细胞周期蛋白A在成人急性白血病中的表达及意义

目的　探讨细胞周期蛋白A(cyclinA)在成人急性白血病 (AL)患者骨髓细胞中的表达及其临床意义。方法　采用RT PCR法对 10 0例初治及复发的AL患者进行cyclinAmRNA水平的检测 ,对其阳性表达的PCR扩增产物进行DNA测序分析。对其中 75例AL患者 ,用流式细胞术检测cyclinA蛋白表达水平 ,10例正常人作为对照。 结果　 (1)AL患者cyclinA蛋白表达在细胞周期中的分布无异常 ,cyclinA蛋白及mRNA的阳性率 (分别为 6 6 7% ,5 9 0 % )和中位表达水平 (分别为18 5 % ,0 5 39± 0 4 90 )明显高于正常人 ,同一实验条件下未发现在正常人中有cyclinA蛋白及mRNA阳性表达 (P <0 0 1) ;经测序分析发现cyclinA阳性扩增片段序列与基因库中的目标序列完全一致 ;(2 )cyclinA蛋白及mRNA水平与S期、G2 /M期细胞所占的比例呈正相关 (P <0 0 1)。 (3)复发组急性淋巴细胞性白血病 (ALL)患者的cyclinA蛋白表达水平 (15 4 % )明显低于初治组(2 9 5 % ) ,差异有统计学意义 (t=14 4 18,P =0 0 2 2 )。 (4 )cyclinA蛋白或mRNA高表达患者的完全缓解率 (分别为 87 9%、85 7% )明显高于低表达患者 (分别为 38 2 %、5 3 3% ) (P <0 0 5 )。结论　cyclinA在AL患者中是一种增殖标志 ,是影响AL患者完全缓解率的因素 ,其高表达可能是AL患者     

小白菊内酯对白血病干细胞增殖和细胞周期的调节作用及分子机制探究

目的:研究小白菊内酯对白血病干细胞增殖和细胞周期的调节作用及可能分子机制.方法:培养白血病干细胞,用不同浓度的小白菊内酯处理后检测细胞活力、细胞周期以及相关基因的mRNA含量.结果:(1)细胞活力和周期:小白菊内酯能够剂量依赖性地降低白血病干细胞的MTT值,20 μmol/L小白菊内酯能够增加G2/M期的细胞比例,减少G0/G1期和S期细胞比例;(2)增殖和细胞周期调节基因:小白菊内酯能够剂量依赖性地降低c-myc、bcl-2、cyclinA1、cyclinE的mRNA含量;(3)信号通路:小白菊内酯能够剂量依赖性地降低基质细胞衍生因子1(SDF-1)及配体趋化因子受体CXCR4的mR-NA含量.结论:小白菊内酯能够抑制白血病干细胞的增殖过程并使细胞周期停滞于G2期,可能的分子机制是抑制c-myc、bcl-2、cyclinA1、cyclinE表达以及SDF-1-CXCR4信号通路.     

消痰散结方对人胃癌细胞周期及CDK4表达影响的实验研究

[目的]观察消痰散结方(主要由半夏、胆南星、鸡内金、全蝎等组成)对胃癌细胞周期及CDK4表达的影响,以探讨其抑制胃癌增殖的机理。[方法]将人胃癌MKN-45接种于裸鼠腋部皮下,分别给予小鼠消痰散结方、环磷酰胺或生理盐水21 d后处死小鼠,取出瘤组织,用流式细胞仪检测各组胃癌组织中处于G1、S期的细胞数,用免疫组化SABC法检测胃癌组织中CDK4的表达。[结果]中药组G1期细胞数为(66.84±1.14)％,空白组为(54.66±8.72)％,二者比较有显著性差异(P<0.01),中药组、化疗组S期细胞比例均明显低于空白组(P<0.01),中药组S期细胞数也明显低于化疗组(P<0.01)。中药组胃癌组织中CDK4表达总阳性率、中度及以上阳性率均明显低于空白组和化疗组(均P<0.05)。[结论]消痰散结方可明显抑制胃癌细胞的增殖;其机理可能是通过抑制CDK4的表达来影响细胞周期的完成。     

