饮食中硒、锰含量与心肌损伤关系的实验研究

用人工合成饲料控制硒、锰含量,实验动物随机分4组:A组常硒常锰;B组低硒常锰;C组常硒高锰;D组低硒高锰。喂8周后处死。实验结果表明,除A组外,B、C、D各组均检出不同程度的心肌坏死,D组坏死率最高,C组次之,B组较低,4组间坏死检出率有显著差异。心肌电镜所见,B、C、D各组心肌和膜系统均呈现不同程度损伤,低硒高锰组(D)损伤较重。上述各实验组心肌细胞色素氧化酶和琥珀酸脱氢酶活性与A组比较均有不同程度下降。而低硒高锰组其酶活性减弱或明显减弱者居多。     

bFGF预处理对Iso致大鼠心肌损伤及Fas/FasL系统的影响

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对异丙基肾上腺素(Isoprenaline，Iso)致大鼠心肌损伤心肌细胞凋亡及Fas／FasL系统的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成三组：对照组、Iso损伤纽、bFGF预处理组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测Fas、FasL、Caspase-3蛋白及mRNA的表达水平。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显上调，bFGF预处理组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Fas、FasL、Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显下调。结论：bFGF可通过抑制Fas、FasL、Caspase-3的蛋白及mRNA表达，减少心肌细胞凋亡而减轻保护大鼠的心肌损伤。     

Fas蛋白在糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后海马区的表达及意义

目的探讨Fas蛋白在糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马区神经元损伤中的表达及意义。方法健康雄性Wister大鼠60只,随机分为4组:①正常对照组,②假手术组,③脑缺血再灌注组(NIR),④糖尿病脑缺血再灌注组(DIR组);采用STZ诱导糖尿病和线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,HE法观察海马CA1神经元缺失,用免疫组化方法检测Fas在糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马神经元损伤中的表达。结果HE染色:正常对照与假手术组未见神经元缺失和细胞凋亡,DIR组与脑缺血再灌注组均见神经元缺失和神经细胞凋亡,而DIR组比脑缺血再灌注组神经元缺失严重(P<0.05)。正常对照与假手术组极少见Fas免疫染色阳性细胞,DIR组与脑缺血再灌注组明显见Fas免疫染色阳性细胞,且DIR组比脑缺血再灌注组多(P<0.05)。结论Fas介导的细胞凋亡可能是糖尿病脑缺血再灌注损伤后海马区神经元损伤的机制之一。     

BcL-2蛋白表达与卵巢癌细胞凋亡的关系

应用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和免疫组化技术对５０例卵巢癌术后石蜡包埋组织切片进行检测发现，卵巢癌组织中有细胞凋亡和ＢｃＬ－２蛋白的表达，二者阳性率分别为６８．００％（３４／５０）和５０．００％（２５／５０）。ＢｃＬ－２蛋白表达与细胞凋亡呈负相关。提示ＢｃＬ－２蛋白可能通过抑制细胞凋亡而参与卵巢癌的发生与发展。     

防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎及血管新生的影响

目的 观察防己黄芪汤对DBA/1小鼠胶原诱导型关节炎（CIA）及血管新生的影响。方法 将DBA/1小鼠按体质量随机分为正常组,CIA组及防己黄芪汤组（5.4 g·kg^-1）。CIA组及防己黄芪汤组第1天以牛Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠,于第21天以牛Ⅱ型胶原和不完全弗氏佐剂免疫DBA/1小鼠建立CIA模型,并于二次免疫当天开始灌胃给药,每天1次,共给药28 d。第22天开始观察CIA小鼠的关节红肿等症状并进行关节炎评分,第49天取材后,进行组织苏木素-伊红（HE）染色观察CIA小鼠关节滑膜中血管新生情况;免疫组化检测CIA小鼠关节滑膜中血管内皮细胞标志物血小板内皮细胞黏附分子-1（CD31）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况;免疫荧光双染检测CIA小鼠关节滑膜中成熟血管和不成熟血管的情况。同时,提取大鼠胸主动脉环,采用VEGF（20 μg·L^-1）诱导大鼠胸主动脉环微血管的生长,加入不同浓度防己黄芪汤（0.25,0.5,1 g·L^-1）作用后,显微镜下观察防己黄芪汤对VEGF诱导的大鼠胸主动脉环微血管生长情况并进行拍照统计。结果 与正常组比较,CIA组小鼠炎症关节红、肿及畸形明显,临床关节炎评分、发病率、关节滑膜炎症、血管新生情况显著升高,关节滑膜中的血管密度,CD31和VEGF的阳性表达量、不成熟血管的数量均显著升高（P<0.01）;与CIA组比较,防己黄芪汤组小鼠炎症关节的红、肿及畸形明显改善,临床关节炎评分、发病率、关节滑膜炎症、血管新生情况显著降低,关节滑膜中的血管密度,CD31和VEGF的阳性表达量、不成熟血管的数量均显著下降（P<0.01）。与正常组比较,VEGF能显著诱导大鼠胸主动脉环微血管的生长（P<0.01）;与VEGF组比较,防己黄芪汤（0.25,0.5,1 g·L^-1）可显著抑制大鼠胸主动脉环微血管的生成（P<0.01）。结论 防己黄芪汤可有效缓解CIA小鼠的临床症状,降低临床关节炎评分及发病率,同时具有抑制CIA小鼠关节滑膜中及大鼠胸主动脉环中血管新生的作用。     

