体基因组表达在缺氧引起线粒体呼吸功能改变中的作用.方法以成年雄性Wistar大鼠建立氯霉素药物处理及高原缺氧模型.应用差速离心法提取脑皮质线粒体,Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能,及细胞色素C氧化酶(COX)的活性.结果①急性缺氧24 h后大鼠脑线粒体Ⅲ态呼吸(ST3)、呼吸控制率(RCR)显著降低,呼吸Ⅳ态(ST4)较对照组显著升高;②氯霉素处理加缺氧组大鼠脑线粒体ST3较对照组显著降低,ST4较对照组、单纯缺氧、氯霉素组比较均显著降低,RCR与对照组比较显著降低,但高于单纯缺氧、氯霉素组;③单纯缺氧、氯霉素处理组脑组织COX活性显著降低,而氯霉素处理加缺氧组较单纯缺氧组COX活性从正常组的65.7%恢复至86.5%.结论①线粒体蛋白合成的抑制可导致线粒体氧化功能障碍,提示线粒体基因组的完整表达在其呼吸功能发挥中的重要作用;②氯霉素处理对缺氧造成的线粒体功能障碍具有保护作用.     

何首乌对Aβ1-40诱导的AD大鼠海马线粒体膜流动性及COX活性的影响

目的：探讨何首乌对AD模型大鼠线粒体膜流动性和COX活性的影响。方法：45只大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组（n=15）。大鼠海马内注射Aβ1-40建立AD模型。Y-型迷宫实验检测AD模型大鼠的学习记忆能力。运用荧光光度计和紫外分光光度仪分别检测海马线粒体膜的黏滞系数和细胞色素氧化酶（COX）活性。结果：与对照组比较,模型组大鼠学习记忆能力的下降（P〈0.01）,模型组大鼠海马线粒体膜的黏滞系数增高（P〈0.01）,细胞色素氧化酶活性明显减低（P〈0.01）;与AD模型组比较,治疗组大鼠线粒体膜的黏滞系数降低（P〈0.05）,细胞色素氧化酶活性明显增高（P〈0.05）。结论：何首乌可改善AD模型大鼠海马线粒体膜流动性,提高其细胞色素氧化酶活性。     

天力体保对阿霉素所致大鼠心肌线粒体毒性的保护作用

目的 确定天力体保是否对阿霉素所致心肌线粒体毒性具有保护作用；探讨天力体保是否影响阿霉素的抗肿瘤作用。方法 应用电镜细胞化学方法，从心肌细胞超微结构和细胞色素C氧化酶的改变方面，观察了天力体保的这种保护作用。结果 阿霉素所造成的大鼠心肌细胞肌原纤维排列紊乱、线粒体肿胀，嵴断裂及细胞色素C氧化酶活性降低，可明显地被抗氧化剂天力体保所防止。结论 天力体保对阿霉素所致的心肌细胞毒性具有完美的保护作用，而不干扰其抗肿瘤作用，其作用可能与心肌抗氧化状态的维持有关。     

肝细胞色素氧化酶Ⅰ在非酒精性脂肪肝大鼠形成中的作用

目的研究肝脏线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ(COXⅠ)在非酒精性脂肪肝大鼠的表达及其意义.方法Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组和高脂饲料2、4、8、12周组(其中每组各8只);紫外分光光度法测定肝脏细胞色素氧化酶活性,Western blot方法研究高脂饲料诱导的大鼠脂肪肝形成中肝细胞COX Ⅰ蛋白的表达变化,逆转录聚合酶链反应测定肝细胞COX Ⅰ mRNA表达变化.结果脂肪肝2、4、8和12周细胞色素氧化速率分别为(0.88±0.32)、(0.76±0.37)、(0.48±0.26)、(0.39±0.21)/win,与正常对照组(0.98±0.37)/min较明显降低(P＜0.01),肝细胞COX Ⅰ基因及蛋白表达随着脂肪肝程度的加重亦明显增强.结论非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素C氧化酶活性下降以及线粒体编码呼吸链相关的细胞色素C氧化酶COX Ⅰ基因和蛋白质降低,与脂肪肝引起的肝脏损害密切相关.     

α-生育酚对脑皮层神经元线粒体的保护作用

目的探讨α-生育酚对神经元线粒体的保护作用。方法将神经元细胞进行分组,分为:(1)正常对照组,(2)单纯氧自由基损伤组,(3)α-生育酚保护组。利用Fenton反应造成神经元细胞氧自由基损伤,用激光共聚焦显微镜观察各组神经元JC-1染色结果,并检测各组神经元琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CCO)活性。结果(1)JC-1染色结果分析:α-生育酚保护组神经元线粒体功能强于单纯氧自由基损伤组。(2)SDH和CCO酶活性分析:α-生育酚保护组神经元SDH和CCO酶活性高于单纯氧自由基损伤组。结论α-生育酚可以有效对抗氧自由基对神经元线粒体的损伤。     