原发性乳腺癌细胞周期及凋亡与其他预后因素间的相关性分析

目的 对原发性乳腺癌患者的肿瘤细胞进行细胞周期分析和细胞凋亡状态检测.分析这两个指标与其他预后因素之间的相关性.方法 对49例原发性乳腺癌患者采用流式细胞术进行细胞周期分析和细胞凋亡状态的检测,免疫组化染色法进行ER、PR、表皮生长因子受体(EGFR)及c-erbB-2检测.结果 49例原发性乳腺癌中,异倍体肿瘤占61.2%(30/49),ER阳性占51.0%(25/49),PR阳性占53.1%(26/49),EGFR阳性占12.2%(6/49),c-erbB-2阳性占30.6%(15/49),出现腋淋巴结转移者占44.9%(22/49).原发性乳腺癌细胞凋亡率为(5.60±1.21)%.高S期细胞比例(SPF)组肿瘤标本增殖指数(PI)明显高于中SPF组,而细胞凋亡率、DNA指数(DI)、G1峰变异系数(G1CV)、G2/M期百分数、患者年龄等因素在不同倍体、不同水平SPF组间未见明显差异.二倍体原发性乳腺癌标本ER阳性率明显高于异倍体标本.而腋淋巴结转移的阳性率则相反.低、中、高SPF组间乳腺癌标本PR、EGFR阳性率的差异有统计学意义.SPF与原发性乳腺癌细胞EGFR的表达及G3/M期细胞比例有关;DI与PI有关;细胞凋亡率与PR的表达有关.ER与PR、EGFR与c-erbB-2的表达相关.尤其ER与PR两者间具有极强的正相关关系.结论二倍体和异倍体原发性乳腺癌EGFR表达和腋淋巴结转移发生率是不同的;各水平SPF组间PR、EGFR的表达明显不同;SPF与EGFR的高表达、高凋亡指数与PR的表达具有相关关系.因此,将细胞周期分析和凋亡检测与其他临床常用的乳腺癌诊断指标进行联合应用,将有助于对乳腺癌生物学行为的了解.     

大肠癌细胞周期状态与临床病理因素及细胞周期蛋白水平的相关性

目的研究大肠癌组织的细胞周期分布状态与临床病理因素的关系,以及和细胞周期调节蛋白的表达水平是否相关。方法应用流式细胞术检测45例大肠癌临床标本细胞周期中G0/G1、S、G2/M期所占的比例,并检测每例标本的细胞周期蛋白CyclinD1、CyclinE、CyclinA、CyclinB1的表达水平。结合临床病理因素进行统计分析。结果肿瘤细胞G0/G1、S、G2/M期所占的比例和患者性别、年龄、肿瘤部位、病理分级、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期均无明显相关性,均P>0.05。G0/G1期的比例与CyclinD1、CyclinE,S期与CyclinE、CyclinA,G2/M期与CyclinA的表达水平均不相关,均P>0.05;但是G2/M期的比例与CyclinB1的表达水平正相关,r=0.335,P=0.035。结论大肠癌肿瘤细胞的周期分布和临床病理因素无关,肿瘤细胞周期蛋白的表达特点与体外培养的细胞系不同,表现得更加复杂多样。     