低硒小鼠柯萨奇B组病毒重叠感染与心肌损伤关系的研究

目的 探讨Se缺乏、CVB4、CVB3m重叠感染与心肌损伤的关系。方法 采用低Se及相对低蛋白合成饲料、饮用含Se元素水与不含硒的水的方法,饲养小鼠及其所产的幼鼠,于出生7d,幼鼠先后感染CVB4,CVB3m,2型病毒感染间隔为7d,感染CVB3m病毒后7、14、21d分别处死小鼠,取心脏做光镜、电镜检测。结果 Se缺乏组小鼠,心肌可见轻度损伤,心肌细胞色素氧化酶活力下降。病毒感染7d后,低Se 病毒组小鼠与补Se 病毒组小鼠比较,低硒病毒组血清CVB3m抗体效价1:256,补硒病毒组中和抗体效价为1:512,低硒组感染病毒的毒力增加,心肌中病毒分离滴度低硒组明显高于补硒组,心肌细胞色素氧化进一步下降,心肌损伤检出率达63.6%,心肌变性坏死的数量多,损伤面积大。结论 Se缺乏是克山病心肌损害因素之一,而柯萨奇B组2型病毒重叠感染在克山病心肌损伤过程中的作用也不能忽视。硒具有某种程度的抗病毒作用或抑病毒作用。     

尼克酰胺、β-细胞调节素、bFGF、HGF联合诱导人脐血CD34+细胞向胰岛素分泌细胞的分化

目的 探讨在体外培养条件下用尼克酰胺、β-细胞调节素(betacellulin)、bFGF、HGF诱导人脐血CD34 细胞向胰岛细胞的分化.方法 用磁性细胞分选试剂盒(MACS)分离出CD34 细胞后在含5?S,1×ITS,4.7mg/L亚油酸,10-4mol/L 2-磷酸抗坏血酸的低糖型DMEM中培养,扩增后于培养第5d加入尼克酰胺、betacellulin、bFGF、HGF进行诱导,并于诱导14d、24d留取细胞.应用RT-PCR、免疫细胞化学染色方法检测分化细胞中胰岛细胞标志物,并用ELISA方法检测培养液中胰岛素水平.结果 流式细胞仪检测结果显示,CD34 细胞的平均分离纯度＞90%,达到分离要求.RT-PCR检测到诱导后的CD34 细胞表达nestin、ngn3、IPF-1 mRNA.免疫细胞化学染色可见诱导的CD34 细胞中出现nestin和insulin阳性表达细胞.胰岛素分泌细胞的分化率平均为(9.8±2.7)%.ELISA检测发现诱导组和未诱导组培养液中的insulin含量有显著性差异(P＜0.01).结论 体外联合应用上述因子能诱发脐血CD34 造血干细胞向胰岛素分泌细胞的分化.     

IGF-I对ISP损伤大鼠心肌ATP、ADP、AMP变化影响的实验研究

目的 研究胰岛素样生长因子Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）对异丙基肾上腺素（ＩＳＰ）损伤大鼠心肌ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ的影响。方法 采用大鼠ＩＳＰ心肌损伤动物模型,以ＩＧＦ－１作保护因素,用高效液相色谱法测定大鼠心肌组织中高能磷酸化合物含量。结果 与正常组相比,ＩＳＰ损伤组ＡＴＰ水平明显下降,而ＩＧＦ－Ｉ保护组与ＩＳＰ损伤组相比ＡＴＰ水平明显升高。结论 ＩＧＦ－Ｉ可抑制ＩＳＰ所致心肌能量低谢障碍,具有一定的心肌保     

NO与小鼠病毒性心肌炎心肌损伤的关系

目的 嗜鼠心肌Ｃｏｘａｃｋｉｅ Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）可诱导ＢＬＡＢ／Ｃ小鼠病毒性心肌炎（ＶＭＣ）。探讨自由基一氧化氮（ＮＯ）与ＶＭＣ心肌损伤的关系。方法 给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种０．１ｍｌ１００ＴＣＤ５０ＣＶＢ３ｍ,感染后分批断脊处死小鼠。应用双重荧光染色技术、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和共聚焦显微镜对小鼠心肿中细胞凋亡、ＮＯ相关合成酶（ＮＯＳ１、ＮＯＳ２和ＮＯＳ３）及其降解产物（Ｎｉｔｒｏ     

Caspase-3在异丙基肾上腺素致大鼠急性心肌损伤中的作用及bFGF的影响

目的：研究半胱天冬酶-3(caspase-3)在异丙基肾上腺素(isoprenaline，Iso)致大鼠急性心肌损伤中的作用及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对它的影响。方法：将Wistar雄性大白鼠随机分成3组：对照组、损伤组和bFGF保护组，光镜观察心肌组织的病理变化，TUNEL法检测心肌细胞凋亡，免疫组化和原位杂交方法检测caspase-3蛋白及mRNA的表达水平，底物降解法测定该酶的活性。结果：Iso损伤组心肌坏死较重，有显著心肌细胞凋亡，且Caspase-3基因mRNA及蛋白表达水平明显升高，酶活性增加；bFGF保护组心肌坏死明显减轻，凋亡细胞数减少，Caspase-3基因mRNA和蛋白表达水平明显下降，酶活性受到抑制。结论：bFGF可能通过抑制Caspase-3的表达和活性减少心肌细胞凋亡而减轻大鼠心肌损伤。