五味子健脑补益强壮作用的药理研究

目的:观察五味子健脑茶对小鼠常压下耐缺氧、抗疲劳、走迷宫记忆的影响,观察五味子果实浸出液对老龄小鼠大脑皮质神经元超微结构变化的影响。方法:对小鼠进行耐缺氧、抗疲劳、走迷宫实验,在电镜下观察小鼠大脑皮质神经元超微结构。结果:五味子健茶脑具有明显的抗疲劳和抗缺氧作用,能明显提高小鼠的记忆力;五味子果实浸出液能延缓神经元超微结构的老化。结论:五味子对小鼠具有益智、强壮、抗疲劳、延长寿命的作用。     

大鼠大脑皮层神经元缺氧后细胞凋亡情况的动态观察

目的 观察大鼠大脑皮层神经元缺氧后细胞凋亡动态变化.方法 制备大鼠大脑皮层神经元体外原代培养模型,免疫细胞化学鉴定大鼠大脑皮层神经元,透射电镜下观察不同时间点各实验组神经元超微结构的变化,TUNEL法观察不同时间点各实验组神经元凋亡情况.结果 正常对照组神经元透射电镜下形态及染色质正常、内质网、线粒体等结构正常,缺氧组神经元水肿,细胞器破坏或消失;TUNEL法检测神经元凋亡:缺氧后各组神经元凋亡明显增加,与相应正常对照组相比有显著差异(P＜0.01),缺氧48 h神经元凋亡达高峰(IOD为0.187 ±0.007),与缺氧12、24h及72 h相比有显著差异(P＜0.01).结论 细胞凋亡在缺血、缺氧性脑损伤中呈动态变化,是神经元死亡的重要形式.恰当时间窗内对神经元凋亡进行干预将是缺血、缺氧性脑病的有效治疗措施.     

斜视性弱视猫视中枢神经元细胞色素氧化酶活性变化

观察斜视对猫外侧膝状体神经元和视歧层神经元发育的影响。方法采用细胞色素氧化酶技术,测定斜视猫外侧膝状体各投射层细胞及视皮层第Ⅳ细胞层细胞的细胞色素氧化酶活性,了解其功能与形态学的关系。结果３只斜视猫斜视眼投射到同侧外侧膝状体Ａ１层细胞的细胞色素氧化酶活性降低,而投射到对侧外侧膝状体Ａ层细胞的酶活性未见降低;斜视猫双侧视皮层了１７区第Ⅳ层发生交替柱状酶活性未见降低。结论在视觉发育可塑性敏感性内产生的     

克山病病区粮对心肌损伤作用的实验研究

本文用克山病病区粮饲养动物8周后处死。实验结果表明,病区粮饲养的大鼠心肌超微结构改变较轻,心肌细胞膜通透性增高,心肌线粒体的细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶活性下降,全血,心肌和肝脏的GSH-Px活性下降,血清、心肌和肝脏的脂质过氧化物含量也明显升高。     

大鼠视网膜节细胞细胞色素氧化酶与逆行示踪辣根过氧化物酶联合反应

大鼠经双上丘辣根过氧化物酶埋藏后,用氯化钴细胞色素氧化酶反应法处理视网膜,观察到节细胞分别呈高细胞色素氧化酶活性反应、辣根过氧化物酶标记和细胞色素氧化酶/辣根过氧化物酶联合反应,说明此法可作联合反应法使用。本实验中辣根过氧化物酶标记是在不使用过氧化氢的条件下作出的。     

缺血再灌注大鼠海马神经元超微结构的变化

目的:观察缺血再灌注大鼠海马神经元超微结构的改变.方法:雄性SD大鼠32只,随机分为缺血再灌注组和假手术组.缺血再灌注组制备缺血再灌注模型,电镜下观察两组大鼠海马神经元超微结构的变化.结果:缺血再灌注可使海马神经元超微结构尤其是线粒体出现明显损伤;缺血再灌注2h出现的神经元水肿、线粒体肿胀等损伤是可逆的;再灌注6h受损神经元增多,细胞器减少,线粒体外膜、线粒体嵴断裂;再灌注12h神经元损伤更为严重,残存的线粒体崩解呈空泡状.结论:缺血再灌注可损伤大鼠海马神经元超微结构,其作用机制可能与线粒体内Ca2 超载、NOS增加等因素有关.     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤细胞退行性变方式的超微结构研究

目的 :研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后脑细胞退行性变方式。方法 :对 7日龄 SD大鼠采用左侧颈总动脉永久性结扎联合 7.7%低氧吸入 1 h复制模型。分别在复氧后4h,2 4 h,72 h,1周取材 ,利用电镜技术观察颈总动脉结扎侧海马皮质部神经元的超微结构。结果 :神经元退行性变形式包括坏死、杂合体、凋亡、脂性退变及暗细胞。结论 :新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经元退行性变形式多样。