乳腺癌术后患者CyclinA1、A2、D1、E1表达及其临床意义

目的:探讨细胞周期蛋白cyclinA1?cyclinA2? cyclinD1及cyclinE1在乳腺癌术后复发患者中的表达及其临床意义?方法:选择81例乳腺癌术后患者,研究组为41例术后5年随访期内出现复发者,对照组为40例5年未复发仍存活者?取患者标本石蜡切片,应用实时定量RT-PCR芯片技术平行检测细胞周期蛋白cyclinA1?cyclinA2? cyclinD1及cyclinE1的表达情况,进行单因素Cox回归分析?结果:cyclinA1?cyclinA2? cyclinD1及cyclinE1中cyclinA2? cyclinD1在乳腺癌术后复发患者中呈现高表达,两组间比较有显著性差异(P < 0.05),其OR值?95%CI分别为3.600(2.337~5.574)?2.604(1.726~3.927),cyclinA2?cyclinD1为乳腺癌术后复发的危险性因素?cyclinA1?cyclinE1表达两组间无显著性差异(P > 0.05)?结论:细胞周期蛋白cyclinA2?cyclinD1在乳腺癌术后复发患者中呈现高表达,可作为判断乳腺癌术后复发及预后的重要参考指标?     

68例胃癌标本DNA含量及细胞周期的变化

目的：通过对胃癌标本进行DNA倍体分析和细胞周期测定．为胃癌的诊断与治疗提供参考指标。方法：应用流式细胞仪测定分析。测定细胞悬液中G1期、S期、G2期细胞的百分率．有无异倍体细胞及DI值并与临床标本病理进行比较。结果：异倍体在癌组织、癌边缘组织与痛旁1cm组织中出现阳性率差别有统计学意义，癌旁1cm与癌旁2cm组织出现阳性率差别电有统计学意义，无异倍体的癌组织、癌旁组织、正常组织G1期、S期、G2期细胞的百分率差异有统计学意义。结论：DNA倍体分析和细胞周期测定对研究胃癌发展趋向及生物学特征具有很重要的临床价值．     

68例胃癌标本DNA含量及细胞周期的变化

目的通过对胃癌标本进行DNA倍体分析和细胞周期测定,为胃癌的诊断与治疗提供参考指标.方法应用流式细胞仪测定分析,测定细胞悬液中G1期、S期、G2期细胞的百分率,有无异倍体细胞及DI值并与临床标本病理进行比较.结果异倍体在癌组织、癌边缘组织与癌旁1cm组织中出现阳性率差别有统计学意义,癌旁1cm与癌旁2cm组织出现阳性率差别也有统计学意义,无异倍体的癌组织、癌旁组织、正常组织G1期、S期、G2期细胞的百分率差异有统计学意义.结论DNA倍体分析和细胞周期测定对研究胃癌发展趋向及生物学特征具有很重要的临床价值.     

木脂素对MGC-803胃癌细胞的抗增殖作用及其与细胞周期相关蛋白的相关性

[目的]研究木脂素对MGC-803胃癌细胞的抗增殖作用及其与细胞周期相关蛋白之间的相关性．[方法]采用MTT方法检测对照组和实验组各时间段的细胞生存率,利用流式细胞技术检测木脂素对细胞周期的影响,采用免疫细胞化学染色方法检测p53,CDK2,cyclinE及cyclinD1蛋白的表达．[结果]MTT方法检测结果见,药物浓度为25μmol／L时实验组在24,48,72h的生存率分别为82．6％±2．7％,69．1％±4．5％,50．5％±1．7％,与对照组相比较差异均具有统计学意义（P〈0．01）,并具有浓度依赖性．利用流式细胞仪检测细胞周期结果见,G1期细胞增多,S期及G2期细胞减少．免疫细胞化学染色结果见,在24,48,72h时实验组胃癌细胞突变型p53,cyclinD1,cyclinE和CDK2蛋白的阳性表达率与对照组相比较明显降低,各组间差异均具有统计学意义（P〈0．01）．[结论]木脂素对MGC-803胃癌细胞具有明显的抗增殖作用,其机制之一与下调突变型p53,cyclinD1,cyclinE和CDK2蛋白的表达,阻止胃癌细胞从细胞周期G1期进入S期,从而抑制胃癌细胞DNA合成有关．     

人脑胶质瘤组织中NF-κBp65蛋白及细胞周期检测

目的:探讨人脑胶质瘤组织中NF-κBp65蛋白的表达及其与细胞周期的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测56例脑胶质瘤、8例正常脑组织标本中NF-κBp65蛋白的表达,用流式细胞仪分析胶质瘤细胞周期分布.结果:胶质瘤组织中NF-κBp65蛋白的阳性率为67.9%(38/56),高于正常脑组织(0/8);Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组织中NFκBp65蛋白表达阳性率高于Ⅰ、Ⅱ级组织(P＜0.05),P65蛋白阳性率与瘤周水肿有关;而与患者年龄、性别及肿瘤大小等因素无关.随着NF-κBp65蛋白表达级别的增加,G0/G1细胞比例逐渐降低,S期细胞比例及细胞增殖指数PI逐渐增高.结论:脑胶质瘤组织中NF-κBp65异常高表达,其表达与胶质瘤细胞增殖活性有关.     

细胞周期素E、P21WAF1在胃癌中的表达及意义

目的:本实验通过检测细胞周期素E(Cyclin E)、P21 WAF1在胃癌中的表达及其与临床病理指标的关系,探讨二者在胃癌发生及预后中的作用.方法:应用免疫组化S-P法检测78例胃癌石蜡包埋标本及随机选取的同期癌旁组织35例中Cyclin E、P21WAF1的表达情况.结果:癌旁组织标本中Cyclin E、P21WAF1的阳性表达率明显低于胃癌组织阳性表达率.Cyclin E的表达与胃癌组织分化程度有关,Cyclin E阳性率越高,胃癌的分化程度越低.有淋巴结转移组P21WAF1的阳性表达率低于无淋巴结转移组的阳性率.结论:Cyclin E、P21WAF1与胃癌的发生、发展有关.     

PTEN和cyclin E在胃癌中的表达及其临床意义

[目的]研究PTEN和cyclin E在胃癌组织中的表达水平以及与生物学行为的关系和对预后评价的意义。[方法]以免疫组织化学方法检测106例胃癌组织中PTEN和cyclin E蛋白的表达水平。[结果]106例胃癌中,PTEN表达阳性72例(67.9%),其中弱阳性15例,强阳性57例;cyclin E蛋白阳性52例(49.1%),其中弱阳性30例,强阳性22例。在胃癌组织中,PTEN蛋白水平与胃壁浸润深度、组织分化程度,临床pTNM分期相关(P<0.05):cyclin E蛋白表达水平与胃壁浸润深度、组织分化程度、临床pTNM分期相关(P<0.05);PTEN与cyclin E蛋白阳性表达显著相关(P<0.05);单变量生存分析,cyclin E蛋白阳性表达组3年、5年生存率分别为25%,15.4%,阴性表达组为55.6%,42.6%,二者有显著差异(P<0.05)。COX回归模型多变量分析显示,PTEN和cyclin E均不是独立的预后指标。[结论]PTEN和cyclin E均与胃癌的发生发展有关,二者在胃癌表达中存在负相关性,其中cyclin E对胃癌预后判断具有一定的价值。     

Cyclin D1在胃癌中的表达

目的：探讨CyclinD1蛋白表达与胃癌发生发展及其与组织类型的关系。方法：有用S－P免疫组化技术，检测胃癌组织中CyclinD1蛋白的表达。结果：在63例胃癌标本中有20例CyclinD1阳性表达，阳性率为31．75％。50岁以下年龄组胃部CyclinD1阳性表达明显高于50岁以上年龄组（P＜0．05）。CyclinD1在胃癌不同组织类型中的表达无显著性差异（P＞0．05）。在癌周和萎缩性类，非典型增生的胃粘膜也可见CyclinD1阳性表达。结论：CyclinD1蛋白过度表达与胃癌发生发展有关，与胃癌的组织类型没有明显关系。     

胃癌组织中F框/WD-40域蛋白7和CyclinE蛋白的表达

目的:研究F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)和CyclinE蛋白在胃癌组织中的表达。方法:应用免疫组化SP法检测75例胃癌和25例癌旁正常胃组织中FBXW7和CyclinE蛋白的表达。结果:胃癌、癌旁正常胃组织中FBXW7和CyclinE蛋白阳性表达率差异有统计学意义(χ2=10.606和7.692,P=0.001和0.006)。FBXW7蛋白的表达与胃癌的分化程度(χ2=7.440,P=0.006)、淋巴结转移(χ2=4.688,P=0.030)、TNM分期(χ2=4.601,P=0.032)有关;CyclinE蛋白的表达与胃癌的浸润深度(χ2=4.902,P=0.027)、淋巴结转移(χ2=4.601,P=0.032)、TNM分期(χ2=4.408,P=0.036)有关。胃癌组织中FBXW7与CyclinE蛋白的表达呈负关联(rP=-0.459,P<0.001)。结论:FBXW7和CyclinE可能在胃癌的发生发展中起重要作用。     

细胞周期素D1在结肠癌中的表达

目的 探讨细胞周期素（ｃｙｃｌｉｎ）Ｄ１与ｐ５３基因在结肠癌中的表达意义及其关系。方法 应用原位杂交技术和免疫组织化学技术检测结肠癌中ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１基因ｍＲＮＡ和ｐ５３蛋白的表达。统计处理采用卡方检验。结果 发现结肠癌组织和癌旁组织中ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达阳性率分别为６３．４％（４０／６３）及４４．４４％（２８／６３）,两者之间差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达程度与癌组织分化程度及临床分期有关,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达与其他临床病理指标无关（Ｐ〉０．０５）。ｐ５３蛋白在结肠癌中阳性率为３８．０９％（２４／６３）,ｐ５３阳性的患者其ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的表达较之ｐ５３阴性者为高,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。结论 ｃｙｃｌｉｎＤ１的过表达及ｐ５３突变在结肠癌的癌变     

细胞周期蛋白E和p53在肾癌中的表达及其意义

目的：探讨细胞周期蛋白E及p53基因产物在肾癌组织中表达的意义和相互关系.方法：采用免疫组化方法观察46例肾癌与15例正常肾组织的p53和cyclin E的表达.结果：正常肾组织中p53和cyclin E无表达,肾癌组织中p53和cyclin E的阳性表达率分别为39.1%和34.8%（P＜0.01）,cyclin E的阳性表达与肾癌临床分期、病理分级和病理类型无关（P＞0.05）,p53的阳性表达与肾癌临床分期密切相关（P＜0.01）.p53和cyclin E在肾癌中的阳性表达具有显著相关性（P＜0.01）,临床分期的患者5年生存率明显低于阴性者（P＜0.05）.结论：p53在肾癌中的阳性表达与临床分期有关,p53和cyclin E在肾癌中的共同阳性表达可能是判断肾癌预后的指标之一.     

Cyclin E在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌预后的关系

目的　通过研究细胞周期蛋白E (cyclinE)在乳腺癌组织中的表达 ,探求cyclinE判断乳腺癌预后的潜在价值。方法　用免疫组织化学的方法检测 80例乳腺癌以及 18例良性乳腺肿瘤患者的病理组织切片标本上cyclinE、HER 2 /neu、nm2 3 H1、肌动蛋白 (actin)的表达 ,分析cyclinE与患者临床资料、HER 2 /neu、nm2 3 H1,actin间的关系。结果　CyclinE的表达率 :乳腺癌明显高于良性乳腺肿瘤 (P <0 0 1) ;乳腺癌晚期高于早期 (P <0 0 5 ) ;雌激素受体 (ER)阳性者明显低于ER阴性者 (P <0 0 5 ) ;孕激素受体 (PR)阳性者与阴性者无明显差异 (P >0 0 5 ) ;HER 2 /neu阳性者高于阴性者 (P <0 0 5 ) ,ER、PR、HER 2 /neu均阳性者表达率更高 (P <0 0 1) ;在nm2 3 H1阴性和阳性者中 ,表达无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;在actin阳性且呈连续分布者中明显低于actin阴性或不连续分布者(P <0 0 5 )。结论　CyclinE的表达水平同乳腺癌患者的预后有着密切的关系。     

CyclinE和cdk2在膀胱癌中表达及其临床意义

目的：探讨细胞周期蛋白E（cyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2（cdk2)与膀胱癌发病的关系及其临床意义。方法：应用免疫组化方法检测16例正常膀胱组织和88例膀胱移行细胞癌中cyclinE、cdk2和PCNA的表达。结果：膀胱癌中cyclinE和cdk2表达均显著高于正常膀胱组织。 cyclinE表达与膀胱癌病理分级、分期、复发和大小之间密切相关;cdk2表达则仅与肿瘤大小和PCNA指数密切相关。cyclinE和cdk2共同阳性表达者的肿瘤复发率明显增高。结论：cyclinE和cdk2的异常表达在膀胱癌发生发展过程中起重要作用,两者共同表达对于术后病人监测及治疗方案的制定具有指导意义。     

P27kipl和cyclin E在肾细胞癌中表达的研究

目的 :探讨细胞周期素依赖激酶抑制蛋白P2 7kipl(P2 7)和细胞周期素E(cyclinE)在肾癌中表达情况 ,并研究二者与肾癌生物学行为的关系。方法 :采用免疫组化SP法测定 4 2例肾透明细胞癌及 2 0例癌旁正常肾组织石蜡切片中P2 7蛋白和cyclinE蛋白的表达。结果 :P2 7在癌旁正常肾组织中的阳性率为 2 0 .0 % ,在肾细胞癌组织中的阳性率为 5 2 .4 % (P <0 .0 1)。P2 7在肾癌组织分级G1、G2 、G3 的阳性率分别为 83.3%、6 8.7%、30 .0 % ,P2 7表达与肾癌的分级呈负相关 (P <0 .0 1)。CyclinE在癌旁正常肾组织中的阳性率为 30 .0 % ,在肾细胞癌组织中的阳性率为 5 4 .8% (P <0 .0 1)。CyclinE在G1、G2 、G3 ,肾癌组织中的阳性率分别为 83.3%、6 8.8%、35 .0 % ,cyclinE蛋白的表达与肾癌的分级亦呈负相关 (P <0 .0 5 )。P2 7和cyclinE在肾癌中的表达呈正相关 (P <0 .0 1) ,r =0 .5 4。结论 :P2 7和cyclinE与肾癌的组织学分级呈负相关 ,提示 :P2 7和cyclinE有可能作为判别肾癌分化程度的标志物 ,并可能成为判断肾癌预后的有用指标。     

p57kip2和cyclin E在人宫颈癌中的表达及其与临床病理及预后的关系

目的:探讨抑癌基因p57kip2和细胞周期素E(cyclin E)在宫颈癌发生发展中的作用及其与临床病理及预后的意义. 方法: 采用免疫组化二步法检测p57kip2和cyclin E在48例宫颈癌、13例宫颈上皮内瘤变(CIN)和15例正常宫颈组织中的表达. 结果: p57kip2在宫颈癌中的阳性表达率为21%,低于正常组(93%)和CIN组(77%),差异有显著性意义(P＜0.01). cyclin E在宫颈癌中的阳性表达率为77%,明显高于正常组(13%),差异有显著性意义(P＜0.01). 在宫颈癌组织中p57kip2和cyclin E的表达呈负相关(r=-0.597, P＜0.01). p57kip2的表达与病理分化程度及肿瘤直径有关(P均＜0.05);cyclin E的表达与病理分化程度及淋巴结转移有关(P＜0.01,P＜0.05). Kaplan-Meier单因素分析宫颈癌患者生存时间与p57kip2,cyclin E阳性表达有关(P＜0.01,P＜0.01). 结论: p57kip2的低表达或缺失和/或cyclin E的高表达可能在宫颈癌发生发展中起重要作用,与不良预后有关,两者在宫颈癌细胞周期调控中可能存在着负反馈调节机制.